2016/11/18
（2）产物 用适当的内切酶切割，然后据电泳图谱 复制判断有无内切酶切点的改变
镰状细胞性贫血
分子基础是β珠蛋白基因第6 密码子G A G G T G 即 A T的转变
以P C R 法扩增β-珠蛋白基因中一个 294bp片段。 扩增产物以限制性内切酶OxaNI消化 （内切酶OxaNI的作用位点为GAG)。 产物经E B染色或银染、电泳
PCR技术与遗传病产前诊断
PCR在遗传病产前诊断中的地位 PCR在遗传病产前诊断的应用
PCR在遗传病产前诊断中的地位
PCR技术能在短时间内将靶DNA扩增百万倍，操作简 便，省时，准确。它不仅能直检突变基因，而且可 与其它技术结合，使其诊断的准确性几乎达100%. 因而它已成为目前遗传病产前诊断的主要手段.
产前基因诊断胎儿标本的来源
由于PCR技术本身的特点，即可在短时间内将微量的DNA扩 增数百万倍，因此它适 应于各种来源的DNA标本. (1)羊水穿刺，在如15周后可经母亲脆壁穿刺获羊水，其 内含有大量的胎儿脱细 胞5-10ml羊水即可获得足够量的PCR分 析DNA样品. (2)绒毛采样，在如早期(9-12周)经阴道在B超引导采取绒 毛样品，它含有丰富的 DNA.
结果：
正常个体产生191bp和103bp两个片段。
纯合子患者则只有一个未被酶解的294bp 的片段。
杂合子患者总共产生三个片段。 可直接观察到不同长度的条带, 由此即可进 行区别。
2016/11/18
(3)胎儿血液采集:有简条途径:胎儿脐静脉穿刺，胎儿 锁采集. (4)胎儿活检:可用穿刺取样，亦可经胎儿镜取样.可在 始17-19周进行
（一）PCR技术直接诊断遗传病
（1）、对于由基因缺失突变引起的遗传病可利用缺失区 域的DNA序列引物直接扩增该区域，看有无特异性的扩增 产物
α型地中海贫血
是一组遗传性溶血性 贫血疾病。由于遗传 的α型珠蛋白基因簇 致使血红蛋白中α珠 蛋白链合成缺如或不 足所导致的贫血或病 理状态。（其中缺失 的基因包括α1、α2、 ψα1 和部分ψε基 因。）
通过孕15 周的羊膜穿刺或孕7 ~ 10 周 的绒毛取样获得胎儿细胞,提取DNA进行 检测
用P C R法扩增α2和ψα1 之间区域, 长13 6 b P。
也在同一个标本同时扩增β珠蛋白基 因作为对照，长110bp P C R 后电泳检测。
结果：
纯合子病人电泳结果只显示一条110b p 的β珠蛋白基因片段。 正常个体则同时显示1 1 0b p 的β 珠蛋白基因片段和1 3 6 b p的a 珠蛋 白基因片段。 根据特异扩增带的有无即可作出判断。