一、实验室规则 二、实验室常用量器及仪器设备介绍 三、试剂配制 四、实验误差与克服 五、实验室安全知识简介 六、实验记录及实验报告
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一、实验室规则
1. 实验前认真预习实验内容。 2. 实验时遵守课堂纪律，不大声喧哗。 3. 严格按操作规程操作。 4. 爱护实验室各种器具及仪器设备，如有损坏，及时报告，
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采用修正法消除系统误差
预先将仪器的系统误差检定出来或计算出来，做出误差
表或误差曲线，然后取与误差数值大小相同、符号相反的 值作为修正值，进行误差修正。
即：x真=x测+x修
如天平砝码不准，应采用标准砝码进行校核，确定每个砝码的修 正值。在称量时就应加上相应砝码的修正值，容量瓶、滴定管、移液 管等容量仪器均可用水重量法求出各自的修正值。
ra v=( r min＋rmax) / 2
Rmin
r的测量
旋转轴
Rave
Rmax
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离心机的主要类型
离心机可分为工业用离心机和实验用离心机
实验用离心机又分为：
制备型离心机：主要用于分离各种生物材料，每次分离 的样品容量比较大.
分析型离心机：一般都带有光学系统，主要用于研究纯的 生物大分子和颗粒的理化性质，依据待测物质在离心场中 的行为（用离心机中的光学系统连续监测），能推断物质 的纯度、形状和分子量等。 分析性离心机都是超速离心机 。
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2. 准确称量、量取
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3. 溶解
4. 定容
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四、实验误差与克服
由于外界条件的影响、仪器的优劣以及感觉器官的限
制，实验测得的数据只能达到一定的准确度。
实验测得的数据与真实值之间的差就是实验误差
实验误差一般可分为系统误差、偶然误差和过失误差
。
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系统误差
在相同条件下多次测量同一物理量时，测量误差的大小 和符号都不变；在改变测量条件时，它又按照某一确定规 律而变化的测量误差称为系统误差。
球重力的倍数，单位是重力加速度“g” （980cm/sec2），
相对离心力RCF可用下式计算：
RCF = 1.119×10－5×(rpm)2 r
( rpm — revolutions per minute每分钟转数，r/min )
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由上式可见，只要给出旋转半径r，则RCF和rpm之间 可以相互换算。但是由于转头的形状及结构的差异，使每台离 心机的离心管，从管口至管底的各点与旋转轴之间的距离是不 一样的，所以在计算时规定旋转半径均用平均半径“ra v”代 替：
离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备。 生物样品悬浮液在高速旋转下，由于巨大的离心力作用 ，使悬浮的微小颗粒（细胞器、生物大分子的沉淀等）以一 定的速度沉降，从而与溶液得以分离，而沉降速度取决于颗 粒的质量、大小和密度。
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离心的基本原理
离心力：当一个粒子（生物大分子或细胞器）在高速旋
转下受到离心力作用时，此离心力“F”由下式定义，即：
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（3）电热恒温水浴锅
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三、试剂配制
1.确定所配试剂浓度
重量浓度：单位体积中所含溶质的重量。表示为克/升（g/L）
，或毫克/升（mg/L），微克/升（ug/L）
百分浓度：%，需注明W/W, W/V, V/V
摩尔浓度：每升溶液中所含溶质的摩尔数。mol/L, mmol/L,
umol/L
并按规定赔偿。 5. 公用试剂用后放回原处，瓶盖随开随盖防止污染。 6. 注意安全，不得将易燃试剂接近火焰，严禁用口吸取有毒
药品和试剂，凡发生烟雾，有毒气体和不良气味的实验应在 通风橱内进行。 7. 保持实验室整洁，每次实验毕，由三个组同学打扫及整理 实验室。
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二、实验室常用量器及仪器设备介绍 1. 常用量器
（1）容量瓶 凡要求准确（0.01)配制一
定浓度的溶液时，必须使用容 量瓶。
以容量瓶配制试剂时的操作
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（2）刻度吸管
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（3）移液器
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2.常用仪器设备
（1）离心机 承载离心管，并以离心力使管
内物质沉降进而造成固体和液体分 离的机具。
高速冷冻离心机
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离心技术简介
离心技术在生物科学，特别是在生物化学和分子生物 学研究领域，已得到十分广泛的应用，每个生物化学和分子 生物学实验室都要装备多种型出现的系统误差大小相
等、符号相反。两次测量值的平均值作为测量结果，以 消除系统误差。 例如，由于仪器灵敏度的限制，测量仪器的旋钮由右 边调近测量值与由左边调近测量值的结果往往不同。这 时，可取两个读数的平均值作为测量值。
系统误差的消除很难找到一个普遍有效的方法。这 是因为造成系统误差的各个因素，没有内在的联系。要 克服它们，只能具体问题具体分析。
最大可达510000×g，最著名的生产厂商有美国的贝克
曼公司和日本的日立公司等，离心容量由几十毫升至2
升
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超速离心 机
（2）分光光度计
分光光度计是现代生化及 分子生物学实验室常规仪器 。常用于核酸，蛋白定量以 及细菌生长浓度的定量。
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基本原理
溶液中的物质在光的照射下，产生了对光吸收的 效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的 物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过 溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程 度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合比色原 理——兰伯特-比耳定律
动物生物化学实验
2020年5月22日星期五
动物生物化学实验
实验一 实验室基本知识 实验二 氨基酸纸层析 实验三 血清蛋白含量测定 实验四 影响酶活性的因素 实验五 脂质的薄层层析 实验六 凝胶层析法基本练习 实验七 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 实验八 动物组织中DNA提取
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实验一 实验室基本知识
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实验记录
准备一本正规的笔记本作为实验记录本。 将实验条件下观察到的现象仔细地记录下来。 将实验中观测的每个结果和数据及时如实地记录。 实验中使用仪器的类型、编号以及试剂的规格、化学式
、分子量、准确的浓度等，也应记录清楚。
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工业离心机：主要用于工业上的分离。
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制备性离心机可分为三类：
普通离心机：最大转速6000 rpm左右，最大相对离心力近 6000×g，容量为几十毫升至几升，
高速冷冻离心机：最大转速为20000～25000rpm（ r/min），最大相对离心力为89000×g，最大容量可达 3升，
超速离心机：转速可达50000～80000 rpm，相对离心力
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（三）实验室急救
1. 触电 2. 玻璃割伤及其他机械损伤 3. 烫伤 4. 化学试剂灼伤 5. 汞中毒
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六、实验记录及实验报告
每次实验要做到课前认真预习，实验 操作中仔细观察并如实记录实验现象与数 据，课后及时完成实验报告。
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课前预习
实验课前要将实验名称、目的和要 求、实验内容与原理、操作方法和步骤 等简单扼要地写在记录本中，做到心中 有数。
系统误差的特点：
和偶然误差不同，它不具有抵偿性，即在相同条件下重 复多次测量，系统误差无法相互抵消。
产生系统误差的诸因素是可以被发现和加以克服的。
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系统误差的减小和消除
消除产生系统误差的根源 从产生误差的根源上消除系统误差是最根本的方法。通
过对测量过程中可能产生系统误差的各种环节作仔细分析 ，找出原因并在测量前加以消除。 如果系统误差是由外界条件变化引起的，应在外界条件 比较稳定时进行测量。
差可采取多次测量，取平均值的办法来消除，而且测量 次数越多（在没有系统误差存在的情况下），平均值就 接近于"真值"。
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五、实验室安全知识简介
（一）实验室安全
1. 安全用电 2. 水火无情 3. 严防中毒
4. 避免伤害 5. 生物危害 6. 射线伤害
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（二）实验室灭火
1. 切断室内所有电源，火源 2. 报警 3. 导线着火时，切断电源或使用四氯化碳灭火器，不 能用水及二氧化碳灭火器，以免触电 4. 可燃性液体着火时，可用湿布或沙土覆盖，隔绝空 气灭火。不能用水灭火，这样会扩大燃烧面积。 5. 金属钠着火时可用砂子覆盖 6. 衣服着火切忌奔走，应卧地滚动灭火。
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偶然误差
在实验时即使采用了最完善的仪器、选择了最恰当的方 法、经过了十分精细的观测，所测得的数据也不可能每次 重复，这样的误差即为偶然误差
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偶然误差的克服
偶然误差是由于相互制约、相互作用的一些偶然因 素所造成的，它有时大、有时小、有时正、有时负，方 向不一定，大小和符号一般服从正态分布规律。偶然误
F = m·a =m.V2/r= m·ω2 r
a — 粒子旋转的加速度， m — 沉降粒子的有效质量， ω—粒子旋转的角速度， r—粒子的旋转半径( cm )。
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相对离心力： 离心力常用地球引力的倍数来表示，因而称为
相对离心力 “ RCF ”。或者用数字乘“g”来表示。 相对离心力是指在离心场中，作用于颗粒的离心力相当于地