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植物组织游离脯氨酸含量的测定实验报告精华版

实验报告
一、实验目的:
了解植物体内水分亏缺与脯氨酸积累的关系
二、实验所用仪器、药品、材料:
1.仪器
分光光度计,水浴锅,漏斗,大试管(20ml),具塞刻度试管(20ml),注射器或滴管(5-10ml)。

2.材料
植物小麦叶片
3.试剂
(1)3%磺基水杨酸
(2)甲苯
(3)2.5%酸性茚三酮显色液:冰乙酸和6mol·l-1磷酸以3:2混合,作为溶剂进行配制,此液在4℃下2-3天有效
(4)脯氨酸标准溶液:准确称取25mg脯氨酸,用蒸馏水溶解后定容至250ml,其浓度为100μg·ml-1。

再取此液10ml,用蒸馏水稀释至100ml,即成10μg·ml-1的脯氨酸标准溶液。

三、实验步骤:
1、标准曲线的绘制:
(1)取7支具塞刻度试管按表9.2-1加入各试剂。

混匀后加玻璃球塞,在沸水中加热40min。

(2)取出冷却后向各管加入5ml甲苯充分振荡,以萃取红色物质。

静置待分层后吸取甲苯层以0号管匀对照在波长520nm下比色。

(3)以消光值为纵坐标,脯氨酸含量为横坐标,绘制标准曲线,求线性回归方程。

表9.2.1各试管中试剂加入量
2、待测物的提取、显色、比色等测定的数据记录:
3、计算结果:
从标准曲线中查出测定液中脯氨酸浓度
脯氨酸[μg.g-1(干或鲜重)] =(C.V)·(A·W)-1
式中:C一提取液中脯氨酸浓度(PS),由标准曲线求得: V -提取液总体积(ml)
A --- 测定时所吸取得体积(ml)
W----- 样品重(g)
脯氨酸[μg.g-1(干或鲜重)] =(C.V)·(A·W)-1=
四、实验小结:(本次实验成败之处和原因分析以及改进措施)
1.配置的酸性茚三酮溶液仅在24h内稳定,因此最好现用现配。

2.测定样品若进行过渗透胁迫处理,结果会更显著。

3.试剂添加次序不能出错。

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