芦丁的提取与定性反应
槲皮素
芦丁
芦丁十乙酰化物
碱-酸法提取芦丁
（二）实验方法
概述
芦丁（rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含 芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和 蒲公英中均含有。尤其以槐花米和荞麦中含量最高， 可作为大量提取芦丁的原料。槐花米为豆科槐属植物 槐树的花蕾，自古用作止血药物；治疗吐血，痔疮便 血、子宫出血、鼻血等症，所含主要成分为芦丁，又 称芸香苷、维生素P，其含量高达12～16%，有调节 毛细血管渗透性之作用，临床用作毛细血管止血药， 如复方芦丁，也作为高血压的辅助治疗药物。多口 服，也有注射用。
4. pH过低会使芦丁形成“洋”盐重新溶解，降低收率 （最佳pH值为5）。
5. 利用芦丁在冷热水中的溶解度差别来达到重结晶的 目的。得到的沉淀要粗略称一下，按照芦丁在热水 中1：200的溶解度加蒸馏水进行重结晶。
碱-酸法提取芦丁
（六）思考题
① 苷类化合物结构的检识大体程序如何？ ② 苷类水解有几种催化方法？ ③ 怎样确定芦丁结构中糖基是连接在槲皮素3-O-
二、天然药物化学实验室须知
在天然药物化学实验中，所用的药品多数是挥 发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、甚至爆炸 性药品，试验操作又常在加热等情况下进行，需要 各种热源、电器或其他仪器，操作不慎易造成火灾、 爆炸、中毒、触电等事故。但只要加强爱护国家财 产和保障人民生命安全的责任心，提高警惕，消除 隐患，注意实验规则，事故是可以避免的。
碱-酸法提取芦丁
B. 糖的鉴定（参照实验指导进行） 取上述水解母液10ml小心用Ba(OH)2(大研碎、
约1-1.5g，并预先用10ml水调至成乳液)中和至中 性，过滤生成的BaSO4沉淀，滤液用热水浴小心浓 缩至小体积1ml备用。将样品、葡萄糖、鼠李糖标 品点在同一滤纸上，并以正丁醇-醋酸-水（4:1:5） 上层展开。苯胺-邻苯二甲酸试剂喷撒105 oC下加热 显色，记录结果，有时会有芸香糖的斑点。
A. 盐酸-镁粉反应 B. ZrOCl2/柠檬酸反应 C. Molish反应 （2）薄层硅胶板的制备
碱-酸法提取芦丁
下次实验内容
A. 芦丁的水解 B. 糖的鉴定 C. 苷、苷元的鉴定 D. 芦丁的乙酰化物的制备 E. 芦丁、乙酰化物及苷元的薄
层色谱鉴定
运 用所学的理论知识和多项实验技能，完成预定的实 验内容，分析解决实验遇到的各种实际问题。实验 的主要目的是：通过试验，检验理论知识；使同学 们对理性知识的理解更加深入，掌握得更加牢固； 通过试验，训练同学们的基本操作技能，培养同学 们分析问题和解决问题的能力，使同学们获得从事 天然药物化学科研工作的基本训练。实验中，重点
反应液
抽滤，干燥
反应物
碱-酸法提取芦丁
（五）注意事项
1. 芦丁粉碎不可过细，以免过滤时速度过慢。
2. 硼砂因能与芦丁结合，既保护领二酚羟基不被氧化 破坏，又能调节碱水溶液的pH，实验证明提取时加 入硼砂，产品较好。
3. 加入石灰乳即可以达到碱溶提取芦丁的目的，还可 以除去槐花米中含有的大量多糖类黏液质和酸性树 脂。pH值不能过高否则钙能与芦丁形成螯合物而沉 淀析出，pH值不能过高和长时间煮沸，因母核破坏 导致芦丁的降解。
(1) 蒸馏或回流加热时，发现未放沸石，未等溶液冷 却就补加沸石，结果溶液冲出瓶外于是引起火灾。
(2) 蒸馏易燃物时，忘记通冷凝水，大量蒸汽逸出亦 易引起火灾。
(3) 蒸馏易燃物时塞子漏气引起火灾。 (4) 用三角烧瓶作减压装置结果炸裂。 (5) 实验室水槽易发生用抹布和碎拖布条堵塞而造成
水灾。
三、实验报告总体要求
碱-酸法提取芦丁
C. 苷、苷元的鉴定 用硅胶薄层谱与对照品(芦丁、槲皮素)对照。
展开剂：正丁醇：醋酸：水=4：1：5，显色剂： 1%三氯化铁水溶液-1%铁氰化钾水溶液（临用时 等体积混合）。
碱-酸法提取芦丁
D. 芦丁的全乙酰化
芦丁 0.1g
加入2ml无水吡啶 加入8ml醋酐
防水
反应液
电热套回流30min，放冷，搅拌下将反 应液倒入70ml水中，一直搅拌到油滴 消失，白色沉淀析出为止
前言
实验要求同学们掌握以下技能
1. 提取分离方面 掌握常用方法的原理及操作，包括液-固提取
（浸渍、渗漉、回流等）、液-液萃取（简单萃取、 梯度萃取等）、重结晶等。掌握纸色谱、薄层色谱 的原理和基本操作。 2. 化学方法鉴定方面
①掌握定性反应在鉴定中的用。 ②掌握重要衍生物的制备方法及其应用。 3. 光谱方法 主要了解UV、IR、MS、NMR在天然药物化 学成分结构测定中的应用。
碱-酸法提取芦丁
芦丁是由槲皮素（quercetin）3位上的羟基与 芸香糖（rutinose）为葡萄糖（glucose）、鼠李糖 （rhamnose）组成的双糖脱水而成的苷。
碱-酸法提取芦丁
芦丁为浅黄色粉末或针状结晶，含有三分子的结 晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。溶解度： 冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙 醇1:60。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、 氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
程进行。 3. 不可将易挥发、易燃性有机溶剂倒入水槽或废液
缸内。 4. 烘箱内不能烘盛有易燃性溶剂的物品。 5. 消防器材（石棉布、灭火器等）应放在方便、固
定的地点，不能随意移动，处于备用状态。 沉着冷静积极扑救，切断室内电源、火源，使
用石棉布或二氧化碳灭火器进行灭火。
实验室须知
（三）实验室常发事故
8. 独立的完成报告，字体工整、整洁。
四、碱-酸法提取芦丁
（一）实验目的和要求 1. 实验目的 1）通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类 化合物的原理及操作。 2）通过芦丁结构的检识，了解苷类结构研究的一 般程序和方法。 2. 实验要求 1）要获得三个化合物：芦丁、槲皮素、芦丁的全乙 酰化合物。 2）能够根据化学实验推断出芦丁的结构片段。并对 黄酮化合物的结构测定有一般性的了解。
3. 对于药品仪器必须节约爱护使用，公用物品，用完 后立即放回原处。不可调错瓶塞，以免污染，仪器 要洗刷干净。
Байду номын сангаас
实验室须知
4. 操作易燃性有机溶剂时，不能明火直接加热。加液 时应停火或远离火源，冷凝水要通畅。打开易挥发 溶剂瓶盖时，面部要避开瓶口慢慢打开，以防气体 冲到脸上。有毒、腐蚀药品应妥善取用，操作后要 立即洗手，不要粘到五官和创口，以免中毒。有毒、 腐蚀性气体应在通风橱中取用，必要时可戴好防护 用具进行工作。
提取芦丁的方法有很多，目前我国多采用碱提-酸 沉的方法，其原理是：因芦丁的结构中含有酚羟基， 与碱成盐后溶于水中，向该盐溶液中加入酸，调节溶 液的pH值，芦丁又重新析出，从而获得粗制芦丁。
碱-酸法提取芦丁
（三）实验流程图
碱-酸法提取芦丁
（四）操作步骤
1. 芦丁的提取（见上页流程图） 2. 芦丁的鉴定 （1）芦丁的定性反应
天然药物化学实验
主讲：张茂生
药学院药物化学教研室 2010.12
内容提要
一、前言 二、天然药物化学实验室须知 三、实验报告总体要求 四、碱-酸法提取芦丁
一、前言
天然药物化学实验是整个天然药物化学学科的 重要组成部分。该实验属综合型实验，实验过程强 调一个“活”字，同学们应在老师的指导下，综合
5. 实验台上不放无用的药品、仪器，在实验时要做到 水槽、仪器、桌面、地上清洁整齐。
6. 试验结束时，将实验原始记录交与指导老师检查、 签字。将实验室打扫干净、整理仪器，关好门、窗、 水、电方可离去。
实验室须知
（二）安全防火须知
1. 存放易燃性有机溶剂时要远离火源。 2. 在进行易燃性有机溶剂实验时，一定要按操作规
上？ ④ 怎样证明芦丁分子中只含有一个葡萄糖基一个
鼠李糖？ ⑤ 苷元的结构是怎样确定的？ ⑥ 怎样确定苷键的构型？ ⑦ 芦丁的全乙酰化物的制备与苷元（槲皮素）乙 酰化物的制备有何不同？为什么？
碱-酸法提取芦丁
本次实验内容
1. 仪器的认领清洗 2. 芦丁的提取、精制 3. 芦丁的鉴定 （1）芦丁的定性反应
取芦丁3~4mg，加乙醇5~6ml使其溶解， 分成三份作下述试验：
A. 盐酸-镁粉反应 B. ZrOCl2/柠檬酸反应 C. Molish反应
碱-酸法提取芦丁
（2）芦丁的水解、乙酰化及糖与苷元的鉴定 A. 水解方法 精密称取芦丁1g（±0.01g），加1%硫酸
100ml，加热40min，放冷静置，过滤。所得沉淀用少 许水洗除酸，干燥称重，计算苷元与糖的重量比。然 后用乙醇（95%大约10ml）进行重结晶，即得苷元。
1. 实验目的要明确，且比较全面。 2. 实验原理要精练，且能准确反映实验设计的理论
基础，以及计算结果所需的理论依据。 3. 实验步骤要按实际操作来写，且简明（尽量用化
学符号），能反映实验的全过程，达到通过看实 验报告就能完成实验的要求，例如：用流程图表 示。 4. 对于重要的实验装置，要求用直尺和铅笔绘图。 5. 实验数据记录要客观和准确，体现出实验数据的 原始性、真实性。
实验室须知
（一）实验规则
1. 在实验前，必须仔细阅读实验教材进行预习，了解 实验原理、操作规程，并写出预习报告，对于设计 性实验要求提出自己的设计方案。
2. 试验前应清点并检查仪器是否完整，装置是否正确， 合格后再进行试验。试验时不准做与实验无关的事 情，严禁吸烟，不得擅自离开实验室。随时注意记 录实验应记的项目，以便作正式报告，对于异常现 象应及时报告老师。
报告总体要求
6. 按实验要求进行数据处理；对天然药物化学成分的 性质实验，要求对实验中观察到的现象进行合理解 释。
7. 实验讨论要求从以下几方面进行： 1）分析实验所得结果与理论结果之间的关系， 并对自己的实验结果进行评价； 2）对可能影响实验结果的原因进行分析讨论； 3）总结实验的感受及对理论学习的理解和帮助； 4）对现有的实验方案提出合理的改进建议等。