植株全氮、全磷、全钾的测定一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）二、植株全氮的测定（H2SO4—H2O2消煮，蒸馏法）三、植株全磷的测定（H2SO4—H2O2消煮，钒钼黄比色法）四、植株全钾的测定（H2SO4—H2O2消煮，火焰光度法一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）1 H2SO4—H2O2消煮原理植物样品在浓H2SO4溶液中，经过脱水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有机物则分解，然后再加入H2O2，H2O2在热的浓H2SO4溶液中会分解出新生态氧，具有强烈的氧化作用，可继续分解没被H2SO4破坏的有机物，使有机态氮全部转化为无机铵盐。
同时，样品中的有机磷也转化为无机磷酸盐，故可用同一消煮液分别测定N、P、K（植株中K以离子态存在）。
2 主要仪器：万分之一电子天平、0.5 mm筛、三角瓶（50ml）或消煮管、移液管（5、10ml）+吸耳球、弯颈小漏斗、消煮炉、吸管、漏斗、无磷钾滤纸、容量瓶（100ml）2 试剂：浓硫酸（GB T625）：化学纯、比重1.8430%H2O2（GB 6684）：阴凉处存放3 操作步骤称取烘干、磨细的植物样品(过0.5 mm筛)0.19g，置于50ml三角瓶（或消煮管）底部（勿将样品粘附在瓶颈上），加浓硫酸5mL，摇匀（最好放置过夜），瓶口盖一弯颈小漏斗，在电炉上先缓缓加热，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度（在消煮炉上先250℃消煮—温度稳定后计时，时间约30min，待浓硫酸分解冒大量白烟时再升高温度至400℃）。
消煮至溶液呈均匀的棕黑色时，取下三角瓶，稍冷后提起弯颈漏斗，滴加30%H2O210滴，并不断摇动三角瓶。
再加热(微沸)约7-10 min，取下，稍冷后重复滴加30%H2O25~10滴，再消煮。
如此反复进行3-5次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热5-10min（以赶尽剩余的H2O2)，取下三角瓶冷却，用少量水冲洗漏斗，洗液流入三角瓶中。
将消煮液无损地洗入100 ml容量瓶中，用水定容，摇匀。
过滤或放置澄清后供氮、磷、钾测定。
二、植株全氮的测定（H2SO4—H2O2消煮，蒸馏法）1、方法原理蒸馏过程的反应：（NH4)2SO4 + NaOH → Na2SO + 2NH3 + 2H2ONH3 + H2O → NH4OHNH4OH + H3BO3→ NH4·H2BO3 + H2O滴定过程的反应：NH4·H2BO3 + H2SO4→（NH4)2SO4 + 2H3BO32、主要仪器、试剂（1）主要仪器：万分之一电子天平、移液枪(2ml)、移液管（5、10ml）、三角瓶（50、150ml）、容量瓶（100、1000ml）、量筒、研钵、酸式滴定管、pH仪、定氮仪（2）需用的试剂：40%NaOH溶液（10mol/L氢氧化钠溶液）：称取40g氢氧化钠（GB 629分析纯）溶于100ml水中硫酸（GB 625—77）：分析纯，0.005mol/L硫酸（将0.01mol/L硫酸标准溶液用水稀释一倍）或0.01mol/L盐酸标准溶液0.02mol/L硫酸标准溶液：量取浓硫酸（C.R）2.83ml，加蒸馏水稀释至5000ml，此为0.02mol/L的（1/2H2SO4）标准溶液，然后用标准碱或硼砂标定之，将0.02mol/L的（1/2H2SO4）标准溶液用水稀释4倍。
硼酸—指示剂溶液：硼酸-指示剂混合液：每升A溶液中加20ml B混合指示剂，并用稀碱调节至红紫色（pH值约4.5）。
此液放置时间不宜过长，如在使用过程中pH值有变化，需随时用稀酸或稀碱调节之。
A 2％硼酸溶液：20g硼酸（GB 628-78分析纯）溶于1L约60℃去离子水中。
B 甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：0.5g溴甲酚绿（HG 3-1220-79）和0.1g甲基红（HG 3-958 -76）于研钵中，加入少量95％乙醇，研磨至指示剂全部溶解后，加95％乙醇至 100ml。
pH4.5的水3、测定步骤在150ml三角瓶中，加入2％硼酸-指示剂混合液5ml，放在定氮仪冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上3～4cm处。
之后吸取待测液10.00 mL（含NH4+-N约1mg）置于蒸馏器的定氮内室中，于定氮仪相应位置上，盖上具塞并密封使之不漏气。
然后从加液漏斗处向蒸馏室内缓缓加入20ml 10mol/L氢氧化钠溶液，立即关紧蒸汽发生器上排气口的旋钮，同时打开蒸汽发生器和定氮冷凝管连接橡皮管上的夹子。
通入蒸汽蒸馏，蒸馏约15min左右，馏出液体积约50ml时，即蒸馏完毕。
取下三角瓶，关闭蒸汽发生器和定氮冷凝管连接橡皮管上的夹子，并打开蒸汽发生器上排气口的旋钮。
用少量已调节至pH4.5的水洗涤冷凝管的末端，取下三角瓶。
之后，用气压差的原理，倒吸的方法洗蒸馏瓶中的废液，洗净蒸馏瓶。
用0.005 mol/L硫酸（或0.01mol/L盐酸）标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为紫红色。
记录所用酸标准溶液的体积（ml）。
空白测定所用酸标准溶液的体积，一般不得超过0.4ml。
4、结果计算植株中N（%）=（V1-V0）×C×14×D×10-3×100/m式中： V1——样品测定所消耗标准酸mL数；V0——空白试验所消耗标准酸mL数；C——标准酸（H+1）的浓度mol·L-1；·14 ——氮原子的摩尔质量（g·mol）；10-3——mL换算为L；D——分取倍数，定容体积/分取体积，100/10m ——干样品质量（g）。
5、注意事项（1）碱液要过量。
要求中和完硫酸后再过量2mL；（2）蒸馏装置不能漏气；（3）硼酸要足量。
估算方法：按1mL浓度为10.0g·L-1的硼酸能吸收0.46mg的N计算；（4）指示剂和硼酸最好分开配置保存。
因二者混合过久，有指示终点不明显的可能。
（5）指示剂和硼酸的pH要调到4.5（变色点）。
（6）定氮仪参数设置中，加碱量设置为3S；定氮仪开机预热后，要多空蒸几次，等读数稳定后再进行样品测定。
三、植株全磷的测定（H2SO4—H2O2消煮，钒钼黄比色法）1、方法原理在酸性条件下，正磷酸能与偏钒酸和钼酸发生反应，形成黄色的三元杂多酸—钒钼磷酸。
溶液黄色稳定，黄色的深浅与磷的含量成正相关，所以，可用比色法测定溶液中磷的含量。
2、主要仪器、试剂（1）主要仪器：万分之一电子天平、电磁炉、移液管（1、5、10ml 2个）、吸耳球、容量瓶（50ml 8个、100、1000ml）、量筒吸管、塑料瓶、棕色瓶、pH试纸、烘箱722或723型分光光度比色计（2）试剂浓硝酸(分析纯)0.2%二硝基酚指示剂（0.25g 2,6-二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于100ml水中，其变色范围是pH 2.4（无色）—4.0（黄色），变色点是pH 3.1）6mol/LNaOH溶液（24g NaOH(分析纯)溶于水，稀释至100ml）磷标准液50ug·mL-1（准确称取经105℃烘干的KH2PO4(分析纯)0.2195g溶于水，移入1L容量瓶，加水约400ml，加入5ml浓H2SO4（或浓硝酸），用水定容，装入塑料瓶中低温保存）。
钒钼酸铵试剂：A液：将25.0g的钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O，分析纯］溶于400mL水中。
B液：将1.25g的偏钒酸铵(NH4VO3，分析纯)溶于300mL沸水中，冷却后，加入250mL浓硝酸(分析纯)，冷却至室温。
将A液缓缓注入B液中，不断搅匀，加水稀释到1L，贮入棕色瓶中。
3、测定步骤吸取消煮好的待测液20.00 mL（含P 0.05~1.0mg）置于50ml容量瓶中，加2,6-二硝基酚（或2,4-二硝基酚)指示剂2滴，用6mol·L-1NaOH 调pH至刚显黄色，准确加入钒钼酸铵试剂10.00mL，用水定容，摇匀。
同时做空白实验。
15min后，用分光光度计在450nm处比色，以空白液调节吸光值的零点。
标准曲线制作：准确吸取50ug·mL-1的P标准溶液0、1.0、2.5、5、7.5、10.0、15.0mL，于50mL容量瓶中，加与吸取的待测液等量的空白消煮液，同上述操作步骤显色和比色。
该标准系列P的浓度分别为0、1.0、2.5、5、7.5、10.0、15.0 ug·mL-1P。
4、结果计算植株全P(%)=ρ·V×分取倍数×10-4 /m式中：ρ——从标准曲线查得显色液P的质量浓度(ug/mL)V ——显色液体积(mL)分取倍数：定容体积/分取体积，100/10m ——烘干样品质量（g）10－4—将ug/L浓度单位换算为百分含量的换算因数5、注意事项显色液的酸度要求在0.04~1.6mol.L -1H+ 内，酸度过高时，显色不完全或不显色，酸度太低时则可能生成沉淀或其它物质的颜色；比色要在15min后、24h内完成。
四、植株全钾的测定（H2SO4—H2O2消煮，火焰光度法）1、方法原理植物体内的钾几乎全部以离子状态存在于植物组织中，样品经消煮或浸提，并经稀释后，待测液中的K可用火焰光度法测定。
2、主要仪器、试剂（1）主要仪器：容量瓶（50ml 8个、1000ml）；移液管(1.0、5.0、10ml)+吸耳球、火焰光度计。
（2）试剂：100 ug·mL-1K标准溶液（准确称取在105℃干燥2h后的0.1907g KCl，溶于水，于1L容量瓶中定容，存于塑料瓶中。
3、测定步骤吸取消煮好的待测液5.000mL（含K 10 mg/L~50 mg/L），置于50 mL容量瓶，用水定容，摇匀，直接在火焰光度计上测定，读取检流计读数。
标准曲线制作：准确吸取100 ug·mL-1Ｋ标准溶液0，0.5，1.0，2.5，5.0，10，20ml，分别放入50ml容量瓶中，加入与吸取的待测液等量的空白消煮液，加水定容即得0，1，2，5，10，20，40mg/L K的标准系列溶液。
以浓度最高的标准溶液定火焰光度计检流计的满度，然后从稀到浓依次进行测定，记录检流计读数，以检流计读数为纵坐标绘制标准曲线。
4、结果计算植株全钾(%)=ρ·V×分取倍数×10-4 /m式中：ρ：从标准曲线查得显色液K的质量浓度(ug·mL-1)V：测定液体积(mL) 50ml分取倍数：定容体积/分取体积，100/10m：烘干样质量（g)10－4：将ug/L浓度单位换算为百分含量的换算因数5、注意事项(1)按要求制作标准曲线；(2)标准溶液和待测液的组成要基本相同。
因为，溶液组成的改变（包括酸碱、阴、阳离子的浓度）对测定结果有影响；(3)仪器状态（如空气压力、火焰的状态等）对测定结果有影响。