变成离子，使已经形成的潜影消退。
放射自显影的曝光过程应在干燥、低温或 充氮气的环境下进行。
（三）显影和定影
显影液将银离子还原成银颗粒的过程
显影液=显影剂+促进剂+保护剂+抑制剂
显影剂：还原作用，米吐尔、海德尔 促进剂：提供碱性环境，增加显影作用，常用碳酸钠 保护剂：中和还原产物，亚硫酸钠 抑制剂：抑制未形成潜影的银盐分解，溴化钾
0.258
0.10
0.461（51%） 0.12 0.269（47%）
89Sr
50.5天
125I
60.2天
131I
8.04天
1.488 —— 0.607
0.57 0.0037 内 0.0227俄 0.205
四 放射自显影的基本技术和方法
（一）主要类型： 宏观自显影：整体水平
光镜自显影：细胞水平
定影：定影液溶解未形成潜影的银晶体。
定影液=定影剂+保护剂+停显剂+坚膜剂
定影剂：溶解银晶体，海波 保护剂：抑制定影剂被酸分解，亚硫酸钠 停显剂：终止显影液的继续作用，醋酸 坚膜剂：防止乳胶膨胀、脱落、擦伤。钾矾
三 放射自显影的材料
（一）感光材料： 1、组成
由银盐和明胶组成。
银盐多为卤化银，如溴化银。 明胶主要起支持作用；吸水膨胀后具有通
（3）X线片： 由溴化银、碘化银和明胶组成。 银晶体颗粒平均直径为2.5μm 双面或单面涂胶 主要用于射线能量较高的宏观自显影
乳胶类型
溴化银直径 （μm）
乳 胶 层 的 厚 用途 度（μm）
原子核乳胶 0.1~0.24
氚片 X光片
1.0 2.5~3.0
5~10 15~30
光镜、电镜 自显影
放射自显影的定义 、基本类型和材料
本章重点： 放射自显影的定义 放射自显影的基本类型和基本方法 放射自显影的感光材料
一 概述
1、定义： 放射自显影:利用射线使感光材料感光形成潜影，
经显影定影后形成图像；判断放射性示踪剂的分 布部位和数量（半定量）的技术。
2、放射自显影的发展
1867年:铀盐可以使银离子感 光；
电镜自显影：亚细胞水平
1、宏观自显影： 常用肉眼、放大镜或低倍显微镜观察
用灰度或黑度对比来判断示踪剂的部位和 数量
优点是可以同时观察各脏器、组织中放射 性示踪剂的分布，多用于小动物的整体标 本，大动物的脏器或肢体，以及各种电泳 谱、色谱和免疫沉淀板等的示踪研究。
小鼠头部的宏观自显影
中国原子能科学研究院物理生产的核乳胶
乳胶型号 核-2
核-4 HW-3 HW-4
银晶直径 0.17 （μm）
0.24 0.10-0.11 0.14
适用范围 α粒子 所有带 所有带电粒子（电 11MeV以 电粒子 镜自显影） 下的质子
（2）氚片： 由溴化银、碘化银和明胶组成。 银晶体颗粒平均直径为1μm 单面涂胶 主要用于3H标记化合物的自显影
局限性： 1、实验周期长。 2、定量不准确，只能半定量。
4、应用举例
药物、营养物质、毒物等在器官、组织、细胞中的分布、 运转
研究特异性标记前体的参入部位、特点、影响因素
标记抗体或药物在离体标本上进行抗原研究或受体的定位 示踪
二 放射自显影的原理
（一）潜影形成的原理： 和普通光学摄影原理相同；
果差。
核素
3H 14C 32P 35S 45Ca 59Fe
放射自显影常用的放射性核素
半衰期
12.33年 5730年 14.28天 87.4天 165天 44.6天
β-粒子最大的能 β-粒子平均能量（MeV） 量（MeV）
0.0188
0.005
0.155
0.05
1.71
0.695
0.167
0.055
缺点： 分辨率较低 目前还不能用于高倍光镜和电镜自显影 仪器价格比较昂贵
（二）放射自显影中常用的放射性核素
应考虑其射线的种类、能量和半衰期。
3H 、14C 、35S 、45Ca 、32P、33P、131I、125I 、 99mTc等。
发射射线的核素毒性都较大，一般不用于示踪研究。 单纯的发射 射线的放射性核素，难于在乳胶中形成潜影，自显影效
利用射线使感光材料感光在标本中放射性 存在的原位置出现银颗粒的沉积。
1、电离：释放电子
感光乳胶中每颗溴化银 结晶由许多AgBr分子组 成。
制造乳胶时，都使晶体 发生点阵上的缺陷－－ 敏化中心。
完整的晶格排列 具有缺陷的晶格排列
当核射线作用于溴化 银结晶时，使某些分 子电离射出电子，向 敏化中心移动形成阴 电层。
宏观自显影
核素能量较 高宏观自显 影
（4）自显影增强剂： 在感光材料里面加入荧光材料或将荧光材料制作成薄膜覆盖在凝胶表
面。
感光材料在射线和光子的双重作用下面感光，可以缩短实验周期。
暗盒和增强屏
（5）磷屏成像：
用可重复使用的磷屏作为成 像板
专门的读出装置。
计算机磷屏成像系统
优点： 可用于多种核素的宏观自显影 操作简便 不需胶片和显影定影等照相处理步骤 磷屏可以重复使用
透性
2、分类： （1）原子核乳胶： 溴化银和明胶按照一定的比例混匀制备而
成；
常温下呈粘稠液状，低温下则为胶冻状， 温度升至40℃左右时为液态。
可以根据使用需要制备成各种形态
①液体核乳胶：由溴化银和明胶按照80：20的比例混合制备，
可制备成不同形状和厚度。
②核乳胶干板：核乳胶胶片
③揭膜核乳胶：
1924年 Lacassagne 应用于 研究钚在生物标本中的分布
1946年，Belanger和 Leblond首次建立现代放射自 显影的方法。
3、放射自显影的优点
1）灵敏度高。 2）定位准确，能把定位和定量结合分析 3）感光材料具有累积成像的效应，所需的放射性物质可极微量。 4）操作简单易行，不需要复杂昂贵的设备。 5）形态、机能和代谢的综合分析 6）结果可以长期保存
AgBr+β-Ag++Br+e-
2、Ag+离子向敏化中心移动：
Ag+离子向敏化中心移动，与电子结合，即 射出的电子被带正电荷的银离子俘获，形 成银原子。
Ag+＋e+--Ag
3、形成潜影
许多带正电荷的银离子被显影剂还原成银 原子，在该溴化银结晶颗粒中形成潜影。
（