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流式细胞术简介及应用进展


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Principle of CBA :
微粒体 探针分子 待测分子 报告分子
CBA反应微球探针复合体结构模式图
(如可溶性血清蛋白分子的CBA检测)
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Thanks for your attention!
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FCM主要分两种类型 :
临床型——小型,科研与临床结合型 科研型——大型,基础研究和加速分
选型
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流式细胞仪——Flow cytomter,FCM 流式细胞术——Flow cytometry,FCM
激发荧光细胞分选仪——Fluorescence activated cell sorter,FACS(BD公司)
电子程序化单细胞分选仪——Electronically programmable individual cell sorter, EPICS (Coulter公司)
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BD FACSCalibur型 FCM (单L,3F)
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Coulter EPICS XL/XL-MCL (单L,4F)
光谱重叠:补偿修饰剔除联体细胞及碎片
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1、 Quantitative FCM (QFCM)
定量流式细胞术(Quantitative FCM, QFCM)是用流式细胞仪对特定细胞表面抗 原进行绝对定量。其基本原理是采用某种标 准物质获得一条标准曲线或线性方程,然后 获得待测抗原绝对分子数。
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2、cytometric bead array (CBA)
微球流式芯片技术(CBA)是一种微球多参数检测分析技 术,它用一系列的微球组合来捕获并结合流式细胞术检 测溶液中被检测物质的量,其采用夹心法分析策略。用 已知的标准品和对照标准曲线就可得出被测样品的浓度。 这种检测方法,既不受样品量的限制,也可同时检测多 项指标参数;客观、省时、人为因素影响小。
BD FACSCount
CD3\4\8 专为HIV监测设计的经济普及型流式细胞仪
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BD FACSCanto 2L 6C
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BD FACS Calibur 1L 4C
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三、流式细胞术应用的新进展
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▪高速度:分析细胞数:1000个/s→60000个/s ▪高灵敏度:荧光分子数/细胞:3000→100个FITC; ▪高准确度:区分两个细胞:参数:相差5% →1%; ▪高精度:CV值:7% →< 1%; ▪多参数:荧光:1个 →12个参数; ▪高纯度:分选细胞:80-90% →99.9%; ▪其 它:荧光信号:线性检测→对数检测
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BD FACSVantage SE
(14F, four-way sorting)
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Coulter EPICS ALTRA (空/水冷L, 6F)
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BD LSR (3L,6F)
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Coulter: FC 500
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BD FACSAria
流式细胞术在临床及科研中的应用
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Main contents:
1、流式细胞术的基本原理 2、流式细胞术在临床及科研中的应用 3、流式细胞术临床应用的新进展
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一、流式细胞术的基本原理
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1、流式细胞术(FCM)的概述
➢ 定义:以流式细胞仪为主要工具,对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗
粒细胞的各种成分进行多参数、快速的定量分析和分选的技术。
➢ FCM是诸如生物学、生物技术、计算机科学、流体力学、激光技术、高等数学、
临床医学、分子生物学、有机化学和生物物理学等到学科知识综合运用的结晶。
➢ 现代流式细胞术,更是由于结合了单克隆抗体技术、定量细胞化学和定量荧光
细胞化学的应用,使其在生物学、临床医学、药物学等等众多研究领域的应用 有了更加突飞猛进的发展
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