实验四细菌运动性的观察
姓名：贾晓霖
学号：201000140032
班级：生科10.1
同组成员：李江湲程子修洪钧烨
一、实验目的
1、学习压滴法观察细菌运动性。

2、学习鞭毛染色法，观察鞭毛的形态特征。

二、实验原理
鞭毛是细菌的纤细丝状“运动”器官。

鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。

鞭毛直径一般为10~30nm，只有用电镜才能直接观察到。

但是，如采用特殊的染色法，则在普通光学显微镜下也能看到它。

鞭毛染色方法很多，但其基本原理相同，即在染色前先用媒染剂处理，让它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。

鞭毛的着生方式多样，有一端单生，如铜绿假单胞菌；两端单生；一端丛生，如荧光假单胞菌；两端丛生，如蔓延螺菌以及周生，如大肠杆菌等。

三、实验器材
1、所需菌种
枯草芽孢杆菌（周生）
铜绿假单胞菌（端生）
2、溶液和试剂
0.01%美蓝染液，95%乙醇溶液，鞭毛染色液A，鞭毛染色液B。

3、仪器和其他用品
酒精灯，载玻片，盖玻片，显微镜，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸，接种环，烧杯，试管架，镊子等。

四、实验内容
a)压滴法（说明一下我做的是铜绿假单胞菌）
1、洗片将载玻片用水加去污粉洗净，自然晾干。

2、涂片在载玻片中央滴一小滴蒸馏水，点燃酒精灯，在火焰旁边从菌种斜面挑取少
量菌体与水滴充分混匀。

3、染色、镜检加0.01%美蓝染液染色，之后加盖玻片放于油镜下观察。

附：实验照片
b)鞭毛染色（说明一下我做的是铜绿假单胞菌）
1、洗片将载玻片用水加去污粉洗净，自然晾干。

2、浸泡将适量95%乙醇倒入烧杯，将洗净晾干的载玻片放入有乙醇的烧杯中，浸泡
5min。

3、干燥将载玻片用镊子夹出，点燃酒精灯，将载玻片在酒精灯上小心过火干燥。

4、涂片将一小滴蒸馏水滴在载玻片一端，点燃酒精灯，在火焰旁边从菌种斜面挑取
少量菌体与水滴充分混匀，将载玻片有水滴的一端微微竖起，使有菌种的水滴自然从载玻片一端流到另一端，在载玻片上形成一条菌带。

5、干燥自然干燥。

6、染色、镜检先滴加A液，覆盖5min，用水流在载玻片反面冲洗掉，之后加B液冲
洗覆盖1min，然后在缓水流下按同样方法冲洗掉。

加热干燥后，镜检。

附：实验图片
视野中央偏上方可见一带有鞭毛的细菌，可是手机像素太低，所以可能看不清^o^
五、思考题
1、除鞭毛染色法外，还有什么方法能观察到鞭毛？
答：可直接在电子显微镜下观察，电子显微镜放大倍数高，可以观察到鞭毛。

2、如果你发现鞭毛已与菌体脱离，请解释原因。

答：（1）可能是菌龄过大，自然脱落；
（2）操作时玻片受到较强烈的震荡；
（3）接种时接种环在玻片上反复涂抹时使之脱落；
（4）染色过久使之脱落。