定性与定量的关系
定性是定量的基础 界限 有些定性方法在定性的同时就有定
量关系。有些定量方法在一定条件下， 本身也具有不同程度的定性意义。
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分析方法类别
随着分析科学和技术的迅速发展， 能应用于法医毒物分析并完成毒物 的定性鉴别和定量检测任务的分析 方法很多，将主要对以下分析方法， 尤其是仪器分析方法进行重点介绍。
检验工作不应临时照搬书籍刊物上记载 的方法，因为其中有些方法并不切合实 用。而对其中可适用于实际工作的方法， 若没有亲身体验也是难以把握的。在建 立一种新的分析方法时，尤其应该对方 法的效能进行验证。
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另外法医毒物分析工作中涉及的一些组 成复杂检材中的毒物，常需经分离净化 等处理，容易使分析结果产生较大误差， 所以验证其可靠性尤为必要。方法认证 有其具体的内容和实施办法。
分析方法概述（第一部分）
廖林川 四川大学华西基础医学与法医学院
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定性分析与定量分析
定性分析 目的 确定检材是不是某种药毒物，或确定检
材中是否含有某种或某几种药毒物。 过程
探查方向 初步判断 确证 方法要求
Ø灵敏 Ø 具有一定的选择性
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定量分析
马尾松状结晶
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理化方法
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方法类别
常用毒物分析方法
方法原理
方法特点
仪器分析法
主要包括利用毒物光学性质的光谱分析法 （spectral analysis） 利用毒物色谱行为差别的色谱分析法 （chromatography） 根据物质分子量、断裂碎片质量大小及结构特征 信息的质谱分析法 （mass spectrographic analysis） 常用的有紫外分光光度法 （ultraviolet spectrophotometry） 原子吸收分光光度法 （atomic absorption spectrophotometry） 气相色谱法 （gas chromatography） 高效液相色谱法 （high performance chromatography） 薄层色谱法（thin layer chromatography） 毛细管电泳法（capillary electrophoresis） 各类质谱法及多级色质联用法
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Absorbance 10.677
m AU 100
DAD1 A, Sig=220,30 Ref =360,100 (20010515\LFW00011.D)
80
60
40
20
0
-20 0
5
10
15
2
Diagram of Chromatograph
灵敏，准确，自动化程度 高，适用范围广，但仪器 设备昂贵，对使用人员要 求较高，可因使用不当或 仪器失准而得出错误结果
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光谱法
紫外分光光度法 （ultraviolet spectrophotometry） 荧光分光光度法 （fluorescence spectrophotometry） 红外分光光度法 （infrared spectrophotometry） 原子吸收分光光度法 （atomic absorption spectrophotometry）
成分大多结构复杂，一般具有紫外 吸收或荧光。
现场收缴纯品药物制剂或较纯的毒 品可直接用光谱法检验。
植物、掺假毒品、生物检材，因成 分复杂，一般需与色谱联用。
母体结构
O R
O
成酯结构 药物名称
CH3 N
COOCH 3 O
H
O 古柯碱
HN CH3
H
H3C CH3
O O
H
优卡因
O CH3
H5C2
O
N
H3C
简便、快速，能在一定程 度上起到筛选和鉴别的作 用，为侦查或检验提供线 索 简便易行，结果直观，可 初步筛查、判断毒物类别
免疫分析法 理化分析法
利用标记毒物与非标记毒物竞争结合抗体的原 理检测毒物
操作简便，检测省时，灵 敏度高，选择性强，耗材 少，但需专用试剂盒，且 试剂都有一定的时效
利用毒（药）物的各种理化性质进行鉴别检测， 操作简单，对设备要求不
大多毒性大，且具有 较强的生理活性和特殊 的中毒症状。 体外检材充裕、新鲜 时，可用动物作急性毒 性试验或毒效试验，以 预试是否有剧毒或有某 类毒物存在。
青蛙毒性试验
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动物试验(animal test)
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免疫分析法
机理：抗原－抗体特异性结合方法 酶免疫法（enzyme immunoassay,EIA) 放射免疫法（radio immunoassay,RIA) 荧光免疫法（luoro immunoassay,FIA) 薄层免疫法（thinlayer immunoassay,TIA) 特点：简便、快速、灵敏，种类有限，试剂较贵。 应用 ：吸毒者和运动员尿液中毒品或兴奋剂的筛查。
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毒物分析实验室规范管理 和分析质量控制基本框架Ⅰ
• 法医毒物分析工作所出具的检 验结果或鉴定结论必须科学、公 正和权威。而鉴定工作涉及的检
认证分析方法的主要项目 •纯度和收得率 •方法的准确性 •分析方法的灵敏性
材复杂，且待检物未知，含量低 •线性与检测范围
微，所以分析质量控制尤为重要。
Analyzers:
Quadrupoles Sectors Ion Trap FTMS TOF
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海洛因
乙酰可待因
O6-单乙酰吗 啡
O3-单乙酰吗啡
海洛因及其相关药物质谱图
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各类分析方法的效用
上述各类分析方法由于所依据的原理不 同，实行的操作方法不同，以及应用的 场合不同，不同的作用和效果。主要有 以下两类效用。
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作为提供科学证据的法医毒物分析的检验 结果和鉴定结论，必须保证其科学性、 公证性和权威性。除了需对分析方法进 行认证而外，还需实施毒物分析实验室 的规范化管理和质量控制建设。
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认证分析方法的主要项目
法医毒物分析对方法的要求主要是准确 和灵敏。对于组分复杂的检材，首先要 求有良好的分离净化效能。（下一学时）
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方法类别
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方法类别
常用毒物分析方法
方法原理
方法特点
形态学方法 利用检材外观形态或显微形态特征进行辨认、 比对
动物试验法 利用毒物的毒性及毒理作用机制，通过观察染 毒试验动物是否死亡或其中毒表现，初步判断 检材中是否含有剧毒物质或可能含有哪种毒物
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形态学方法——显微形态鉴别
利用显微镜观察药毒物的组织结构、细胞种类和形态以及细胞后含 物的种类及形态等，通过与已知物核对进行。 细胞种类: 纤维细胞、石细胞、栅栏细胞、薄壁细胞等。 后含物: 如淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、钟乳体、油珠等。
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动物试验(animal test)
目的 确定某种药毒物在检材中的含量和浓度， 或确定某几种药毒物分别在检材中的含量 和浓度。
需定量的情况 Ø 医疗中正常用药 Ø 饮食或人体中常有的成分 Ø 需根据量界定犯罪性质或法律责任的
方法要求
灵敏度不一定很高（能测出即可），但需 具有良好的计量关系。R/S=f（x）
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毒物分析实验室规范管理 和分析质量控制基本框架Ⅲ
质量控制应贯穿毒物分析实验室接受和实施毒物 检测的各个环节，主要包括人员综合素质，环境 设施条件，仪器设备验收、使用、保管、降级及 报废制度，合格的实验动物，合格的标准对照品 、 基 准 物 质 ， 标 准 操 作 步 骤 （ standard operating procedures，SOP），检材的采集 及保护链，分析步骤，报告结果和资料归档等内 容。最终的检验报告和鉴定结果应有行业质量控 制专职人员进行质量分析和核查。
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颜色和沉淀反应
机理 大多为生物碱，能 与具有氧化性质的 酸性试剂反应生成 有色物质；或与某 些试剂生成沉淀， 甚至特殊晶体。
方法 颜色反应: 点滴板 沉淀或结晶反应： 载玻片 显微镜
选用原则 选择性和实用性
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鸦片生物碱的颜色和结晶反应
吗啡 ＋ 碘－碘化镉钾 用于可疑毒品的预试。
•专属性 •耐用性
除了对分析方法进行认证而外， 论证的实施方法
对毒物分析实验室的规范化建设， •模拟试验
建立有效的技术和质量管理体系
•空白试验 •已知对照试验
也非常重要。
•随行参比法
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毒物分析实验室规范管理 和分析质量控制基本框架Ⅱ
国 际 标 准 化 组 织 （ international standard organization，ISO）对行业实验室有国际化的认可准 则 。 1991 年 法 庭 毒 物 学 协 会 （ society of forensic toxicology ， SOFT ） 和 美 国 法 庭 科 学 协 会 （American association of forensic science, AAFS）曾 共同发布了 《法庭毒物学实验室准则 》（forensic toxicology laboratory guidelines），2002年又在该准 则基础上进行了修改和完善，为毒物分析实验室的规 范化提供了技术和管理要求。