第十八章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．荧光标记引物法2．荧光标记终止底物法3．多色荧光标记引物法4．多色荧光标记终止底物法5．Edman降解法6．Sanger双脱氧链末端终止法7．平板电泳型DNA测序仪8．毛细管电泳型DNA测序仪9．缩微生物处理器二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。
1. DNA的一级结构是指（）；A．DNA空间构象B．核苷酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．DNA双螺旋结构2. 下列有关测序反应体系反应原理的叙述中，错误的是（）A．加入的核苷酸单体为2 -脱氧核苷三磷酸B．低温退火时，引物与模板形成双链区C．沿着3'-5'的方向形成新链D．DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E．形成的新生链与模板完全互补配对3. 双脱氧链末端终止法测序反应与普通体外合成DNA反应的主要区别是（）A．DNA聚合酶不同B．dNTP的种类不同C．dNTP的浓度不同D．引物不同E．双脱氧链末端终止法测序反应体系中还需加入ddNTP4. 下列荧光标记方法中，可以将A、C、G、T四个测序反应在同一管中完成而不影响测序结果的是（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法5. 下列哪一荧光标记法，必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行，但可以合并在一个泳道内电泳（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法6. 毛细管电泳型测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因是由于（）A．电极弯曲B．电泳缓冲液蒸发使液面降低C．毛细管未浸入缓冲液中D．毛细管内有气泡E．测序样本未注入毛细管中7. 毛细管电泳型测序仪电泳时产生电弧，主要原因是（）A．电泳缓冲液漏出B．电泳缓冲液配有误C．电极、加热板或自动进样器上有灰尘沉积D．测序样本纯化不完全，含有盐性成份E．加热板温度过高8. 全自动DNA测序仪的主要应用范围，不包括（）A．人类遗传病、传染病和癌症的基因诊断B．法医的亲子鉴定和个体识别C．生物工程药物的筛选D．动植物杂交育种E．新蛋白质的鉴定9. 蛋白质测序仪的基本工作原理，主要是利用（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法10. 蛋白质测序仪主要检测（）A．核苷酸序列B．核糖核酸序列C．碱基序列D．氨基酸序列E．脱氧核糖核酸序列11. 下列有关双脱氧链末端终止法测序原理的叙述中，不正确的是（）A．其基本原理是利用DNA的体外合成过程B．反应体系中需加入dNTP和ddNTPC．ddNTP可以形成磷酸二酯键而掺入到DNA链中D．dNTP掺入后可导致新合成链在不同的位置终止E．生成的反应产物是一系列长度不同的多核苷酸片段12. 下列有关多色荧光标记终止底物法的叙述中，不正确的是（）A．需将4种ddNTP分别用4种不同的荧光染料标记B．标记和终止过程在同一时间完成C．A、T、C、G四种反应可以在同一管中完成D．可在一个泳道内完成电泳测序E．荧光染料标记过程和延伸反应终止分别发生在同一DNA片段的两端13. 下列有关荧光标记DNA的检测原理的叙述中，不正确的是（）A．用于测序的产物绝大多数应为单链B．DNA片段上的荧光基团可吸收激光束提供的能量而发射出特征波长的荧光C．两极间的电势差推动DNA片段从正极向负级泳动并达到相互分离D．不同颜色的荧光与不同的碱基信息相对应E．测序结果中，纵轴表示荧光波长种类和强度14. 下列有关Edman降解法基本原理的叙述中，错误的是（）A．PTC－多肽的生成是在弱碱性条件下B．PTC－多肽的生成反应需用过量的试剂使有机反应完全C．在无水强碱的作用下，可使靠近PTC基的氨基酸环化，形成ATZ衍生物和一个失去末端氨基酸的剩余多肽D．剩余多肽链可以进行下一次以及后续的降解循环E．ATZ衍生物经水溶酸处理转化为PTH氨基酸15. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，最常见的原因为（）A．缓冲液配制错误B．毛细管内有气泡C．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端D．电极弯曲而无法浸入缓冲液中E．加热板温度过高16. 在单纯以测定DNA序列为目的的全自动DNA测序仪中，广泛应用的原理是（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法17. 双脱氧链末端终止法测序的基本原理是利用（）A．RT-PCRB．PCRC．Western BlotD．Southern BlotE．水解法18. 测序反应体系中加入的酶为（）A．限制性内切酶B．RNA聚合酶C．DNA聚合酶D．DNA水解酶E．反转录酶19. 在普通的体外合成DNA反应体系中，加入的核苷酸单体为（）A．dAMP，dCMP，dGMP，dTMPB．dADP，dCDP，dGDP，dTDPC．dATP，dCTP，dGTP，dTTPD．ddATP，ddCTP，ddGTP，ddTTPE．ddADP，ddCDP，ddGDP，ddTDP20. 双脱氧链末端终止法测序反应中除PCR反应体系成份外，还加入了（）A．DNA聚合酶B．dNTPC．dNDPD．ddNTPE．ddNDP21. 在DNA自动测序中广泛应用的示踪物是（）A．色素染料B．同位素C．电化学发光物质D．酶E．荧光素22. 下列有关多色荧光标记引物法标记引物的特性的叙述中，正确的是（）A．四种标记引物的序列相同，但5'端标记的荧光染料颜色不同B．四种标记引物的序列相同，但3'端标记的荧光染料颜色不同C．四种标记引物的序列不同，其5'端标记的荧光染料颜色也不同D．四种标记引物的序列不同，其3'端标记的荧光染料颜色也不同E．四种标记引物的序列不同，其2'端标记的荧光染料颜色也不同23. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，不正确的是（）A．需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5'端B．四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C．A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D．上样时需分别在不同泳道内电泳E．特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系24. 一般来说，DNA测序图中，其横坐标和纵坐标的意义是（）A．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表时间B．横坐标代表荧光波长种类和强度，纵坐标代表时间C．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类D．横坐标代表时间，纵坐标代表荧光波长种类和强度E．横坐标代表荧光波长种类，纵坐标代表荧光波长强度25. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，不正确的是（）A．毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B．电极和毛细管一般均固定不动C．两级间极高的电势差可促进DNA分子在毛细管中很快泳动D．电极为电泳的正性电极E．样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本26. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，不正确的是（）A．电泳时缓冲液阀关闭B．电极为电泳的正性电极C．在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D．注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E．玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力27. 平板电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp28. 毛细管电泳型DNA测序仪的测序长度一般为（）A．600bp～900bpB．400bp～600bpC．200bp～400bpD．900bp～1000bpE．300bp～500bp【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。
1. 目前DNA测序仪的工作原理，主要是利用（）A．Edman降解法B．双脱氧链末端终止法C．化学降解法D．氧化－还原法E．水解法2. 下列有关多色荧光标记引物法的叙述中，正确的是（）A．需将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的3 端B．四种引物的序列相同，但标记的荧光染料颜色不同C．A、T、C、G四个测序反应必需分管进行D．上样时需分别在不同泳道内电泳E．特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系3. 下列哪些荧光标记法必需将A、T、C、G四个测序反应分管进行（）A．单色荧光标记引物法B．单色荧光标记终止底物法C．多色荧光标记引物法D．多色荧光标记终止底物法E．多色荧光标记法4. 下列有关单色荧光标记法原理的叙述中，正确的是（）A．需将A、G、C、T四管反应分管进行B．上样时需在不同泳道电泳C．可用于标记ddNTP，也可用于标记引物D．有可能因泳道间迁移率不同而影响测序精度E．仅适用于标记ddNTP，而不能标记引物5. 平板电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，可能原因有（）A．电极导线未接好或损坏B．电泳缓冲液配制不正确C．正极或负极铂金丝断裂D．正极或负极的胶面未浸入缓冲液中E．倒胶时有气泡形成6. 采用荧光标记终止底物法的测序反应体系中，包含（）A．DNA模板B．引物C．dNTPD．ddNTPE．水解酶7. 毛细管电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，可能原因有（）A．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端B．毛细管内有气泡C．毛细管未浸入缓冲液中D．电极弯曲而无法浸入缓冲液中E．加热板温度过高8. 导致毛细管电泳型DNA测序仪电极弯曲的原因有（）A．测序时未进行电极定标操作就直接执行电泳命令B．自动进样器上有灰尘沉积C．运行前未将样品盘归位D．进行电极定标操作时X/Y轴归位尚未结束就运行Z轴归位E．凝胶干燥而阻塞毛细管9. 平板电泳型DNA测序仪电泳时仪器显示无电流，可能原因有（）A．电泳缓冲液配制不正确B．电极导线未接好或损坏C．正极或负极铂金丝断裂D．正极或负极的胶面未浸入缓冲液中E．电泳缓冲液蒸发使液面降低，而未能接触到毛细管的两端10. Sanger双脱氧链末端终止法和Maxam-Gilbert化学降解法的共同点包括（）A．反应体系中均有ddNTPB．都是根据在某一固定的点开始核苷酸链的延伸，随机在某一个特定的碱基处终止C．均产生A、T、C、G四组不同长度的一系列核苷酸链D．均在变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳进行片段的分离和检测E．均可检测DNA的一级结构11. 在Sanger双脱氧链末端终止法测序反应体系中，ddNTP与dNTP相比的异同点有（）A．ddNTP在脱氧核糖的5'位置上缺少一个羟基B．ddNTP在脱氧核糖的3'位置上缺少一个羟基C．DNA链在掺入dNTP的位置终止链的延伸D．均可与正在延伸的DNA链的末端脱氧核糖3'-OH发生反应E．ddNTP不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键12. 下列有关Sanger双脱氧链末端终止法测序反应体系反应原理的叙述中，正确的是（）A．加入的核苷酸单体包括dNTP和ddNTPB．低温退火时，引物与模板形成双链区C．沿着3'-5'的方向形成新链D．DNA聚合酶结合到DNA双链区上启动DNA的合成E．形成的新生链与模板完全互补配对13. 下列有关DNA自动测序仪自动进样器区功能的叙述中，正确的是（）A．毛细管进入样品盘标本孔中进样依靠自动进样器的移动完成B．电极和毛细管一般均固定不动C．DNA分子在毛细管中泳动的动力来自于两级间极高的压力差D．电极为电泳的正性电极E．样品盘有48孔和96孔两种，可一次性连续测试48或96个样本14. 下列有关DNA自动测序仪凝胶块区功能的叙述中，正确的是（）A．电泳时缓冲液阀打开B．电极为电泳的负性电极C．在分析每一个样品前，泵自动冲掉上一次分析用过的胶，灌入新胶D．注射器驱动杆可给注射器提供正压力，将注射器内的凝胶注入毛细管中E．玻璃注射器可储存凝胶高分子聚合物以及在填充毛细管时提供必要的压力15. 下列有关缩微生物处理器结构和功能特点的叙述中，正确的是（）A．基本结构为2层玻璃薄片和2层聚二甲基硅氧烷薄片B．其形状为圆盘状，直径仅10厘米C．可完成纳升级标本的Sanger DNA测序D．微瓣膜的功能包括在热循环反应时封闭反应小室，为反应提供封闭的空间E．毛细管电泳通道由上下来回迂回的U型管道构成，总长度为30cm三、问答题1．简述双脱氧链末端终止法测序原理。