较慢，做一些定性的分析。经过离心之后，若上清液
实验总结 无色，证明在这个时间段血细胞没发生溶血，若上清
液略红，证明有溶血发生。当然这个方法不很精确， 但却快速、便于观察。
细 胞 生 物 学 实验课程教案（5）
实验题目
线粒体和液泡系的超活染色与观 察
实验学 时
3
1 观察动、植物活细胞内线粒体和液泡系的形态、数量及
与糖的运 输、储存物
理盐水洗5次，每次2000r/min，离心5min，最后按压积 质的积累、
红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞液。
细胞间的互
3.细胞凝集反应现象的观察与讨论（50分钟）：用滴管吸 作以及细胞 分裂的调控
取土豆凝集素和2%红细胞液各一滴，置载玻片上，充分 有关。
混匀，静置20min后于低倍显微镜下观察血球凝集现象。
用70％酒精棉球消毒人的指腹→采血→推片：挤出第
二滴血置于载玻片的右侧→再取另一张边缘光滑的双
凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血
滴，使血液沿玻片端展开成线状→两玻片的角度以
30~45°为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成
血液薄膜→染色：用天平称取去皮的土豆块茎
2g+10mlPBS缓冲液，浸泡2h→粗提液中含有可溶性
实验原理
小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时 间，就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后 分批沉降在离心管底部，分批收集即可获得各种亚细胞组 分。 普通离心机、组织捣碎机、粗天平、荧光显微镜。
实验原理 分。
③凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合
的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使 细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形 成“桥”的结果。 ④凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合价，并与 细胞膜上受体的分布有关。
实验仪器 显微镜、粗天平、载玻片、滴管、离心管、离心机等
为无色状态
③中性红：中性红对高尔基体、液泡系的染色具有专一
性。只将活细胞中的液泡系当成红色，细胞核与细胞质完 全不着色(这可能与液泡系中某些蛋白质有关。 显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、镊子、双面刀片、
实验仪器 解剖盘．载玻片、凹面载玻片、盖玻片、表面皿、吸管、
牙签、吸水纸。
实验材料 人口腔上皮细胞、洋葱、小麦种子或黄豆幼根根尖
实验总结
其实也不难，无菌抽取动物静脉血液，
当然血液抽出来后肯定要先加抗凝剂了，
然后再加生理盐水。那么怎么从血液中将
红细胞分离出来呢？想想，血液中有血
清、红细胞、白细胞和血小板，按道理来 讲红细胞应该最重吧(有待查证)，用离心机 在2000r/min下离心5min，去掉上清液，得
到的应该就是红细胞了，再加适量生理盐 水洗涤几次后，加一定量是(按压积红细胞 体积算)生理盐水即可配成相应浓度的红细
中性红染液滴中，染色5～10min。
吸去染液，
滴一滴Ringer液 盖上盖玻片进行镜检(镊子轻轻地
下压盖玻片，使根尖压扁，利于观察)
实验结果： 在高倍镜下，先观察根尖部分的生长点的细胞，可
见细胞质中散在很多大小不等的染成玫瑰红色的圆形小 泡，这是初生的幼小液泡。然后，由生长点向延长区观 察，在一些已分化长大的细胞内，液泡的染色较浅，体 积增大，数目变少。在成熟区细胞中，一般只有一个淡 红色的巨大液泡，占据细胞的绝大部分，将细胞核挤到 细胞一侧贴近细胞壁处。
土豆凝集素。
2. 显微测微尺的使用（35分钟）：以无菌方法抽取鸡
血注射器中抽取3.8%柠檬酸钠1ml抽取鸡静脉血液
2ml，用生理盐水洗5次，每次2000r/min，离心
5min，最后按压积红细胞体积用生理盐水配成2%红
细胞液。
3.细胞的观察与讨论（50分钟）：淋巴细胞、白细
胞、中性粒细胞、碱性粒细胞和酸性粒细胞
150分钟。
实验作业
1.细胞间凝集的原理是什么？ 2.简图表示血细胞凝集原理。
参考资料
（含参考文献、期刊、
杂志等）
1.为什么对照组有PBS液作对照呢？没什么
巧，因为凝集素中本身含PBS缓冲液，当
含本身凝集素是不含PBS的，只是因为本
实验中凝集素的提取时用到了PBS.
2.那么红细胞悬液是怎么制备的呢？
实验原理
细胞的颗粒呈粉红色。根据细胞中颗粒的颜色、大小及多 少，再结合细胞的大小及细胞核的形态，就可以将白细胞 进行分类计数。
显微镜、粗天平、载玻片、滴管、离心管、离心机、医用 一次性采血针、酒精棉球、镊子、载玻片、目镜测微尺和 镜台测微尺等
实验仪器
实验材料
鸡血细胞
与实施过程
实验内容 备注
1.血涂片的制备与血细胞的观察（50分钟）: 采血前
（1）苏木精为碱性染料染细胞核，苏丹红为偶氮脂溶
性染料，可显示细胞中的脂类的分布及量； （2）甲基绿与DNA双螺旋外侧的磷酸根基团结合力
实验原理 强，结合后阻止派洛宁从碱基之间插入。甲基绿与DNA的
结合产物为绿色。派洛宁与RNA的结合力强，RNA结构较
松散，派洛宁可以插入，从而中和磷酸基团，阻止甲基绿 染色，派洛宁与RNA的结合物呈红色，根据颜色的部位可 以判断DNA和RNA的定位并且判断两种核酸的相对含量。
分布；
实验目的
2 掌握细胞超活染色技术及原理；
3 学习一些细胞器的超活染色技术。
①活体染色：应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活
细胞内某些细胞结而又很少影响细胞生命活动的染色方
法。
②詹纳斯绿B：詹纳斯绿B能专一的对线粒体进行活体染
色。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态，即有
实验原理
色状态，呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成
标。
实验仪器 离心机、移液枪、试管、试管架 实验材料 鸡血
实验内容与实施过程 备 注
1.鸡血细胞悬液的制备：一份鸡血+10份 0.17mol/L氯化钠，形成一种不透明的红色液体， 此即稀释的鸡血。 2.低渗溶液：一支试管中，加入10ml蒸馏水+1ml 稀释的鸡血，观察溶液颜色的变化？ 3.鸡红细胞的渗透性观察：在10种等渗溶液中观 察细胞溶血现象及时间。
细 胞 生 物 学 实验课程教案（1）
实验题目
血涂片的制备及细胞大小 实验学
的测量
时
3
1. 掌握血涂片的制备方法
实验目的 2. 认识红细胞及各种白细胞的典型形态
3．掌握显微测微尺的使用方法
将血液样品制成单层细胞的涂片标本，经瑞氏染液染色
后，不同白细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色。碱性粒细 胞的颗粒呈蓝紫色，酸性粒细胞的颗粒呈橘红色，中性粒
胞悬液了。
除了土豆中有凝集素外，还有韭菜叶片
也有。
凝集素使细胞凝集是因为它与细胞表面
的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的结果,加 入与凝集素互补的糖可以抑制细胞发生凝 集。大多数凝集素存在于储藏器官中,作为 一种氮源；对某些植物而言,受到危害时,凝 集素作为一种防御蛋白发挥作用。
细 胞 生 物 学 实验课程教案（4）
本实验过程很简单，只需要将植物凝集素与红细胞混
合后用低倍显微镜观察现象即可。
具体如下：
实验组
凝集素1滴
红细胞悬液1滴
对照组
PBS液1滴
红细胞悬液1滴
4、实验小结（15分钟）：总结实验过程中学生的操作是
否规范；实验是否成功，如果不成功，问题出在哪里；哪
些实验作得比较好。提醒预习下节课实验内容，提问。共
6.10ml硫酸钠 +1ml稀释羊血
7.10ml葡萄糖 +1ml稀释羊血
8.10ml甘油+1ml 稀释羊血
9.10ml乙醇+1ml 稀释羊血
10.10ml丙酮 +1ml稀释羊血
参考资料 （含参考文 献、期刊、
杂志等）
溶血时间及现象的观察比较困难，可采用离心辅
助的方法来判别鸡血在哪些等渗液中最易溶血，哪些
土豆块茎、鸡血细胞
实验材料
实施过程
实验内容与 备注
1.凝集素粗提液制备（50分钟）：用天平称取去皮的土豆 凝集素是
块茎2g+10mlPBS缓冲液，浸泡2h→粗提液中含有可溶性
一类含糖、 并能与糖专
土豆凝集素。
一结合的蛋
2.鸡红细胞悬液制备（35分钟）：以无菌方法抽取鸡血注 白质,被认为
射器中抽取3.8%柠檬酸钠1ml抽取鸡静脉血液2ml，用生
备注
实验内容与实施过程
1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察 清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上
↓ 滴2滴1/5000詹纳斯绿B染液
↓ 用牙签口腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞
↓ 刮下的粘液状物放大载玻片的染液滴中
↓ 染色10-l5min(注意不可使染液干燥，必要时可再加滴 染液)
↓ 盖上盖玻片,显微镜下观察 2. 植物细胞液泡系的超活染色与观察 取小麦种子发芽的根尖 用刀片纵切根尖 放入
将观察到的现象列入下表，对实验结果进
行比较和分析。
附表：不同低渗溶液下的溶血现象。
试管编号
是否
时
结果分
溶血 间
析
实验作业
1.10ml氯化钠 +1ml稀释羊血
2.10ml氯化铵 +1ml稀释羊血
3.10ml醋酸铵 +1ml稀释羊血
4.10ml硝酸钠 +1ml稀释羊血
5.10ml草酸铵 +1ml稀释羊血
杂志等）
实验总结
对于涂片的厚度一定要掌握，不 然太厚不方便观察细胞，对于各种 白细胞的染色一定要把握好，适度 的染色可容易的区分开五种白细 胞，并进行大小的测量和绘图。
细 胞 生 物 学 实验课程教案（2）