生物化学检验教案
教
材
生物化学检验章节实验四、方法学评价试验（3）——回收试验学时 3
教学要求教学
目的
和要
求
1、掌握回收试验的原理及操作方法。
2、掌握GOD-POD 法测Glu的原理。
教学
内容
方法学评价试验（3）——回收试验
教学
重点
难点
重点：掌握GOD-POD 法测Glu，
难点：回收试验的原理与操作；
教学
媒体
学生动手操作为主，课堂演示为辅
教学过程复习
旧课
重复性试验
讲
授
新
课
一、原理
回收是指候选方法准确测定加入常规分析标本的纯分析物的能力，用回收率表示。
将被测物标准液加入病人标本中，成为分析标本；原病人标本中加入等量的无被测物的溶剂作基础标本；然后用候选方法测定并得到各自浓度。
回收浓度=分析标本测得浓度－基础标本测得浓度。
加入浓度=()
()()标准液浓度
标准液量
病人样品量
标准液量
⨯
+ml
ml
ml回收率（%）=100
⨯
加入浓度
回收浓度
二、操作
（一）样品的处理（已制备）
1、基础血清管= 原血清0.9ml+蒸馏水0.1ml
2、回收管= 原血清0.9ml+相应的Glu标准液
回1 = 原血清0.9ml+ 11.1mmol/L的Glu标准液0.1ml
回2 = 原血清0.9ml+33.3mmol/L的Glu标准液0.1ml
回3 = 原血清0.9ml+111mmol/L的Glu标准液0.1ml
（二）操作与计算
三、结果及其讨论
课堂
提问何谓回收试验？其目的是什么？
课堂
小节回收试验的原理；GOD-POD 法测Glu
布置
作业简述回收试验的原理及注意事项。
参考书目钱士匀主编．临床生物化学和生物化学检验实验指导．第2版，北京：人民卫生出版社，2003
教研室生化检验课程生物化学检验专业（层次）医学检验(中专)
教
材
生物化学检验章节实验五方法学评价试验（4）——干扰试验学时 3
教学要求教学
目的
和要
求
1、掌握干扰试验的原理及操作方法。
2、掌握GOD-POD法测Glu的原理。
教学
内容
方法学评价试验（4）——干扰试验教学
重点
难点
重点：掌握GOD-POD 法测Glu；
难点：干扰试验的原理与操作。
教学
媒体
学生动手操作为主，课堂演示为辅
教学过程复习
旧课
回收试验
讲
授
新
课
一、原理
干扰试验是测定特异性和干扰二者引起的误差。
在具体方法学评价实验中，首先要确定被试可疑物质是否引起误差；若能引起误差，再进一步探讨其误差的来源是因为方法特性差还是干扰。
若加入的物质本身和分析试剂反应并产生读数，这是特异性差；若加入的物质并不与分析试剂反应，但它改变了分析物和分析试剂间的反应，这是干扰。
本实验选用尿酸做GOD-POD法测血糖的干扰试验，尿酸可以和GOD反应生成的H2O2反应，使部分H2O2不能参与第二步POD的偶联反应，从而降低显色强度，产生负的测定误差。
因此，尿酸对该反应有干扰，但不是尿酸被测定。
二、操作
（一）样品的处理（已制备）
1、基础血清管= 原血清0.9ml+蒸馏水(D.W.)0.1ml
2、干扰管= 原血清0.9ml+相应的维生素C干扰液0.1ml
干1 = 原血清0.9ml+10 mmol/LV C干扰液0.1ml
干2 = 原血清0.9ml+20mmol/L V C干扰液0.1ml
（二）操作与计算
三、结果及其讨论
课堂
提问何谓干扰试验？其目的是什么？
课堂
小节干扰试验的原理及操作方法，GOD-POD法测Glu
布置
作业简述干扰试验的原理及注意事项。
参考书目钱士匀主编．临床生物化学和生物化学检验实验指导．第2版，北京：人民卫生出版社，2003
教研室生化检验课程生物化学检验专业（层次）医学检验(中专)
教材生物化学检验章节实验六方法学评价试验（4）——对比试验学时 3
教学要求教学
目的
和要
求
1、掌握方法对比试验的原理及操作步骤；
2、掌握用双缩脲法及折射率法测定血清TP。
教学
内容
方法学评价试验（4）——对比试验
教学
重点
难点
重点：掌握双缩脲法及折射率法测定血清TP；
难点：对比试验的原理与操作。
教学
媒体
学生动手操作为主，课堂演示为辅
教学过程复习
旧课
干扰试验
讲
授
新
课
一、原理
方法对比试验是将候选方法与准确度已知的方法（如参比方法）作对比分析，以评价候选方法的准确度，是考核候选方法是否可被采用的重要试验。
方法对比试验是用于检测候选方法系统误差的大小包括恒定误差和比例误差，如对适当的数据进行分析，也可以提供误差的性质。
二、操作
（一）样品处理
1～10号样本：质控血清+不同体积的蒸馏水（4.5ml、4.0ml、3.7ml、3.5ml、3.2ml、3.0ml、
2.7ml、2.5ml、2.2ml、2.0ml），混匀。
（二）样品测定
1、双缩脲法：设置标准和空白，用对比法测定。
按加样：试剂比=50μl：2.5ml，37℃水
浴10min，540nm，测定出TP标准液的吸光度A s和样本的吸光度A i，并据X i=A i/A s×C s计算出样本中TP浓度X i。
2、折射率法：先调标，再测样本中TP浓度Y i
三、统计学检验
1、相关与回归：计算出a、b、r及t值，进行r的t检验；
2、配对t检验
四、结果及其讨论
比较双缩脲法与折射率法测TP的相互关系；
注意相关与配对的区别、r的t检验与配对t检验的区别。
课堂
提问
何谓对比试验？其目的是什么？
课堂
小节
方法对比试验的原理及操作步骤；
用双缩脲法及折射率法测定血清TP。
布置
作业
简述对比试验的原理及注意事项。
参考书目钱士匀主编．临床生物化学和生物化学检验实验指导．第2版，北京：人民卫生出版社，2003
教研室生化检验课程生物化学检验专业（层次）医学检验(中专)。