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细胞生物学实验一


3、物镜及使用 (1)物镜的种类 ①消色差物镜(无标志)
②复消色差物镜(金属外壳表有 “APOCHRAMATIC”or“APO”)
③莹石物镜(fluoite objective F1) ④平场物镜(plan objective) 外壳标有“P1.APO”、“PLAN”、 “P1“。其中“P1.APO”效果最佳。
常识:
分辨力区分两个点最小距离的能力. 公式:
分辨距离= 0.61波长/物镜镜口率(nm)
物镜镜口率=n.sin a/2 n-物镜与标本之间的折射率<1.6 如:空气为1,干燥 物镜镜口率<1,一般为0.05—0.95; 水为1.33,水浸
物镜镜口率为0.1—1.25;油浸物镜(香柏油1.515)镜 口率最大,近1.5
实验一 几种特殊显微镜的原理与 使用演示
刘 军
一、实验目的
了解普通光学显微镜、相差显微 镜、暗视野显微镜、荧光显微镜的工作 原理及正确的操作方法。
通过演示及学生的操作,达到正确 选择和使用各种光学显微镜的操作。

二、实验原理
1、相差显微镜的工作原理 2、暗视野显微镜工作原理 3、荧光显微镜工作原理(略)
(2)物镜外壳标志
①物镜消色差程度 如:APO、F1、P1、P1 APO
②放大倍数 如:4×;10×;20×;40×等
③数值孔径 n.A;N.A.;num.APert等表示。常与放大倍 数在一起,如:10/0.25;40/0.65;100/1.25 ④标准机械筒长
160mm or 170mm ⑤需用盖玻片的情况 如:160/0.17(盖玻片为0.17mm);160/;160/0等 ⑥物镜与被检样品间的介质情况 如“OIL“、”W“等
三、技术环节:
暗视野成像原理
1、普通显微镜的光路合轴 (1)聚光器的调中
注:显微镜的光路,除聚 光器和光源外,无需调整。
①聚光器升至最高位置。 ②开启光源。 ③将被检样品放在载物台上,用低倍镜 聚焦。 ④缩小视野光阑,在显微镜的视野看到 模糊的视野光阑图象。
⑤微降聚光器,使视野光阑图象清晰聚 焦。 ⑥调整两个调中螺杆,推动聚光器,使 缩小的视野光阑图象调至视野中心。 ⑦开放视野光阑,使多边形的周边与视 野的外缘相接。 ⑧使聚光器回复顶点位置。
(3)相差显微镜部件
具有环状光阑的转盘聚光器、相差 物镜、合轴调中望远镜和绿色滤色镜。
见下图:
3、作业
结合课堂讲授,说明三种特殊显微 镜与普通光学显微镜结构的不同;原 理。
常识:
分辨力区分两个点最小距离的能力. 公式:
分辨率 D = 0.61 λ/N . sin α / 2
λ: 光源波长; α: 物镜镜口角; N: 介质折射率
2、光源的调中
光源灯安装在灯室的灯座上。其位置可 由灯室上的垂直和水平调节螺丝控制,使灯 丝图象位于视野中心。灯丝观察: (1)视野光阑口的滤光镜座上,放一磨砂玻 璃用于观察灯丝象的位置,至调中止。 (2)在物镜后焦面上,待样品聚焦后,从镜 筒中取下目镜,在物镜的视野中,可见灯丝 图像,借以调节位置。
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