(一)总含糖量的测定
1.原理:手持糖量计法
手持糖量计通过测量水溶液的折射率来测量其浓度的仪器。
所有水溶液都能使光的方向发生偏折。
光的偏折可以随溶液浓度的增加而成正比增加。
糖度折光仪用于快速精确测定含糖溶液的溶度。
2.仪器:WYT手持糖量计
3.试验步骤:①取各对照新鲜的水蜜桃(番茄)5g左右,用研钵研磨成匀浆,研磨过程中注意不要使温度过高。
②掀开进光棱镜盖片,用柔软绒布仔细的将折射棱镜拭净,擦拭过程中注意不要将镜面划损。
③将研磨得到的液体数点滴于折射棱镜上,将棱镜盖合上,然后将糖量仪对向光源或明亮处。
④然后旋动目镜调焦手轮,使得视场内分化线清晰可见为止;标线上明暗分界线即糖液的浓度数,读取并记录好数据。
表2 各对照TTS记录表:
(二)可滴定酸的测定
1.原理:酸碱中和转移法
水蜜桃(番茄)中的有机酸,用氢氧化钠标准溶液滴定,以酸度计测定终点,用消耗的氢氧化钠标准溶液的体积计算总酸量。
2.试剂:蒸馏水,氢氧化钠标准溶液(0.1mol/L),KHC8H4O4,酚酞指示剂。
3.步骤:
①氢氧化钠标准溶液(0.1mol/L)制备:电子天平,迅速称取分析纯氢化钠4g,溶于蒸馏水中稀释到1000ml,摇匀;
②氢氧化钠标准溶液的标定:精确称取120℃烘2h以上的基准试剂邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)0.3~0.4g(精确至0.0001g),放入250mL锥形瓶中加蒸馏水约100mL溶解,加入1%酚酞指示剂2~3滴。
用以上配制好的氢氧化钠溶液滴定,至显微红色30s不退色为终点。
记录消耗氢氧化钠溶液的毫升数,平行试验3~5 次,取平均值。
同样条件下取100mL 蒸馏水作空白试验。
记录消耗氢氧化钠的毫升数;
(三)测定维生素C
1。
原理:2,6-二氯酚靛酚法
L-抗坏血酸(Vc)中的—C=C—基具有还原性,还原型L-抗坏血酸能与氧化剂染料2,6-二氯酚靛酚作用,染料本身被还原成无色的衍生物,同时还原态的L-抗坏血酸被氧化成无色的脱氢L-抗坏血酸。
一定量的样品提取液还原标准染料的量与样品中所含Vc的量成正比。
染料2,6-二氯酚靛酚在中性或碱性溶液中呈蓝色,在酸性溶液中呈粉红色。
用2,6-二氯酚靛酚滴定样品,在达到终点之前,滴下的2,6-二氯酚靛酚立即被还原成无色;当溶液中的L-抗坏血酸被消耗完时,滴下的过量的2,6-二氯酚靛酚在酸性体系里呈现粉红色。
所以当溶液从无色转变成微红色时,即为滴定终点。
2。
试剂的配制
①草酸溶液(2%):每组配制250mL
②2,6-二氯酚靛酚溶液:
分别称取2,6-二氯酚靛酚300mg、碳酸钠300mg,用热蒸馏水200mL溶解并定容至3000mL(过滤除去难溶颗粒,置于棕色瓶中,贮于冰箱中备用。
有效期一周,使用前需标定。
)
3。
操作步骤
①样品液的制备
a 取材:称取新鲜水蜜桃(番茄)10g左右(秤取的时候多取几个样本的桃子避免偶然误差),准确记录称样量。
再称量2.5g草酸,与样品一起用纱布包裹住。
b研磨:样品包置研钵中,加15mL2%草酸,用研棒挤压样包,将样品充分磨细。
将汁液转移到100mL容量瓶中。
残渣再加15mL2%草酸,继续研磨,汁液再合并到上述容量瓶中。
如此反复研磨2~3次,合并汁液。
c 定容:最后用2%草酸定容至V=100mL,摇匀备用。
①样品的测定
吸取汁液20mL,放入100mL锥形瓶中,立即用2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至出现粉红色在15秒内不消失为止。
记录所用滴定液体积。
平行操作三次得V1,V2,V3,取平均值V。
③空白测定
取2%的草酸液20mL,放入另一100mL锥形瓶内,用2,6-二氯酚靛酚滴定至终点,记录染料用量V0。
4. 结果处理
计算你所取生物材料中Vc的含量(单位用mg/100g鲜重)。
(四)硬度测量:采用硬度计;每个处理取5个果实测量硬度
(五)根茎比的测定
(六番茄重量的统计。