1. 0.15mol/LNaCl-0.015mol/L,pH7.0柠檬酸钠溶液 2. 0.15mol/LNaCl-0.1mol/L, EDTANa2溶液 3. 5%SDS溶液 4. 氯仿-异戊醇溶液：氯仿：异戊醇=24：1 5. 95%乙醇 6. 固体氯化钠 6. 组织捣碎机 7. 冷冻离心机
四、实验操作
动物生物化学实验
实验八 动物组织中DNA的提取
一、实验目的
1.学习从动物组织细胞中提取DNA的基本原理。 2. 掌握提取DNA的基本方法。
二、实验原理
细胞中的DNA和RNA通常和蛋白质结合
成脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白而存在。这
两种核蛋白在不同浓度的盐溶液中，有不同 的溶解度。在稀盐溶液（0.15mol/L）中， 核糖核蛋白溶解度大，脱氧核糖核蛋白溶解 度小；而在高盐溶液中（ 1mol/L）中，脱氧 核糖核蛋白溶解度大，核糖核蛋白溶解度小。 利用此差异，可见两种核蛋白彼此分开。
分离到的脱氧核糖核蛋白，用十二 烷基硫酸钠（SDS）使蛋白质变性，让 DNA游离出来，再用氯仿-异戊醇混和 试剂沉淀除去变性的蛋白质。然后加入 95%乙醇，可将DNA沉淀析出。
为了防止DNA酶解，在提取过程中加柠 檬酸盐、EDTA盐并要求在40C以下进行，以 抑制DNA酶的活性。
三、实验试剂及器材
4. 将沉淀物转入小烧杯中，加入5倍体积的 0.15mol/LNaCl-0.1mol/L, EDTANa2溶液， 搅拌均匀。
5. 边搅拌，边慢慢滴加5%SDS溶液约6ml， 直至终浓度为1%。
6. 加入固体氯化钠约2.2g，使终浓度为 1mol/L，边加边搅拌，持续20分钟加完， 使氯化钠充分溶解。
1. 称取动物肝脏10g，剪碎后加入预冷的 0.15mol/LNaCl-0.015mol/L,pH7.0柠檬 酸钠溶液10ml，在组织捣碎机中捣成匀 浆。
2. 4℃，60000.15mol/LNaCl0.015mol/L,pH7.0柠檬酸钠溶液，搅匀， 4℃，6000rpm,离心15min，弃上清。
7. 将此溶液约4ml倒入离心管中，加入等体积
的氯仿-异戊醇，剧烈振荡10分钟，离心5分钟， 可见离心液分为三层：上层为清液，中层变性蛋 白，下层氯仿-异戊醇。
8. 小心吸取上层溶液，记录体积，放入干 净烧杯中，逐滴加入2倍体积预冷的95%乙醇。
边加边用玻棒慢慢按顺时针方向在烧杯内转动， 随着乙醇的不断加入，出现白色粘稠丝状沉淀物， 并逐渐缠于玻棒上，此白色粘稠丝状物即是DNA 粗品。
五、实验结果及分析
1. 将抽提的DNA交老师检查 2. 利用实验原理，说明提取过程中各步骤的目的
是什么？