[最新]测定唾液淀粉酶的最适ph值测定唾液淀粉酶的最适PH值
制作人:叶小晴学号:201140095 班组:15-4 学院:护理学院
摘要:酶催化活性最大时相应的环境PH称为酶促反应的最适PH值。
虽然不同酶的最适PH值各不相同,但大多数酶的最适PH值接近中性,本论文主要在一定浓度、温度等条件下研究唾液淀粉酶的最适PH值,从而知道唾液淀粉酶的最适PH 值,进而了解影响酶的活性的因素。
关键词:唾液淀粉酶、最适PH值、活性前言:生物体内的酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质或核酸,酶是机体内最重要的生物催化剂。
在不同PH条件下,酶分子的许多极性基团的解离状态不同,受到PH变化的影响,从而影响酶对它们的亲和力。
PH还会影响酶的活性中心的空间构象,从而影响酶的活性,因而PH的改变对酶的催化作用影响很大。
材料与方法:
1、材料:唾液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、碘液、蒸馏水、温水、
试管、试管架、洗耳球、烧杯、胶头滴管、水浴箱、分光光度计、吸量管、坐标纸
2、方法:(1)缓冲溶液的配置:根据各个PH值的缓冲溶液(用量:ml)表
1:
PH5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0
值
磷酸0.40 0.62 0.93 1.33 1.88 2.45 3.05 3.60 4.05 4.35 4.58 4.74 氢二
钠
磷酸4.60 4.39 4.08 3.68 3.13 2.55 1.95 1.40 0.95 0.65 0.43 0.27 二氢
钠
蒸馏5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 水
(2)唾液的获取:温的水漱口,将蒸馏水含于口中2min后吐于烧杯中,取5ml
唾液20ml水配成1/5的唾液,从中取5ml的1/5的唾液再加入10ml水配成1/10
的唾液。
(3)测量PH:取12支管,分别标上1~12,按下表操作:
管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
1/50.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
唾液
淀粉0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
溶液
0.5ml5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0
缓冲
溶液
PH
蒸馏3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
水
表2:
管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1/100.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 唾液
淀粉0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 溶液
0.5ml5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 缓冲
溶液
PH
蒸馏3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 水
3、分别加入两滴碘液
4、水浴加热
5、测量吸光度
6、作标准曲线图
本实验中,当唾液淀粉酶的活性最大时,淀粉被分解得最大,剩余的底物最少.A 值最小,过酸或过碱均会抑制酶的活性,使之分解的底物减少,A值增大。
由所作的曲线可知,唾液淀粉酶的最适PH值为6.6。
当PH<6.6时,唾液淀粉酶的活性随PH值的增大而增大,当PH=6.6时,唾液淀粉酶的活性达到最大,当PH>6.6时,唾液淀粉酶的活性随PH值的增大而减小。
参考文献:《分子酶学》陈惠黎李文杰编著人民卫生出版社
《酶与酶工程及其应用》孙君社主编化学工业出版社
《酶学》郭勇郑穗平编著华南理工大学出版社
《医用生物化学》陈诗书孔良曼章有章主编上海医科大学出版社
《生物化学》高国全主编人民卫生出版社。