特别是微量元素、维生素等微量成分，因用量少，不仅 称量麻烦，还容易出现误差，所以配制母液是科学和方便 的方法。使用母液不但可以保证培养基个物质成分的准确 性及配制的方便性，且便于低温保藏，从而提高工作效率。
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储备液（母液）
母液是将培养基成分扩大若干倍，一般为10倍、20倍、100倍甚至更高倍数 的浓缩溶液。
理论知识：
培养基：是植物组织培养的物质基础，也是组织培养 能否成功的重要因素之一。
培养基的主要成分是植物生长发育所必需的各种营养元素。
成分：水分（主要成分）
无机盐类：大量元素、微量元素、铁盐
有机营养成分：维生素、肌醇、氨基酸等
植物生长调节剂：细胞分裂素类、
生长素类： IAA（吲哚乙酸）、
萘乙酸 （NAA）
配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行 配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称 量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取 母液进行稀释配制即可。
以MS培养基为例，所需配制的母液可分为：MS大量元素母液、 MS微量元素母液、MS铁盐母液和MS有机化合物母液等。另外，还 要配制生长物质母液，在不同类型的培养基中使用。
16500
MgSO4·7H2O
370
10
3700
KH2PO4
170
10
1700
1000
CaCl2·2H2O
440
10
4400
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注意： (1) 配制是各化合物应分别称量、分别溶解，经充分溶解后才能混合。
（2）某些无机成分如Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等在一起可能发生化学反应， 产生沉淀物。为避免此现象发生，各种化学药品必须先以少量蒸馏水使其充分溶解后 才能混合，混合时应注意先后顺序。速度宜慢，边搅拌边混合。待第一种化合物溶解 后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入容1000ml的量瓶 中，再加水定容1000ml 。
按照扩大倍数 称量
母液分装
溶解 按顺序混合
定容
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五、实验方法及步骤 1.大量元素母液的配制
即含N、P、K、Ca、Mg、S六种元素的混合溶液，一般配成浓度为 10倍或20倍的母液。
药品名称 KNO3
规定用量mg 扩大倍
/L
数
1900
10
称取量mg 19000
母液定容体积 ml
NH4NO3
1650
10
0.025
1000 25
CoCl2·6H2O
0.025
1a 000 25
母液定容体积 ml 1000
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3.铁盐母液的配制
Fe是用量较多的一种微量元素，因铁离子在水溶液中不稳定， 易与氢氧根离子结合二发生沉淀，必须单独配制。只有其螯合物才 容易被植物吸收和利用，因此需要单独配制成铁盐螯合物母液。
目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物，必须 单独配成母液。这种螯合物使用起来方便，比较稳定，且不易发生 沉淀。
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10
（3）CaCl2·2H2O要在最后单独加入（因为氯化钙易与磷 酸二氢钾形成磷酸三钙、磷酸钙之类不溶于水的沉淀）。
（4）然后，倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制 日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。
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2.微量元素母液的配制
将MS培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大1000倍，用电子天平分别依次称 取MnSO4·4H2O 22.3g， ZnSO4·7H2O 8.6g , H3BO3 6.2g，KI 0.83g， Na2MoO4·2H2O 0.25g，CuSO4·5H2O 0.025g， CoCl2·6H2O 0.025g，并用重蒸水逐 个溶解，待全部溶解再依次混合后用容量瓶定容至1000ml，后倒入细口磨砂试剂瓶中， 贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。
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培养基类型：MS培养基、B5培养基、N6培养基
MS培养基是由Marashige和Skoog为培养烟草组 织而设计的，是应用最为广泛的培养基。
根据培养材料的种类、有针对性地选择 适宜的培养基，没有任何一种培养基可适合 所有情况下的组织培养。
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培养基制备是植物组织培养的基本工作。培养基含 有很多化学成分，而且数量多少不等，性质各有差异。
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如果将新配制的铁盐母液立即放入冰箱中。 则会容易形成沉淀。
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4、有机母液的配制
MS培养基的有机成分包括维生素、肌醇、氨基 酸等，由于用量小，也应配成母液。培养基中的有 机成分原则上应分别单独配制。
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3、MS铁盐母液的配制
药品名称
规定用量mg 扩大倍 称取量mg
/L
数
母液定容体积 ml
FeSO4.7H2O Na2-EDTA
27.8
100
1390
37.3
100
1865
500
铁盐母液的配制方法是：
用电子天平称取硫酸亚（FeSO4.7H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2-EDTA）， 分别用蒸馏水加热溶解，煮沸，使之全部溶解，溶解后混合后继续煮沸几分钟（约 加热5min至溶液呈金黄色)，冷却后定容至500ml的容量瓶中，倒入棕色磨口试剂 瓶中，经室温放置一段时间令其充分反应后，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、 配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。
a平、托盘天平、烧杯（50ml, 100ml, 500ml, 1000ml）、量筒（1000ml,100ml, 25ml）、 容量瓶（1000ml,500ml,100ml）、药勺、称量纸、 玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。
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确定培养基
贴标签 保存于冰箱
四、母液配制流程图
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2、微量元素母液的配制
药品名称
规定用量
ml/L
MnSO4·4H2O
22.3
扩大倍 称取量mg 数 1000 22300
ZnSO4·7H2O
8.6
1000 8600
H3BO3
6.2
1000 6200
KI
0.83
Na2MoO4·2H2O
0.25
1000 830 1000 250
CuSO4·5H2O
按试剂种类和性质将其分别称量、分别溶解、分别配制、单独保存或几种 混合保存，配制培养基时在按比列吸取即可。
配制母液及培养基时要选用蒸馏水，以免带入杂物质对培养材料产生不利 影响。
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实验一 MS培养基贮备液（母液）的配制
一、实验目的
熟悉MS培养基的组成，掌 握贮备液（母液）的配制方法。
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二、实验原理：