＜5.17 mmol/L
HDL-C 2.60mmol/L 0.7-2.00mmol/L
LDL-C 2.60mmol/L 2.0-3.5 mmol/L
TG 1.23mmol/L
0.7-1.7mmol/L
线性范围 0-20.69 mmol/L 0.65-2.6 mmol/L 1.3-5.2 mmol/L 0-11.4 mmol/L
空白管(B)
50 3.0
标准管(S)
50 3.0
测定管(U)
50 3.0
2、比色 ：混匀各管，室温放置3 min，用分光光度计比色，
波长630nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度
值。
2
11
TG测定步骤
1、按表格加样。
加入物（ml）
空白管(B) 标准管(S)
测定管(U)
试剂R1 血清 标准液 蒸馏水
2
TG测定试剂
试剂1： PIPES、 CAPOS、BSA、 MgCl2、甘油激酶、3磷酸甘油氧化酶、过氧 化物酶、显色剂Ⅰ、显 色剂Ⅱ、NaN3； 试剂2： PIPES、 CAPOS、BSA、GYK、 4-APP、显色剂Ⅱ、 NaN3。
7
主要试剂、器材
HDL-C测定试剂
试剂1： 磷酸盐缓冲剂、 LDL-C抑制剂、DHBS ； 试剂2：胆固醇酯酶、胆 固醇氧化酶、过氧化物酶、 4-APP。
2
2
【目的要求】
❖ 掌握：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的基本 原理。
❖ 熟悉：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的操作 过程。
❖ 了解：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定对动脉
粥样硬化、原发性高脂血症等疾病诊断的临床
2意义。
3
实验原理---总胆固醇测定（胆固醇氧化酶-过氧 化物酶法）
0.8 -
0.01
0.8 -
0.01 -
0.8 0.01
-
充分混匀，3
0.2
0.2
充分混匀，37℃水浴5min
2、上机，仪器设置：37℃，波长546nm，以空白管调零，记录
各管的吸光度值。
2
12
❖ 计算：按下列公式计算
A测
C测=
A标
指标 标准品浓度
× C标
参考范围
TC 4.20mmol/L
2.0
测定管(U)
0.02 -
2.0
3、比色 ：混匀各管，置37℃水浴10 min，用分光光度计比色，
波长505nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度
值。
2
9
HDL-C测定步骤
1、将试剂1与试剂2按10:1比例混匀为工作液。
2、按表格加样。
加入物（ml）
空白管(B)
标准管(S) 测定管(U)
临床生物化学及检验
血脂四项的测定
临床生物化学与分子生物学 教研室
2
1
❖ 血浆中所含脂类统称为血脂，血脂含量可以反 映体内脂类代谢的情况。检测血脂时，常在饭 后12-14小时采血。
❖ 我国血脂异常防治建议和美国国家胆固醇教育 计划成人治疗计划Ⅲ （NCEP-ATP Ⅲ）都要求 临床常规血脂测定中应至少测定TC、TG、 HDL-C及LDL-C这四项。有条件的实验室可测 定apoAI、apoB及Lp(a)。
2
13
注意事项
1、每组4位同学，分别做TC、HDL-C、 LDL-C、TG的操作。
2、加样前先认准工作液、血清标本（记清标 本号）、标准品。
3、比色杯一定要冲洗干净，测定时比色杯一 定要放正，对准光源，拉杆时动作要轻， 不能太用力。
2
14
个人观点供参考，欢迎讨论
LDL-C测定试剂 试剂： 磷钨酸、氢氧化钠。
器材：
分光光度计、半自动生化分析仪、恒温水浴箱、微量进样器、移液管等。
待测标本：血清
2
8
总胆固醇测定步骤
1、将试剂1与试剂2按1:1比例混匀为工作液。
2、按表格加样。
加入物（ml）
空白管(B)
标准管(S)
血清 标准液 蒸馏水
0.02
0.02
-
工作液
2.0
加入低密度脂蛋白胆固醇的抑制剂，将低密度和极低密 度部分隐蔽起来，直接测定高密度部分的胆固醇含量， 显色反应原理同总胆固醇，在510nm波长处测定吸光度值，计
算 其含量。
实验原理---LDL-C测定
LDL-C能与磷钨酸-镁和聚乙二醇复合剂作用产生沉淀，用分散 剂可使沉淀颗粒细小均一，在630nm处测定其吸光度值，计算 其含量。
胆固醇酯+H2O
胆固醇酯酶
胆固醇+脂肪酸
胆固醇+1/202 +H2O 胆固醇氧化酶 △4-胆甾烯-3-酮+H202
2H202+4-氨基安替比林+酚 过氧化物酶 醌亚胺+4H2O
样品中游离及脂化的胆固醇，经过上述反应产生醌亚胺，在 505nm波长处测定其吸光度值，计算其含量。
2
4
实验原理---HDL-C测定
2
5
实验原理---TG测定（甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法）
甘油三酯+H2O 脂蛋白脂酶 甘油+脂肪酸 甘油+ATP 甘油激酶 3-磷酸甘油+ADP
3-磷酸甘油+O2 3-磷酸甘油氧化酶 磷酸二羟丙酮+H202 2H202+EHSPT+4-AAP 过氧化物酶 醌亚胺+4H2O
2
6
主要试剂
总胆固醇测定试剂 试剂1： Na2HPO4﹒12H2O、 KH2PO4、 苯酚、 胆酸 钠，NaN3； 试剂2：MOPSO、NaOH、 NaN3、 MgCL2﹒6H2O、 4-氨基安替比林、EDTANa2、BSA、CE、CO、 POD、 液体活性剂Ⅰ。
血清 标准液 蒸馏水
0.02
0.02
-
0.02 -
工作液
2.0
2.0
2.0
3、比色 ：混匀各管，置37℃水浴10 min，用分光光度计比色，
波长510nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度
值。
2
10
LDL-C测定步骤
1、按表格加样。
加入物
血清（ul） 标准液（ul） 蒸馏水（ul） 工作液（ml）