产生原因：生长条件的进一步恶化，使细胞内的分解代谢 大大超过合成代谢，继而导致菌体的死亡。
对数期 停滞期
静止期
衰亡期
典型的生长曲线
（二）连续培养
将微生物置于一定容积的培养基中，经过培养生 长，最后一次收获，此称分批培养（batch culture）。
如果在培养器中不断补充新鲜营养物质，并及时 不断地以同样速度排出培养物，就可保证培养器 中总菌量基本不变。这种培养方法叫连续培养法 （continuous cultivation）。
制微生物生长速率。菌体生长速率恒 出 定，菌体均一、密度稳定，产量低于 水
最高菌体产量。 应用范围：实验室科学研究。
生长曲线
对数期 停滞期
静止期
衰亡期
以培养时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标作图，得 到的曲线称为繁殖曲线，又称为生长曲线。
1. 停滞期
（滞留期，适应期）
现象：细菌不立即生长繁殖，活菌数基本不增加。 原因：适应新的环境条件，合成新的酶，积累必
要的中间产物。 特点：分裂迟缓、代谢活跃。
现象：细胞代谢活性最强，合成 新细胞物质最快，菌体大小、形 态、生理特征等比较一致。
特点：细菌数以几何级数增加， 代时稳定。
代时（G）——单个细胞完成一次分裂所需的时间，亦即增
加一代所需的时间。
例：大肠杆菌在接种时的细胞浓度为每毫升103个，经过10小时的培 养，细胞浓度增加至每毫升109个。求该菌的世代时间（G）和繁殖 代数（n）。
在微生物学中提到的“生长”，一 般均指群体生长。
群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖
二、 微生物生长的测定
显微镜直接计数法
比浊法测定细菌悬液细胞数
在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度 (optical density, 即O.D.)表示菌量。
浊度仪 或721分 光光度 仪
菌落计数法
产生原因：
营养物尤其是生长限制因子的耗尽 有害代谢废物的积累（酸、醇、毒素等） 物化条件（pH、氧化还原势等）不合适
常规活性污泥法一般利用静止期的微生物。
4. 衰亡期
特点： 细菌开始利用自身的储藏物质作为养料，进行内源呼吸 （自溶），发生自溶的菌生长曲线表现为向下跌落的趋 势。 细胞死亡数增加，死亡数大大超过新增殖的细胞数，群 体中的活菌数目急剧下降，出现“负生长”。 细胞内颗粒更明显，细胞出现多形态、畸形或衰退形， 芽孢开始释放。
特点：微生物始终以最高速 率进行生长，并可在允许范 围内控制不同的菌体密度； 但工艺复杂，烦琐。
出 光源 水
新鲜培养基
流速控制阀
反 馈 控 制
光电池
使用范围：用于生产大量菌体、 生产与菌体生长相平行的某些代 谢产物，如乳酸、乙醇等。
恒化连续培养
概念：以恒定流速使营养物质浓 度恒定而保持细菌生长速率恒定的方 法。 原理：通过控制某一种营养物浓度 （如碳、氮源、生长因子等） ，使 其始终成为生长限制因子，而达到控 制培养液流速保持不变，并使微生物 始终在低于其最高生长速率条件下进 行生长繁殖。 特点：维持营养成分的亚适量，控
3. 静止期
（稳定期，恒定期）
特点：
整个培养物中新增殖的细胞数与老细胞的死亡数处于动态平 衡，此时生长速度逐渐趋向零，培养物中的细胞数目达到最高 水平；
细胞分裂速度下降，开始积累内含物，大多数芽孢细菌也在此 阶段形成芽孢 ；
是发酵过程积累代谢产物的重要阶段，某些放线菌抗生素的大 量形成也在此时期。
第五章 微生物的生长繁殖 与生存因子
第一节 微生物的生长繁殖
一、微生物生长繁殖的概念
生长——微生物细胞吸收营养物质，进行新陈代 谢，当同化作用>异化作用时，生命个体的重量 和体积不断增大的过程。
繁殖——生命个体生长到一定阶段，通过特定方 式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加 的生物学过程。
每个平板上的菌落数目合适（30-300个），便于准 确计数
膜过滤培养法
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水 或饮用水等样品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应 的培养基上进行培养，对形成的菌落进行统计。
三、 研究微生物生长的方法
（一）分批培养
将少 量微生物 一次接种 于一定容 积的培养 基中生长 培养，最 后一次性 收获。
控制连续培养的方法主要有：
恒浊连续培养
恒化连续培养
速，使培养液浊度保持恒定 的连续培养方法。
原理：通过调节新鲜培养基 流入的速度和培养物流出的 速度来维持菌浓度不变,即浊 度不变。主要采用恒浊器 （光电控制系统测定培养器 内微生物的生长密度），当 浊度高时，使新鲜培养基的 流速加快，浊度降低，则减 慢培养基的流速。
在实际工作中如接种菌种以启动新的水处理设 施，投加新鲜污泥时，接种的细菌不习惯于新环 境，会出现或长或短的停滞期，停滞期的出现会 增加操作时间，降低工作效率。
采用处于高效菌群对数期的菌种、增大接种量、 尽量保持接种前后所处的培养介质和条件一致等 方法来缩短或消除停滞期。
2. 对数期（log phase）
影响停滞期长短的因素
菌种 ：繁殖速度较快的菌种的停滞期一般较短；
接种群体菌龄：用对数生长期的菌种接种时，其停滞期 较短，甚至检查不到停滞期；
接种量：一般来说，接种量增大可缩短甚至消除停滞期 （发酵工业上一般采用1/10的接种量）；
培养基成分：在营养成分丰富的天然培养基上生长的停 滞期比在合成培养基上生长时短；接种后培养基成分有 较大变化时，会使停滞期加长，所以发酵工业上尽量使 发酵培养基的成分与种子培养基接近。
发育——从生长到繁殖，是生物的构造和机能从 简单到复杂、从量变到质变的发展变化过程，这 一过程称为发育。
个体生长——微生物细胞个体吸收营养物质，进行新陈代 谢，原生质与细胞组分的增加为个体生长。
群体生长——群体中个体数目的增加。可以用重量、体积、 密度或浓度来衡量。
由于微生物的个体极小，所以常用群体生长来反映个体生长的状况