硅胶柱层析色谱基本知识汇总
1.充填法：湿法和干法
湿法：将硅胶和展开剂溶剂配成悬浊液（Slurry）装柱。

干法：在柱子中装入干硅胶填实，再加入展开剂流过浸润硅胶。

在柱子中装入硅胶固定相虽然有这两种不同的办法，但是只要手法得当，把硅胶填充实，两种装法的分离效果没有明显区别。

2.分离效果和流动向的极性
硅胶柱的分离效果与和他相同固定相的TLC一致，洗脱（展开）距离变长，分离效果(△Rf)变好。

也就是说，固定相长度越长，分离效果越好。

另外，流动相极性越小，产物流出的速度越慢
3.open column chromatography和Flash chromatography
open column也称常压柱，是通过重力使展开剂流出，Flash chromatography是由空气泵将流动相加压流出。

4.经验？理论？
最开始过柱子的人，成败可能确实取决于个人运气和手法吧？个人觉得经验和理论都很有必要。

那么这里就给大家介绍一下Still的flash chromatography的要点吧。

1.TLC上想要物质的点的Rf= 0.35～0.45的展开剂来洗脱效果最佳。

2. 参照列表中，柱子的尺寸和所需的溶剂量。

（ref: 2a, Table 1 ）
3.固定相(Silica gel)的长度（高度）在15cm（或以下）的话可以用干法装柱，流动相全部加入，浸润硅胶，此过程反复1～2次。

4.粗产物用展开剂或者更小极性的溶剂溶解，打开柱子下方活塞，轻轻上样。

5.在不破坏硅胶表面平整的情况下，加入流动相，并用试管接取。

6. 能接20根试管的话，可以用TLC检测6～20根试管里有没有所要物质，当然如果接到20根还有，只能继续直到没有物质流出。

7.把相同的产物合并，然后旋蒸除溶剂。

5．其他主观经验
Rf= 0.45时，8±2根试管附近；Rf= 0.35时，13±2根附近会开始有目标化合物的点。

△Rf= ~0.05时，固定相高是22cm左右，Rf= 0.3的话，25±2根就会有目标化合物点流出。

原文中5 cm / min程度的速度使流动相流动，速度提高分离效果也不会有太大变化。

Flash chromatography中加压后会导致柱子硅胶填充更紧实，流速变慢，尤其是湿法装柱，这一点要注意，所以必要的时候也可以用干法装柱。