菌落偏小，白色，湿润， 菌落中等偏小，边缘整齐光滑的红色
边缘整齐，直径为 1 mm+1mm，菌落背
菌落，可有淡淡的晕，直径为 2
面为黄色
mm+1mm，菌落背面为粉红色
萄糖为可发酵糖类；磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂；柠檬酸氢三
铵、硫酸镁、硫酸锰、和醋酸钠为培养各种乳酸菌
提供各种无机盐；琼脂是培养基的凝固剂。
2
乳酸菌国家标准的解读
• 改良MRS培养基
将莫匹罗星锂盐（Li-Mupirocin）储备液加入到熔化MRS琼 脂培养基中，使培养基中莫匹罗星锂盐的浓度为50μg/mL。
乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解，以辨别乳酸菌； 中性红为pH指示剂。
2
乳酸菌国家标准的解读
菌属 乳杆菌
属
双歧杆 菌属
嗜热链 球菌
乳酸菌在 MRS 和 MC 培养基上的菌落特征
MRS 琼脂
MC 琼脂
菌落呈圆形，中等大小，凸起，微白 菌落较小，白色或淡粉色，边缘不太
色，湿润，边缘整齐，直径为
整齐，可有淡淡的晕，直径
选择性抑制剂-------抗生素
2
乳酸菌国家标准的解读
• MC培养基
大豆蛋白胨 5.0 g，牛肉粉 3.0 g，酵母粉 3.0 g，葡萄糖 20.0 g，乳糖 20.0 g，碳酸钙 10.0 g，琼脂 15.0 g，蒸馏水 1 000 mL，1％中性红溶液5.0 mL，pH6.0，蒸馏水1000mL
3mm+1mm，菌落背面为黄色
2mm+1mm，菌落背面为粉红色
兼性厌氧条件下不生长。在厌氧条件下 兼性厌氧条件下不生长。在厌氧条件
生长，菌落呈圆形，菌落中等大小，瓷 下生长，菌落较小，克有淡淡的晕，
白色，边缘整齐光滑，直径
白色，边缘整齐，直径 1.5mm+1mm，
2mm+1mm，菌落背面黄色
菌落背面为粉红色
蛋白胨（10g）,牛肉粉（5g）,酵母粉（4g）,葡萄糖 （20g） 吐温80（1mL）,K2HPO4·7H2O（ 2g）,醋酸钠·3H2O（5g）, 柠檬酸三铵（2g）,MgSO4·7H2O （0.2 g）,MnSO4·4H2O（0.05 g 琼脂粉(15g),蒸馏水1000mL,pH 6.2
蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供氮源、维生素、生长因子；葡
9ml生理盐水
9ml生理盐水
1ml稀释液
MRS
改MRS
涂布后
36+1℃ 72h厌氧
计菌
数种
涂布后
报鉴
36+1℃ 72h厌氧 告 定
MC
涂布后
36+1℃ 72h需氧
2
乳酸菌国家标准的解读
重点讲解
注：从样品稀释到平板倾注 要求在15 min内完成。
选择2个～3个连续的适宜稀释度,各吸取1ML样品匀
液于灭菌平皿内。稀释液移入平皿后,将MRS培养基
3
双歧杆菌计数
选择2个～3个连续的适宜稀释度,各吸取1ML样品匀 液于灭菌平皿内。稀释液移入平皿后,将含莫匹罗星 锂盐和半胱氨酸盐酸盐改良的 MRS培养基倾注入平 皿约15 ML,转动平皿使混合均匀。36℃±1℃厌氧 培养72 H±2 H。计数平板上的所有菌落数。
2
乳酸菌国家标准的解读
• MRS培养基
乳酸菌的检验
专业名称：食品药品监督管理 课程名称：食品微生物检测技术
22
乳 乳酸 酸菌 菌国 国家 家标 标准 准的 的解解读读
（GB4789.35-2016）
2
乳酸菌国家标准的解读
25 ml或 g样品
1:10
225ml生理盐水
1ml
1ml
1ml
1:100 1:1000 1:10000
9ml生理盐水
1
倾注入平皿约15 ML,转动平皿使混合均匀。 36℃±1℃厌氧培养72H±2H。
乳杆菌计数
2
嗜热链球菌计数
选择2个～3个连续的适宜稀释度,各吸取1ML样品匀 液于灭菌平皿内。稀释液移入平皿后,将冷却至48℃ 的 MC培养基倾注入平皿约15 ML,转动平皿使混合 均匀。36℃±1℃需氧培养72 H±2 H,培养后计数。 菌落中等偏小,边缘整齐光滑的红色菌落,直径2 ±1 MM,菌落背面为粉红色。