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植物组织培养技术教学课件PPT
核心要点突 破
答案:(1)BCD 细胞分裂素浓度大于 生长素浓度 (2)培养基中细胞分裂素含量 与生长素含量之间的比例(或培养基中细胞 分裂素与生长素的浓度比) D
高频考点例析
考点一 植物组织的培养过程及应用
例1Leabharlann (2009年高考山东卷)人参是一种名贵中 药材,其有效成分主要是人参皂苷。利用细 胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下:
基础知识梳 理
4.操作关键 (1)选材 ①要选择 初花期、 完全未开放 的花 蕾。 ②花粉最好处于 单核期细胞核由中 央移向细胞一侧的时期,花药培养的成 功率最高。 ③确定花粉发育时期最常用的方法 是醋酸洋红法 和焙花青—铬矾法 ,可以 将细胞核分别染成红色和蓝黑色。
基础知识梳 理
(2)接种 ①剥离花药尽量不损伤花药,否则 接种后容易从受伤部位产生愈伤组织 。 ②要 彻底去除花丝 ,因为与花丝相 连的花药不利于愈伤组织或 胚状体 的形 成。 (3)培养:花药培养一段时间后开裂, 长出愈伤组织 或释放出胚状体。要将前者及时转移到 分化培养基上,如释放出胚状体,要尽 快在花药开裂后,将 幼小植株分开 ,分别移植到新的培养基 上。
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一、植物组织培养的基本过程及影响因素 1.培养过程 (1)菊花组织培养过程
菊花组织脱分化,形成愈伤组织 再分化 移栽 ――→ 长 出 丛 芽 ―→ 生 根 ――→ 菊 花 植 株。
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(2)月季的花药培养
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2.影响植物组织培养的因素 (1)内因:植物的种类,同一植物材料的年 龄、保存时间的长短等。 (2)外因 ①营养 a.矿质元素。 b.有机物。 ②调节剂(生长素、细胞分裂素) a.使用顺序不同→结果不同。 b.两者用量比例不同→发育方向不同。 ③环境条件:温度、pH、光照等。
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【易误警示】 一旦发现培养物被污染, 特别是真菌性污染,一定不要打开培养瓶。 应先将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅 内进行高压蒸汽灭菌,然后再打开培养瓶进 行清理。
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3.实验操作中应注意的几个问题 (1)材料的选取:菊花的组织培养实验 中,应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧 枝;月季花药的培养实验中,应选择花粉发 育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。 (2)外植体消毒:所用消毒剂为体积分 数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化 汞溶液,所使用的清洗液是无菌水。 (3)培养过程:在初期,菊花的组织培 养需光照,月季花药的培养不需光照;而在 后期均需光照。
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二、植物激素在组织培养过程中的重要 作用
生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素,其作用及特 点为:
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激素使用 先生长素后细胞分裂素 使用顺序 先细胞分裂素后生长素 生长素与细胞分裂素同时 使用 该比值高时 实验结果 有利于细胞分裂, 但细胞不分化 细胞既分裂也分化 分化频率提高 利于根的分化,抑 制芽的形成 利于芽的分化,抑 制根的形成 促进愈伤组织的生 长
0.03 ppm 0 吲哚 0 3 ppm 3 ppm 乙酸 细胞 分裂 0 0.2 ppm 0.002 ppm 素 花芽 组织 形成愈 愈伤组织 生长 切块 伤组织 分化出根 情况
1.0 ppm 0.2 ppm 愈伤组织 分化出嫩 稍生长 枝
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请据表回答下列问题: (1)在此过程中能实现脱分化的花芽是 ________组。从实验结果可以看出,能诱导 新芽形成的条件是______________________ ______________________________________ ____________________________________。
生长素用量 与细胞分裂 素用量的比 例
该比值低时
该比值适中时
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即时应用
2.利用植物组织培养的方法可快速、 大量地繁殖植物。在培养过程中,取该植 物的花芽并将其分别培养在含有不同比例 的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中,花 芽的生长状况如下表所示:
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A组 B组花芽 花芽 C组花芽 D组花芽 E组花芽
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(2)上述实验结果表明,在植物组织培 养过程中,诱导芽和根形成的关键是_____ ______________________________________ __________________________________。 在生产实践中,欲快速、大量获得此植物的 花芽,可选用________组的培养基进行大量 生产。
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(3)激素: 生长素 和细胞分裂素。 (4)pH: 5.8左右。 (5)温度:18~22 ℃。 (6)光照:每日光照12 h。 4.实验操作步骤: 制备MS培养基→外植体消毒→ 接种 → 培养→ 移栽→栽培
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二、月季的花药培养 1.理论基础:花粉具有 全能性 。 2.花粉发育过程:四分体时期 、单核 期、双核期 等阶段。 3.产生花粉植株的两种途径:
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一、菊花的组织培养 1.理论基础:植物细胞的 全能性 。 2.基本过程: 脱分化 外 植 体 ――――→ 愈 伤 组 织 再分化 ――――→幼苗―→移栽。
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3.影响因素 (1)材料: 种类 、年龄、保存时间长短
等
(2)营养 ①无机营养 a.大量元素。 b. 微量元素 。 ②有机营养: 维生素、甘氨酸、 烟酸、 肌醇以及蔗糖等。
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即时应用
1.下列有关花药离体培养,说法错 误的是( ) A.对材料的选择最常用的方法是焙 花青——铬矾法,这种方法能将花粉细胞 核染成蓝黑色 B.材料消毒时需先用酒精浸泡,然 后用氯化汞或次氯酸钙溶液浸泡,最后用 无菌水冲洗
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C.接种花药后一段时间内不需要光照, 但幼小植株形成后需要光照 D.若接种的花药长出愈伤组织或形成 胚状体后,要适时转换培养基,以便进一步 分化成再生植株 解析:选A。确定花粉发育的时期最常 用的方法是醋酸洋红法,有些植物细胞核不 易着色时,需采用焙花青—铬矾法。