二、代谢和生物监测指标
维生素E来源
膳食摄入：植物油、绿叶蔬菜 体内合成：少 吸收： 小肠 分布： 肝脏储存和代谢
排泄： 尿液 生理功能： 抗衰老、抗肿瘤、保护肝脏、促进受损细胞修
复等
二、代谢和生物监测指标
生物监测指标
血清或全血维生素E
三、样品的采集和保存
静脉血： 时间 血清 -70℃，避光保存
四、高效液相色谱法测定全血中的维生素E
方法
紫外-可见分光光度法 荧光光度法 GC HPLC
四、高效液相色谱法测定全血中的维生素E
原理： 经肝素抗凝的全血样品，乙醇沉淀蛋白后正
己烷萃取维生素E，高效液相色谱分离，紫外检测 器检验。保留时间定性，外表标准曲线法定量。 检出限：0.08μg/mL
四、高效液相色谱法测定全血中的维生素E
激发波长 ：365nm；发射波长：435nm
荧光光度法测定尿中的硫胺素
注意事项：
（1）酸解、酶解可提高回收率。 （2）对照。同时做标准管和空白管。空白管以氢 氧化钠溶液代替碱性铁氰化钾，其他操作一致。
二、代谢和生物监测指标
维生素B1来源
膳食摄入：粮谷、豆类、干果、绿叶菜、动物内脏及蛋类
吸收： 小肠
代谢： 肝代谢生成磷酸酯衍生物
硫胺素评价指标：常以血液中三种形式含 量之和作为指游标离硫胺素、单磷酸硫胺素 血浆
焦磷酸硫胺素
红细胞、
三磷酸硫胺素
中枢神经系统
排泄：超出储存阈值的硫胺素检疫原形或结合形式经尿排出 体外，可通过负荷试验反映营养状况。
三、样品的采集和保存
血样： 静脉血，肝素抗凝，-70℃保存。
尿样：收集口服维生素片后四小时内排出的全部尿液，加草 酸调节pH3，4℃避光保存。长期-20℃保存。
四、硫胺素的检测
方法
荧光光度法 HPLC
荧光光度法测定尿中的硫胺素
原理： 尿液经酸水解和酶解后，尿中有利硫胺素被
碱性铁氰化钾氧化为具有荧光的硫色素，有利溶 剂萃取后测定其荧光，标准曲线法定量。
荧光光度法测定尿中的硫胺素
样品处理： 尿样25mL,盐酸酸化（pH3）,120℃酸解30min。
乙酸钠调节pH4.5,加入蛋白酶45~50℃恒温过夜。水定容 混匀过滤。取5mL滤液加0.7mg/mL碱性铁氰化钾3mL,震 荡混匀，再加入正丁醇，涡旋混匀1min,静置分层后去上 层有机项测定荧光强度。 仪器参考条件：
第一节 维生素A和β-胡萝卜素
一、理化性质
维生素A，脂溶性、主要有维生素A1（视黄醇， retinol）和维生素A3（3-脱氢视黄醇，retinol）两种形式。 体内的主要活性形式是视黄醇。在空气中易氧化，加热 和光照加速氧化，对酸不稳定。不溶于水，有荧光性， 其无水乙醇、环己烷等在自我照射下发出绿色荧光。
四、血清中维生素A及β-胡萝卜素的测定
注意事项：
（1）内标物：维生素A乙酸酯 （2）标准溶液领用标定 （3）无水乙醇作为蛋白质变性剂 （4）缩短保留时间可用该报表了有机溶剂洗脱 （5）前处理可用分散液相微萃取
第二节 维生素D、E、K
一、理化性质
维生素E，有生育酚及生育三烯酚两类，有四种异构 体。其中α-生育酚（α-tocopherol）活性最强。在无氧 条件下对热稳定，对碱了、紫外线、铁盐等均不稳定。 极易被氧化，可保护其他物质不被氧化。
第一节 维生素A和β-胡萝卜素
一、理化性质
β-胡萝卜素，植物天然色素，是视黄醇的二聚物和 最具活性的维生素A前体。对热、酸碱稳定、易在紫外 线和空气总氧化失活。
二、代谢和生物监测指标
维生素A来源
膳食来源：肝脏、肉制品、乳制品、鱼肝油等 维生素A与人健康的关系
缺乏： 夜盲症、干眼症、角膜软化症
过量： 肝损伤、骨异常、脱皮、脱发、复视、呕吐及 头痛、胎儿畸形
第六章 维生素的测定
右江民族医学院Biblioteka 学习目标掌握熟悉 了解
生物监测指标； 测定方法原理 主要步骤和注意事项 生物监测意义
理化性质； 代谢途径
食物来源、缺乏及过量症状
概述
维生素（vitamin）：是生物体维持正常生命活动必 须且无法通过自身合成足够量，需要通过膳食摄取的一 类有机化合物的统称。
维生素分类： 脂溶性（A、D、E、K） 水溶性两类（B族、C）
二、代谢和生物监测指标
我国 血清视黄醇浓度 儿童>300μg/L 成人>400μg/L
世界粮农组织（FAO） 视黄醇含量、血浆视黄醇浓度、相对剂量反应
血清β-胡萝卜素 正常参考值：>800μg/L
三、样品的采集和保存
静脉血： 时间 血清 -70℃，避光保存
四、血清中维生素A及β-胡萝卜素的测定
样品处理： 50μL全血样品中加入200μL无水乙醇，混匀
后加入1mL正己烷涡旋混匀，离心取正己烷层 800μL，挥干，甲醇复溶测定。 仪器参考条件： 色谱柱：C8（150mm*4.6mm,5μm） 柱温：50℃ 流动相 甲醇：水=98:2 流速：1.0mL/min UV 波长 ：292nm,
四、高效液相色谱法测定全血中的维生素E 注意事项：
（1）正己烷易挥发，环境温度高是冰浴萃取。 （2）可用C18柱更换，流动相可采用甲醇-乙醇=20：80 （4）标准液可用α-生育酚配制，临用标定 （5）可同时检测维生素A
第三节 维生素B
一、理化性质
维生素B1，又称硫胺素（thiamine>），抗神经炎维 生素、抗脚气病维生素。白色结晶，溶于水，在酸性溶 液中稳定，在pH>5的溶液中不稳定。光和热可促其氧 化，易被氧化为脱氢硫胺素，即硫色素。应避光、低温 保存，不宜久贮。
原理： 血清经无水乙醇沉淀蛋白后，正己烷萃取视
黄醇及β-胡萝卜素，C18柱色谱分离，紫外检测 器监测，保留时间定性，内标法标准曲线法定量。
四、血清中维生素A及β-胡萝卜素的测定
样品处理： 100μL血清中加入100μL内标乙醇溶液，混匀
后加入1mL正己烷存取，取上清，挥干，无水乙 醇复溶测定。 仪器参考条件： 色谱柱：C18色谱柱（150mm*4.6mm,5μm） 流动相 甲醇：水=98:2（临用前脱气） 流速：1.0mL/min UV 波长 ：视黄醇325nm,β-胡萝卜素450nm