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TG测定步骤
1、按表格加样。 加入物（ml） 试剂R1 血清 标准液 蒸馏水 试剂R2 空白管(B) 0.8 0.01 标准管(S) 0.8 0.01 测定管(U) 0.8 0.01 0.2
充分混匀，37℃水浴5min 0.2 0.2 充分混匀，37℃水浴5min
2、上机，仪器设置：37℃，波长546nm，以空白管调零，记录各 管的吸光度值。
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主要试剂
总胆固醇测定试剂 试剂1： Na2HPO4﹒12H2O、 KH2PO4、 苯酚、 胆酸 钠，NaN3； 试剂2：MOPSO、NaOH、 NaN3、 MgCL2﹒6H2O、 4-氨基安替比林、EDTANa2、BSA、CE、CO、 POD、 液体活性剂Ⅰ。 TG测定试剂
试剂1： PIPES、 CAPOS、BSA、 MgCl2、甘油激酶、3磷酸甘油氧化酶、过氧 化物酶、显色剂Ⅰ、显 色剂Ⅱ、NaN3； 试剂2： PIPES、 CAPOS、BSA、GYK、 4-APP、显色剂Ⅱ、 NaN3。
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总胆固醇测定步骤
1、将试剂1与试剂2按1:1比例混匀为工作液。 2、按表格加样。
加入物（ml） 血清
标准液 蒸馏水 工作液
空白管(B) 0.02 2.0
标准管(S) 0.02 2.0
测定管(U) 0.02
2.0
3、比色 ：混匀各管，置37℃水浴10 min，用分光光度计比色， 波长505nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。
加入低密度脂蛋白胆固醇的抑制剂，将低密度和极低密 度部分隐蔽起来，直接测定高密度部分的胆固醇含量， 显色反应原理同总胆固醇，在510nm波长处测定吸光度值，计算 其含量。
实验原理---LDL-C测定
LDL-C能与磷钨酸-镁和聚乙二醇复合剂作用产生沉淀，用分散 剂可使沉淀颗粒细小均一，在630nm处测定其吸光度值，计算其 含量。
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LDL-C测定步骤
1、按表格加样。
加入物 血清（ul）
标准液（ul） 蒸馏水（ul） 工作液（ml）
空白管(B) 50 3.0
标准管(S) 50 3.0
测定管(U) 50
3.0
2、比色 ：混匀各管，室温放置3 min，用分光光度计比色，波 长630nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。
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HDL-C测定步骤
1、将试剂1与试剂2按10:1比例混匀为工作液。 2、按表格加样。
加入物（ml） 血清
标准液 蒸馏水 工作液
空白管(B) 0.02 2.0
标准管(S) 0.02 2.0
测定管(U) 0.02
2.0
3、比色 ：混匀各管，置37℃水浴10 min，用分光光度计比色， 波长510nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。
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2.0-3.5 mmol/L 0.7-1.7mmol/L
0.65-2.6 mmol/L
1.3-5.2 mmol/L 0-11.4 mmol/L
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注意事项
1、每组4位同学，分别做TC、HDL-C、LDL-C、 TG的操作。 2、加样前先认准工作液、血清标本（记清标 本号）、标准品。 3、比色杯一定要冲洗干净，测定时比色杯一 定要放正，对准光源，拉杆时动作要轻， 不能太用力。
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【目的要求】


掌握：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的基本原理。
熟悉：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的操作过程。

了解：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定对动脉粥样 硬化、原发性高脂血症等疾病诊断的临床意义。
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实验原理---总胆固醇测定（胆固醇氧化酶-过氧 化物酶法）
临床生物化学及检验
血脂四项的测定
临床生物化学与分子生物学 教研室
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血浆中所含脂类统称为血脂，血脂含量可以反 映体内脂类代谢的情况。检测血脂时，常在饭 后12-14小时采血。 我国血脂异常防治建议和美国国家胆固醇教育 计划成人治疗计划Ⅲ （NCEP-ATP Ⅲ）都要 求临床常规血脂测定中应至少测定TC、TG、 HDL-C及LDL-C这四项。有条件的实验室可测定 apoAI、apoB及Lp(a)。
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2017/6/21
主要试剂、器材 HDL-C测定试剂
试剂1： 磷酸盐缓冲剂、 LDL-C抑制剂、DHBS ； 试剂2：胆固醇酯酶、胆 固醇氧化酶、过氧化物酶、 4-APP。
LDL-C测定试剂 试剂： 磷钨酸、氢氧化钠。
器材： 分光光度计、半自动生化分析仪、恒温水浴箱、微量进样器、移液管等。 待测标本：血清
胆固醇酯+H2O 胆固醇+1/202 +H2O
胆固醇酯酶
胆固醇+脂肪酸
胆固醇氧化酶
△4-胆甾烯-3-酮+H202 醌亚胺+4H2O
2H202+4-氨基安替比林+酚
过氧化物酶
样品中游离及脂化的胆固醇，经过上述反应产生醌亚胺，在 505nm波长处测定其吸光度值，计算其含量。
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实验原理---HDL-C测定
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计算：按下列公式计算 A测 × C标 C测= A标
标准品浓度
4.20mmol/L
指标
TC
参考范围
＜5.17 mmol/L
线性范围
0-20.69 mmol/L
HDL-C
LDL-C TG
2.60mmol/L
2.60mmol/L 1.23mmol/L
0.7-2.00mmol/L
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实验原理---TG测定（甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法）
甘油三酯+H2O 甘油+ATP 3-磷酸甘油+O2
脂蛋白脂酶 甘油激酶
甘油+脂肪酸 3-磷酸甘油+ADP 磷酸二羟丙酮+H202
3-磷酸甘油氧化酶
2H202+EHSPห้องสมุดไป่ตู้+4-AAP
过氧化物酶
醌亚胺+4H2O
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