液相色谱基础知识及应用
HPLC 与 GC 的应用差异
HPLC
在常温下分析 样品必须溶于流动相
GC
在高温下,分析样品必须热稳定 样品必须具有挥发性
固定相和流动相均参与分离 流动相只用来带动样品,不参加分离 分析样品无分子量限定 分析样品分子量一般小于 500amu
State Key Laboratory of Chemical Resource Engineering
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1959 Porath 和 Flodin 提出排阻色谱法 1960s Giddings 比较了 LC 和 GC,总结和拓展前人的理论为 液相色谱法奠定理论基础 1960s 将高压泵与化学键合固定相应用于液相色谱,出现了高 效液相色谱系统 1969 Journal of Gas Chromatography 更名为 Journal of Chromatography 1972 Stein 和 Moore 诺贝尔化学奖 Majors 和 Kirkland 发明 microparticulate packed columns 1977 Microprocessor controlled pumps 1978 Micron packing 1983 Microbore column
多氯联苯 芳族胺 香精油 聚合物单体 脂肪酸甲酯
疏水性
C2/C5 碳氢化合物
挥发
非挥发
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1.3 色谱的发展历程
1903 1931 1938 1940 1944 1949 1952 1952 1956 1957 1958 俄国植物学家 Tswett 以碳酸钙为吸附剂,分离植物色素 Kuhn 和 Lederer 重复 Tswett 实验分离胡萝卜素 Kuhn 和 Lederer 诺贝尔化学奖 Martin 和 Synge 提出液液分配色谱 Consden 发展出纸色谱 Macllean 等人在氧化铝中加入黏合剂制成 TLC Martin 和 Synge 诺贝尔化学奖 Martin 和 James 发表完整的气相色谱理论 VanDeemter 提出色谱速率理论 Golay 开创毛细管气相色谱法 Stein 和 Moore 开发自动氨基酸分析仪
品产生保留的一相。
流动相(mobile phase):带动样品向前移动的另一相。 色谱法:是一种物理化学分离方法,它利用不同组分与两相(固定
相和流动相)之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,样 品在两相中做相对移动时,各组分在两相间进行多次平衡,使不同物 质达到相互分离。
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1 液相色谱发展历史与分类
1.1 色谱的起源 (1903)
Chromatography
色谱
M.S. Tswett
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1.2 色谱的定义
IUPAC definition of chromatography (1993) : Chromatography is a physical method of separation in which the components to be separated are distributed between two phases, one of which is stationary while the other moves in a definite direction. 固定相(stationary phase):在色谱分离中固定不动、对样
HPLC的基础知识及应用
工业催化与反应器设计实验室内部学术交流活动
徐 帅
2007年10月Hale Waihona Puke 6日Contents1
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液相色谱法发展史与分类 色谱方法基本原理 样品分析方法的建立 液相色谱的维护及注意事项 软件的简单介绍及示范
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利用混合物中各组份在不同的两相中溶解、分 配、吸附等化学作用性能的差异,当两相作相对 运动时,使各组分在两相中反复多次受到上述各 作用力而达到相互分离
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1.5 色谱的分类
按流动相的物态分: –气相色谱(Gas Chromatography, GC): 用气体作为流动相(又叫载气) –液相色谱(Liquid Chromatography, LC): 用液体作为流动相(又叫洗脱剂) 按固定相的形态分: –平面色谱 纸色谱 薄层色谱 –柱色谱 ������ 按流动相和固定相的相对极性 –正相色谱(Normal Phase Chromatography) • 固定相的极性大于流动相 –反相色谱(Reversed Phase Chromatography) • 固定相的极性小于流动相 State Key Laboratory of Chemical Resource Engineering
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1.4 色谱中的分离过程
成分分析
定性
样品纯化
分离
定量
串联应用
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色谱中的分离过程
流动相
固定相
HPLC 与 GC 的应用差异
亲水性
氨基酸 无机离子 糖醇 酶 黄曲霉毒素 脂肪酸 抗体 抗生素 类黄酮 酒精 多环芳烃 天然食用色素 脂溶性维生素 甘油三酸酯 芳香酯 磷脂 糖
挥发性羧酸
醛酮类 磺胺类 腈类 亚硝胺 糖类衍生物 环氧化 合物 有机磷 杀虫剂 甘草膦 乙二醇 抗氧化剂
合成食用色素 苯酚