实验五延胡索对小白鼠的镇痛作用(热板法)
【实验目的】通过实验使学生掌握镇痛药常用实验方法,观察延胡索的镇痛作用,加深对兽医临床常用中药材功效的理解和记忆,并验证延胡索镇痛的药理作用。
【实验原理】延胡索能活血行气止痛,是止痛的良药。
热板法是筛选镇痛药的经典方法:小鼠的足部受热板刺激而产生疼痛时,就发生舔足的特殊反应。
以接触热板到舔后足所需的时间作为痛阈值,以此为观测指标。
比较用药组和对照组之间痛阈值的变化,来验证药物的镇痛作用。
【实验内容】用哌替啶注射液(lmg/ml)作阳性对照,用生理盐水作阴性对照,用盐胡索水煎醇沉液(4g/ml)作药物实验,分三组,每组5只预选合格的实验小白鼠,三组分别按0.2ml/10 g用药量经过腹腔注射哌替啶注射液、生理盐水、盐胡索水煎醇沉液,纵向比较各组小白鼠在用药前后痛阈值的变化,横向比较各组实验动物在应用不同药物后痛阈值的变化,分析结果。
【实验组织】
(一)班级进行分组,每个实验小组3名学生;
(二)每个实验小组5只实验动物;
(三)每4个实验小组组由一名专业教师或实验教师(兼职教师)进行指导。
【实验准备】
(一)实验动物小白鼠(雌性),每组预选合格数量为15只。
(二)实验器材鼠笼、水浴锅、烧杯(500ml)、天平、注射器、秒表、钳子、镊子、棉棒等。
(三)实验药品哌替啶注射液lmg/ml;延胡索水煎醇沉液4g/ml;生理盐水;苦味酸(标记用)。
【方法步骤】
(一)预选实验动物(结合给药前第一次痛阈值测定):调节水浴锅,使温度恒定在55±
0.5℃,每次取小鼠1只,放入烧杯内。
记录自放入烧杯至出现舔后足所需时间(s),
作为该鼠的痛阈值。
凡30s内不出现舔后足者,弃之不用。
依次测量各小鼠的痛阈值。
取预选合格的小鼠15只作为实验动物。
(二)实验动物的分组:随机分为3组,每组5只,用苦味酸标记并编号。
(三)用药前第二次测定痛阈值:再重测痛阈1次,将两次痛阈的平均值作为该鼠给药前的痛阈值。
(四)用药:然后,第一组腹腔注射延胡索液0.2ml/10 g,第二组腹腔注射哌替啶注射液0.2ml/10g,第三组腹腔注射等容量的生理盐水作对照。
(五)测定给药后的痛阈值:给药后的15、30、60、90min测定各鼠痛阈值。
若小鼠在热板上60s仍无痛觉反应,应取出,按60s计。
将结果记入表内,按不同时间测定的各鼠痛阈值。
【数据统计】
将实验数据按下表纪录。
根据上述数据进行结果分析。
包括组内分析和全班分析。
【注意事项】
1. 室温以15~20℃为宜,过低则小鼠反应迟钝,过高则过于敏感,而引起跳跃,影响实
验的准确性。
2. 正常小鼠一般放入烧杯后10~15s 内出现不安,举前肢,舔后足,踢后肢,跳跃等现象。
这些动作均不作为疼痛指标,只有舔后足才作为疼痛的指标。
3. 一般不选用雄鼠,因雄鼠阴囊可触及烧杯底部,易呈现敏感反应,影响结果。
【问题讨论】
试述延胡索镇痛的有效成分及机理。
痛阈提高百分率
用药后平均痛阈值 用药前平均痛阈值
用药前平均痛阈值
×100%。