①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分 数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒 精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种
②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体 数量根据锥形瓶的大小确定，每瓶接种6－8 块外植体。
③插入时应注意方向，不要倒插。
思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实 验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养 基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养， 用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等
C、有机物、植物激素
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题 2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方 有哪些明显的不同？
答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必 需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞 的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满 足离体植物细胞对特殊营养的需求。微生物培养 基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS 培养基则需提供大量无机营养。
（三）接种
1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种 室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空 气消毒， 酒精或新洁尔灭擦洗工作台并用紫外 线照射20分钟
2、无菌操作要求
操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后， 都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。
3、材料的切取和接种
4、接种注意事项
生长素 < 细胞分裂素： 有利于芽的分化，抑 制根的分化
生长素 ＝ 细胞分裂素： 促进愈伤组织生长
（4）pH、温度、光照
pH控制在5.8左右，温度控制在18－22。C,每 日用日光灯照射12h
3、植物组织培养过程:
植物细胞培养
离
细胞分裂
体
素>生长素
组 脱分化
织、
器 官 或 细
细胞分 裂素≈ 生长素
矾法。 • 注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组
成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。通过染色， 可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核 靠边期。
•二、材料的消毒 •通常先将花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡 大30秒，立即取出，在无菌水中清洗。取出 后再用无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分，放 入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2-4分钟 （也可1%的次氯酸钙或饱和漂白粉溶液）， 取出后再用无菌水冲洗3-5次。
能量分布：约50%集中于可见光 波段
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2.太阳辐射对地球的影响
（1）太阳辐射经植物的 （2）太阳辐射是地球
生物化学 作用，可转化成有机物中的 的主要能源。
。
生物化学能
大气运动、水循环
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四、太阳活动与地球
1．太阳活动
(1)概念：太阳释放能量的 所导致的一些明显现象。
(2)类型：
植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在 的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势
使用顺序
先使用生长素，后使用 细胞分裂素
先使用细胞分裂素后使 用生长素
同时使用
实验结果 有利于细胞分裂，但不 利分化 细胞既分裂也分化
分化频率提高
③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例 对植物细胞发育方向的影响 生长素 > 细胞分裂素： 有利于根的分化
一、多层次的天体系统
1．银河系及河外星系
银河系
＋
河外星系 ＝ 总星系
由恒星、星云 等 天体组成，地球 所在的星系
河系以外， 与银河系 同级
别的恒星系统
2．太阳系
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八大行星：图中A→H依次为 水星 、金星、 地球 、火星、木星 、土星、天王星、海王星。
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温馨点拨
八大行星按其质量、体积、密度等不同， 分为三类：类地行星(水星、金星、地球、火星)、 巨行星(木星、土星)、远日行星(天王星、海王 星)。同时八大行星具有相同的运动特征，即共 面性(公转轨道几乎在同一平面内)、同向性(都自 西向东绕太阳公转)、近圆性(公转轨道都接近正 圆)。
• 2、植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处 是：培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本 相同。两者不同之处在于：花药培养的选材非常重 要，需事先摸索时期适宜的花蕾，花药裂开后释放 出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基，对培 养基配方的要求更为严格。这些都使花药培养的难 度大为增加。
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（3）植物激素的影响
①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和 赤霉素
生长素类：2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、 吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、 吲哚丁酸（IBA）
细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤 （ 6－BA）、玉米素（ZT）
赤霉素类： 赤霉酸（GA3）
②生长素和细胞分裂素作用
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影响实验结果
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
（2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等
1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝 2、消毒
①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉，用软 刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右
② 酒精处理
用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体 积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－ 7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗
③消毒液处理
取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分， 放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min， 取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液
•三、接种和培养
•四、结果分析与评价
•1、能够通过镜检找到处于适宜的发育期的花粉。用 醋酸洋红法或焙花青－铬矾法检测单核靠边期的花粉 粒。 •2、花药出现污染的原因：
•（1）消毒不彻底；（2）接种室污染； •（3）人为因素的交叉污染等。
课后习题：
• 1、F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或 AAsusu。如果运用常规育种方法，将F2代中的紫 色甜玉米分别自交，分别收获紫色甜玉米种子后再 分别种植，F3不发生性状分离的即为基因型为 AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐， 耗时较长，需要至少三年的选种和育种时间。如果 利用花药离体培养的技术，在F1代产生的花粉中就 可能有Asu的配子组合，再将花粉植株进行秋水仙 素处理，使染色体加倍，就可以直接得到紫色甜玉 米的纯合体（AAsusu）。这种方法可以大大缩短 育种周期。
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3．地月系
(1)概念：地球与其卫星 (2)特点：月球自转的 与其公转完全一样。
组成的天体系统。 和
月球
方向 周期
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二、普通而特殊的行星——地球 1．地球的普通性与特殊性
普通性
就外观和所处的位置而言，地球是太 阳系行星中一颗普通的行星
特殊性
地球是目前所知道的唯一存在高级智 慧生命—— 人类的天体
4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法
人工种子
二、实验操作 （一）制备MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般 使用4。C保存配制好的培养基母液来制备
1、配置各种母液
①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓 缩100倍，常温保存
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一 般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液
外植体：从活植物体上切下进行培养的那部 分组织或器官
愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡 化的、成无定形状态的薄壁细胞
脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈 伤组织的过程。
再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养， 又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫再 分化。
2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择
（一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再
分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格
月季的花药培养
基础知识 （一）被子植物的花粉发育
1、被子植物的花的结构是怎样的？ 2、观察下图，和减数分裂比较，你能指出对应的时
期吗？又有何特点？
练习
• 关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ BD） • A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 • B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 • C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、
单核期、双核期等阶段 • D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，
再移到细胞中央
（二）产生花粉植株的两种途径
花药中 的花粉
花药中 的花粉
胚状体 愈伤组织
丛芽 丛芽
生根
移栽
（三）影响花药培养的因素 1、材料的选择 不同植物 同一植物的不同生理状况（花期早期－初花期） 合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间） 2、培养基的组成
③用母液配制培养基时，需要根据各种母液 的浓缩倍数，计算用量
2、配置培养基
① 配制培养基（固体）
② 调PH ③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此 不必添加植物激素
3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸 汽灭菌
（二）外植体消毒
（四）培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养， 培养期间应定期消毒。培养温度控制在 18-22℃，并且每日用日光灯光照12小 时。
（五）移栽
1、打开封口膜
移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养 瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日 2、清洗转移