第十四章-免疫学实验技术抗原抗体反应
抗原-抗体反应特点
1、抗原与抗体的结合是特异性结合（特异性）
伤寒杆菌的抗体只与伤寒杆菌结合，不与痢疾杆菌结合，反之亦 然
这种特异性结合是由抗原分子上的决定簇和抗体分子V区中的超 变区相互适应所决定的。但抗原成分复杂,常含有多种抗原决定 簇,可以刺激机体分别产生相应的抗体,即多克隆抗体.
抗原-抗体反应种类
根据抗原的物理性状及参加反应的成分不同，分为： 沉淀反应 可溶性抗原与相应抗体结合所发生的反应
凝集反应 颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的反应 补体结合反应 抗原抗体结合后激活补体所致的反应
中和反应 细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应
本章思考题 简述抗原抗体反应的特点及影响因素
利用抗原抗体既能特异性结合，又能在一定条件下重新分离，可 进行亲和层析，以制备免疫纯的抗原或抗体。
3、抗原-抗体反应可分为两个阶段（反应的阶段性）
第一阶段为特异性结合阶段，此阶段需时短，无可见反应出现 第二阶段为可见反应阶段，需时较长，出现可见现象，表现为沉
淀、凝集和细胞溶解等。
4、抗原与抗体结合是否呈现明显可见的反应现象，与两者的分子 比例密切相关（最适比例性）
抗原抗体反应主要影响因素
1、电解质 在中性或碱性条件下，抗原抗体均带负电荷，适当浓度的电解质
会使它们失去一部分负电荷而相互结合，出现明显的沉淀或凝集 现象。 通常应用0.85%的氯化钠作为稀释液，以供给适当浓度的电解质。
2、温度 一般常使反应在37℃水浴中进行。 3、酸碱度 抗原-抗体反应适宜的pH为6-8
只有在抗原与抗体呈适当比例时，结合反应才出现凝集，沉淀等 可见反应结果，在最适比例时，反应最明显。
因抗原过多或抗体过多而出现抑制可见反应的现象，称为带现象。
凝集反应时，因抗原为大的颗粒性抗原，容易因抗体过多而出现 前带现象，因而需将抗体作递度稀释，而固定抗原浓度。
沉淀反应的抗原为小分子的可溶性抗原，通常稀释抗原，以避免 抗原过剩而出现后带现象。
如果两种不同的抗原物质具有部分相同或类似结构的决定簇，则 与抗体血清反应时可出现交叉反应。如变形杆菌与立克次氏体之 间有共同抗原决定族。（其他例子）
抗原结合部位
可 变 区
铰
恒
链
定
区
区
VH
CH1
N端
VH VL
VL CL Fab段
CL FC 段
CH2 补体结合
C端Βιβλιοθήκη CH3Fc受体结合2、抗原抗体结合是分子表面的非共价键结合（可逆性）
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结合力的大小取决于两分子间由氢键、疏水键、静电引力和范德 华力组成的引力与电子云产生的排斥力相互作用后的合力
两分子之间有较强的结合力,但在一定条件下,可发生解离,解离 后的抗原和抗体性质不变.
抗原与抗体的结合是分子表面的结合，这一过程受物理化学的、 热力学的法则所制约，结合的温度应在0-40℃内，pH在4-9范围 内。如超过60℃或pH降到3以下时，则抗原抗体复合物又可重新 离解。