④色谱峰的区域宽度
峰宽(W)与半峰宽(W 峰宽(W)与半峰宽(W1/2) (W)与半峰宽 峰宽(W) ★★峰宽 从色谱峰两侧的转折点(拐点)作 从色谱峰两侧的转折点(拐点) 切线，在基线上的截距叫峰底宽, 切线，在基线上的截距叫峰底宽, 简称峰宽； 简称峰宽； 半峰宽(W1/2) ★★半峰宽 峰高一半处色谱峰的宽度叫半峰宽。 峰高一半处色谱峰的宽度叫半峰宽。 由于色谱峰顶呈圆孤形，色谱峰的半峰宽并不等于峰底宽的 由于色谱峰顶呈圆孤形， 一半。 一半。
⑤峰高和峰面积 峰高(h) ★★峰高 ★★峰高(h) 是组分在柱后出现浓度极大时的 检测信号， 检测信号，即色谱峰顶至基线的 距离。 距离。 ★★峰面积(A) ★★峰面积(A) 峰面积
⑥保留值 ★ ★保留时间 (tR): 是指被测组 保留时间( 保留时间 分从进样开始到柱后出现浓度最 大值时所需的时间， 大值时所需的时间 ， = 组分在流 动相中停留的时间 + 在固定相 中所停留的时间 ★ ★调整保留时间(tR′) ： 组分的保留时间与死时间的差值： 调整保留时间( 组分的保留时间与死时间的差值： 调整保留时间 tR′=tR-t0 它表示与固定相发生作用的组分比载气在色谱柱中多滞留的时 组分在固定相中所滞留的时间 间，实际上是组分在固定相中所滞留的时间。 实际上是组分在固定相中所滞留的时间。
二、气相色谱法的基本概念 1．色谱常用术语 ．
①色谱流出曲线 是由检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线， 是由检测器输出的电信号强度对时间作图所绘制的曲线， 又 称为色谱曲线图或色谱图。 称为色谱曲线图或色谱图。 色谱图
②基线
是在操作条件下，没有组分流出时的流出曲线。 是在操作条件下，没有组分流出时的流出曲线。 稳定的基线应是一条平行于横轴的直线。 稳定的基线应是一条平行于横轴的直线。 噪音：使基线发生细小的波动的现象 噪音： 基线是在实验操作条件下， 基线是在实验操作条件下，反映检测器系统噪音 随时间变化的曲线。 随时间变化的曲线。
越大， ★ R 越大，表明两组分分离效果越好 ★ 保留值之差取决于固定液的热力学性质 ★ 色谱峰宽窄反映色谱过程动力学因素及柱效能高低
R=0.75
响应信号
R=1.0 R=1.5
保留时间 t, min
对于峰形对称且满足正态分布的色谱峰： 对于峰形对称且满足正态分布的色谱峰： R=1, 分离程度为 分离程度为98%； R=1.5，分离程度可达 ； ，分离程度可达99.7%。 所以 。 R=1.5时可认为色谱峰已完全分开。 时可认为色谱峰已完全分开。 时可认为色谱峰已完全分开
气化室：将液体试样瞬间气化 气化室： 的装置。无催化作用。 的装置。无催化作用。
4. 检测系统
色谱仪的眼睛， 色谱仪的眼睛， 通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成； 通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成； 被色谱柱分离后的组分依次进入检测器， 被色谱柱分离后的组分依次进入检测器，按其浓度或质 量随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示， 量随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示， 给出色谱图； 给出色谱图； 检测器：广谱型 对所有物质均有响应； 检测器：广谱型——对所有物质均有响应； 对所有物质均有响应 专属型——对特定物质有高灵敏响应； 对特定物质有高灵敏响应； 专属型 对特定物质有高灵敏响应 常用的检测器：热导检测器 常用的检测器：热导检测器(TCD); 氢火焰离子化检测器(FID)； ； 氢火焰离子化检测器 电子捕获检测器(ECD) 电子捕获检测器
实际工作中，往往使用相对校正因子 ，即为物质i 实际工作中，往往使用相对校正因子i，即为物质 和标准物质s的绝对校正因子之比 的绝对校正因子之比。 和标准物质 的绝对校正因子之比。 i’ i = s’
1）归一化法：要求试样中所有n个组分全部 ）归一化法：要求试样中所有 个组分全部 流出色谱柱，并全部出峰！则其中组分i 流出色谱柱，并全部出峰！则其中组分 的 含量为： 含量为：
五、定性与定量方法
1、用已知物对照定性 、 该法是基于在一定操作条件下， 该法是基于在一定操作条件下，各组分保留时间 是一定值的原理。 是一定值的原理。
具体做法： 具体做法： 1）分别以试样和标准物进样分析——各自的色谱图； ）分别以试样和标准物进样分析 各自的色谱图； 各自的色谱图 2）对照：如果试样中某峰的保留时间和标样中某峰重 ）对照： 合，则可初步确定试样中含有该物质。 则可初步确定试样中含有该物质。 3）也可通过在样品中加入标准物，看试样中哪个峰增 ）也可通过在样品中加入标准物， 加来确定。 加来确定。
2） 外标法 ： 在一定操作条件下 ， 用对照品配成不同浓 ） 外标法： 在一定操作条件下， 度的对照液，定量进样， 度的对照液，定量进样，用峰面积或峰高对对照品的量 或浓度）作校正曲线，求出斜率、截距， （或浓度）作校正曲线，求出斜率、截距，而后计算样 品的含量。通常截距近似为零，若截距较大， 品的含量。通常截距近似为零，若截距较大，说明存在 一定的系统误差。 一定的系统误差。 若校正曲线线性好，截距近似为零， 若校正曲线线性好，截距近似为零，可用外标一 点法（比较法）定量。 点法（比较法）定量。 Ai As × ms
★ ★死体积（V0 ）：不与 死体积（ ）：不与 死体积 固定相作用的组分从进样到 柱后出现浓度最大值所需要 的载气体积。 的载气体积。若载气的体积 流速为F0，则死体积为 流速为 V0=F0t0 ★ ★保留体积（VR ）：从进样开始到柱后出现浓度最大值 保留体积（ 保留体积 所需要的载气体积 VR=F0tR ★ ★调整保留体积（ VR′ ）：指扣除死体积后的保留体积 调整保留体积（ VR′= t0′F0
液体进样器： 液体进样器： 不同规格的专用注射器，填充柱色谱常用 不同规格的专用注射器，填充柱色谱常用10L； ； 毛细管色谱常用1L；新型仪器带有全自动液体进样 ； 毛细管色谱常用 器，清洗、润冲、取样、进样、换样等过程自动完 清洗、润冲、取样、进样、 成，一次可放置数十个试样。 一次可放置数十个试样。
温控系统
结构流程
四、气相色谱仪主要部件
main assem系统
包括气源、 包括气源、净化干燥管和载气 流速控制； 流速控制； 常用的载气有：氢气、氮气、氦气； 常用的载气有：氢气、氮气、氦气； 净化干燥管：去除载气中的水、有机物等杂质（ 净化干燥管：去除载气中的水、有机物等杂质（依次通过 分子筛、活性炭等）； 分子筛、活性炭等）； 载气流速控制：压力表、流量计、针形稳压阀， 载气流速控制：压力表、流量计、针形稳压阀，控制载气 流速恒定。 流速恒定。
fi Ai xi = f1 A1 + f 2 A2 + ... + f n An
i 为i 物质的相对定量校正因子；Ai为其峰面 物质的相对定量校正因子；
积。 此法简单、准确，操作条件影响小。 此法简单、准确，操作条件影响小。但应用不 因为不知道试样有多少组分？ 多。因为不知道试样有多少组分？应该出多少峰 才叫全部出峰？ 才叫全部出峰？
三、气相色谱结构流程
process of gas chromatograph
1-载气钢瓶；2-减压阀； 载气钢瓶； 减压阀； 3-净化干燥管；4-针形 净化干燥管； 阀；5-流量计;6-压力 流量计;6;6 针形阀； 表；4-针形阀；5-流量 ;6-压力表； 计;6-压力表； 9-检测器；10-放大器； 检测器；10-放大器； 11-温度控制器；1211-温度控制器；12-记 录仪； 录仪； 载气系统 进样系统 色谱柱 检测系统
第二章 药物分析方法
——分析化学部分 分析化学部分
学生:06级药事管理 学生:06级药事管理 :06
长春中医药大学
第三节 仪器分析方法概述
第二章
分类
长春中医药大学
美国气相 色谱仪
国产气相色 谱仪
第五节 色谱法
5.2 气相色谱法
chromatography
Gas Chromatography,GC
× ms
内标物的选择很重要，其选择的基本原则是： 内标物的选择很重要，其选择的基本原则是： 内标物是试样中不存在的纯物质 加入的量应该接近被测组分 内标物色谱峰位于被测组分色谱峰附近， 内标物色谱峰位于被测组分色谱峰附近，与其他峰分离
内标校正曲线法和内标对比法
（Ai / As）样 （Ai / As）标
气相色谱法是采用气体作为流动相的一 种色谱分析法。 在此法中， 载气（ 种色谱分析法 。 在此法中 ， 载气 （ 不与被 测物作用， 用来载送试样的惰性气体 ， 如 测物作用 ， 用来载送试样的惰性气体， 氢气、 氮气等） 氢气 、 氮气等 ） 载着欲分离的试样通过色 谱柱中的固定相， 使试样中各组分分离， 谱柱中的固定相 ， 使试样中各组分分离 ， 然后分别检测。 检测器信号由记录仪记录， 然后分别检测 。 检测器信号由记录仪记录 ， 得到“色谱图” 得到“色谱图”。
5. 温度控制系统
温度是色谱分离条件的重要选择参数； 温度是色谱分离条件的重要选择参数； 气化室、分离室、 气化室、分离室、检测器三部分在色谱仪操作时均需控 制温度； 制温度； 气化室：保证液体试样瞬间气化； 气化室：保证液体试样瞬间气化； 检测器：保证被分离后的组分通过时不在此冷凝； 检测器：保证被分离后的组分通过时不在此冷凝； 分离室： 分离室：准确控制分 离需要的温度。 离需要的温度。当试样 复杂时， 复杂时，分离室温度需 要按一定程序控制温度 变化， 变化，各组分在最佳温 度下分离. 度下分离
一、气相色谱法的特点 ①高效能
可以分析沸点十分相近的组分和极为复杂的多组分混合物
②高选择性 ③高灵敏度 ④分析速度快
可分离同系物、同分异构化合物。 可分离同系物、同分异构化合物。 可以检测出10 可以检测出10-11g～10-13g物质
一般分析可在几分到几十分内可以完成，某些快速分析1s内 一般分析可在几分到几十分内可以完成，某些快速分析1 可以分析数个组分。 可以分析数个组分。