方法学评价文件（3）
• EP10-A：定量实验室方法的初步评价 核准 指南（Preliminary Evaluation of Quantitative Clinical Laboratory Methods; Approved Guideline），提供了用于分析方 法和设备操作的初步评价的实验设计和数 据分析。
三、方法选择的步骤
•1.提出要求 •2.获取资料 •3.选定候选方法 •4.候选方法的初步试验 •标准曲线的线性范围和重复性； •重复试验——精密度； •对比试验——准确度；
评价临床方法的文件
• 核准（approved），编号为A ：核准文件是 修改后的最终文件。
• 提议（proposed），此类文件编号为P ：“ 提议文件”的内容通常要接受广泛、细致、 全面的评论；
• 它在发展相关的标准和指南时采取了特有的一致化 过程（consensus process）。
• NCCLS的自愿一致化过程是一个建立正式标准的过 程，包括：方案的认可；建立和公开对有关文件的 评论；根据使用者的意见修改文件。
方法学评价文件（1）
• EP5-A：临床化学设备操作精密度评价 核准指南（ Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline）。用于 临床化学设备进行精密度评价的实验设计及如何与 生产厂声明的精密度进行比较。
• 2．二级标准品（次级参考物， secondary reference material ） 包括用于 常规分析的标准液。这类标准品可由实 验室自已配制或为商品，它的示值必须 用一级标准品和参考方法并由训练有素 的，能熟练掌握参考方法的操作者确定 ；主要用于常规方法的评价或为控制物 定值和常规测定的结果计算。
• 接受客户委托又必须使用标准方法中未包含的方 法时，应征得客户的同意，所制定的方法在使用 前应经过适当的确认。
（二）方法的确认
• 确认是通过核查并提供客观证据，以证实 某一特性预期用途的特殊要求得到满足。
• 实验室在使用非标准方法、实验室自己设 计（制定）的方法、超出其预定范围使用 的标准方法、扩充和修改过的标准方法时 ，应对方法进行确认，以证实该方法适用 于预期的用途。
• 暂定（tentative）文件，编号为T。暂定文件 还需要进行特定的评价或需要收集数据，以 保证其应用；
• 还有一类委员会报告，则是尚未通过一致化 过程的文件，编号为R。
美国的国家临床实验室标准委员会 （NCCLS）
• 多年来一直致力于制定一系列评价临床方法的文件 。
• NCCLS是一个全球性、多学科、非营利性的标准化 和教育性的团体，旨在促进医疗卫生领域中的标准 化进程和应用。
• 应优先使用以国际、区域或国家标准发布 的方法。
• 当客户未指定所用方法时，实验室应选择 国际、区域或国家标准发布的，或由知名 的技术组织或有关科学书籍和期刊公布的 ，或由设备制造商指定的方法。
（一）分析方法的选择
• 我国实验室中使用的分析仪器和试剂，应具有国 家药品监督管理局核发的相应文号。
• 实验室制定的或采用的方法如能满足实验室的预 期用途并经过验证，也可以使用。实验室应用自 己制定的检测方法的过程应是有计划的活动，应 指定足够的、有资格的人员进行。
IDMS IDMS
原子吸收分光光度法 邻甲酚酞络合酮法， MTB法原子吸收ຫໍສະໝຸດ 光光度法 MTB法葡萄糖 尿素
IDMS IDMS
己糖激酶法 尿素酶法
葡萄糖氧化酶法 脲酶波氏法
肌酐
IDMS 离子交换法
总蛋白 —— 凯氏定氮法
肌酐氨酰基水解酶 法
双缩脲法
二、检测方法的选择
• 在选择实验室分析方法时，应采用满足客 户需要并适用于所进行的方法。
• 确认应尽可能全面，如： • 方法的精密度、 • 线性分析范围、 • 与参考方法的比较、 • 结果的不确定度、 • 检出限、 • 抗干扰能力 • 满足预定用途或应用领域的需要。
（三）常规方法选择的原则
•（一）适用性
• 微量快速 • 方法简便 • 安全可靠 • 成本低廉
•（二）可靠性
• 较高精密度、准确度 • 较好检测范围
• 5. 正态分布（normal distribution）：是变量分布的一种常 见形式，正态分布曲线是以均数为中心，左右完全对称的钟 形曲线，它有两个参数：总体均数μ和总体标准差σ，一般用 N(μ，σ2)表示其函数。
• 6. 第一类错误（type Ⅰ error）：又称Ⅰ型错误，即拒绝了 实际上成立的H0，为“弃真”的错误，其概率通常用α表示。
一 检验方法和标准品的分级
• （一）方法的分级 临床生化检验方法根据其准确度与精密 度的不同可以分为决定性方法、参考方 法、常规方法等三级。
• 1．决定性方法（definitive method） 是指准确度最高，系统误差最小，经过 详细的研究，没有发现产生误差的原因 或在某些方面不够明确的方法。用于发 展及评价参考方法和一级标准品。
• EP11-P：用于体外诊断检测说明的统一描 述 提议指南（Uniform Description of Claims For In Vitro Diagnostic Tests ; Proposed Guideline）。
方法学评价文件（4）
• EP12-P：用于定性实验评价的用户协议 提议指南（User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Proposed Guideline）。
方法学评价
临床生化教研室
• 掌握内容： 1.方法学评价概念及方法选择要求 2.方法学评价的主要试验及用途 3.溯源性及实验方法、参考物的分级
• 熟悉内容： 1. 溯源链及校准层次的意义 2.质量目标及其设定方法
• 了解内容： 1.方法学常用的统计学概念
基本概念复习
• 1.平均数（average）：又称均值，是一种用于描述数值变 量集中趋势或平均水平的指标。用X表示。
• 9．灵敏度(sensitivity)： 是指检测信号的变化量（Δ y）与 被测物变化量(Δ x)的比值。可以反映仪器、试剂对样本浓度 变化的反应能力。S=Δ y/Δ x
• 10. 基质效应（matrix effect）：被测量以外的某种样品特性 对被测量的值的影响。
• 11. 准确度（accuracy）：表示测量结果与真值的一致程度。 • 12. 精密度（precision）：表示测量结果中的随机误差大小
3．校准品（calibrator） 用二级标准品和常 规方法测定得到校准品，用于常规测定中 的标准
4 .控制物（control material） 具有与 检测过程相适应的特性，其成分及基质与 检测样本相同或相似，且均匀、稳定。
用于质量控制，控制患者样本的测定误差
决定性方法
用途：评价参考方法 及为一级参考物定值
的程度，即指一定条件下进行多次测定时，所得结果之间的 符合程度。
• 13. 系统误差（systematic error）：指在重复条件下，对同 一被测量进行无限多次测量所得结果的平均值与被测量的真 值之差，即有一定大小和方向的误差。
• 14. 随机误差（random error）：是指测量结果与在重复条 件下，对同一被测量进行无限多次测量所得结果的平均值之 差。
• 2．参考方法（reference method） 是 指准确度与精密度已经充分证实的分析 方法，干扰因素少，系统误差与重复测 定的随机误差相比可以忽略不计，有适 当的灵敏度、特异性及较宽的分析范围 。这类方法在条件许可的实验室中应经 常使用。用于评价常规方法和试剂盒， 鉴定二级标准品。
3．常规方法（routine method） 指性 能指标符合临床或其他目的的需要，有 足够的精密度、准确度、特异性和适当 的分析范围，而且经济实用。这类方法 经有关学术组织认可后可称为推荐方法 （recommended method），推荐方法应 具有足够的实验证据
• EP15-A：精密度和准确度性能的应用 核准 指南（User Demonstration of Performance for Precision and Accuracy ;Approved Guideline）。
• 15.金标准（gold standard）：是指被公认的诊断疾病的最 可靠方法，金标准能正确区分受试者患病与否。
第一节 临床生化检测方法的选择 临床生化检测方法的选择和评
价，是临床生化检验质量控制的重 要基础工作。当建立一个新的方法 ，或引进新的方法、都应对它们的 技术性能作出评价，以便科学的选 择和应用。
三级方法的相互关系
常规方法
应
准
用
确
范 围
参考方法
度 增
增
加
加
决定性方法
（二）标准品的分级
• 国际标准化委员会将标准品（参考物） 的定义为：一类具有一种或多种成分、 且含量均匀确定的物质。 ；被用于校正 仪器或用于评价一种测定方法的物质， 并将其分成三级。
（二）标准品的分级
1．一级标准品（原级参考物，primary reference material ） 是一种稳定而均一 的物质，它的数值已由决定性方法确定 ，或由高度准确的若干方法确定，所含 杂质也已经定量，且有证书；用于校正 决定性方法，评价及校正参考方法以及 为二级标准品定值。
一级参考物 用途：发展和评价参考方法， 校正决定性方法和参考方法， 产生二级参考物
参考方法
用途：为二级参考物及控制物定值， 评价常规方法（标准化、偏差、干扰 因素）
二级参考物
用途：常规方法的工作 标准及为控制物定值
各级实验方法与参考物的相互关系
临床生化检测项目方法表