实验五观察植物细胞的有丝分裂
一、目的要求
1.观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期。

2.初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术。

3.初步掌握绘制生物图的方法。

二、材料用具试剂
1.材料:洋葱(可以用蒜、葱代替)。

2.用具:显微镜/载玻片/盖玻片/玻璃皿3个/镊子/剪刀/滴管。

3.试剂:质量分数为15%HCl、体积分数为95%的C2H5OH溶液、质量浓度为0.01g/mL龙胆紫溶液(or 醋酸洋红液)。

三、重点难点
重点:有丝分裂过程中各个期的特征、各期图形的辨认，有丝分裂实验过程。

难点:观察有丝分裂实验过程中应注意的问题。

四、实验步骤
1.洋葱根尖的培养和取材(上午11:00)
2.制装片(解离→漂洗→染色→制片)
3.观察
①低倍镜找分生区；
②高倍镜观察各个时期。

五、结论:
在显微镜的一个视野中看到的细胞，多数处于细胞有丝分裂的间期，因为在一个细胞周期中，间期所占的时间占整个细胞周期的90%～95%，时间与细胞数目成正比。

另外，在一个视野中，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。

六、注意事项
(1)培养产生洋葱根尖的材料是洋葱鳞茎。

鳞茎底部接触水，不能离开水，也不能被水淹。

一般一天至少一次，还要提供适宜的温度。

(2)剪取洋葱根尖材料时，应该在洋葱一天之中分裂最活跃的时间，一般在上午1l点左右。

如果因气温影响或不在上述时间做实验的话，可以在细胞有丝分裂最盛时取材，放人盛有固定液的培养皿中固定，即浸泡半天到一天。

固定后用70%乙醇冲洗几次，再放人盛有70%乙醇的小广口瓶中保存。

注意要等根尖长到1～5cm时才能切取，而切取的洋葱根尖长度是2～3mm。

(3)根尖培养好以后，装片制作是否成功，关键的步骤是解离。

解离不充分，细胞重叠；解离过度，细胞会腐烂，所以解离要适度。

(4)漂洗的目的是洗去根中多余的解离液。

如果不把多余的解离液洗去，一方面会影响染色效果，因为解离液中含HCl，而用染色的染料呈碱性；另一方面还会腐蚀显微镜的镜头。

(5)染色时，染色液的浓度和染色时间必须掌握好。

特别是染色不能过深，否则镜下一片紫色，无法观察。

也不能过浅，否则染色质和染色体的形态和数目不易辨清。

(6)制片时，一方面要用镊子把洋葱根尖弄碎，另一方面要压片，这样可以使细胞分散开来。

压片时，在盖玻片上再加一片载玻片的目的，一是避免压碎和污染盖玻片。

二是使压力均匀，从而使组织细胞均匀分散。

同时用力必须恰当，过重时会将组织压烂，过轻则细胞未分散开，二者都将影响观察。