1、来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的一
种酶。能将外来的DNA切断，由于这种 切割作用是在DNA分子内部进行的，故 名限制性核酸内切酶。
2、种类：约4000种。
3、作用：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸
序列，并且使每一条链中特定部位的两 个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
4、结果：形成两种末端 黏性末端
资料分析
位于费城托马斯· 杰斐逊大学的希拉 里和她的同事成功地将人体狂犬病抗体 的DNA译码移入烟草作物中。
转基因烟草作物可以产生一种人体 蛋白质，而这种物质能抗击致命性的狂 犬病病毒。
• 此转基因实验实现了哪种生物的哪些 性状在另外哪种生物中表达？
• 性状的表达与我们从前学过的什么过 程有关？
• 要实现药物基因在烟草中的表什么叫基因工程？
基因工程又叫基因拼接技术或DNA 重组技术。该技术是在生物体外，通过对 DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”， 对生物的基因进行改造和重新组合，然后 导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基 因在受体细胞内表达，产生出人类所需要 的基因产物。
二、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶
➢作为载体没有切割位点将怎样？ ➢目的基因是否进入受体细胞，你如何察
觉？ ➢如果载体对受体细胞有害将怎样？
• 作为运载体必须具备哪些条件？
1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2.具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 3.具有某些标记基因，便于进行筛选。
如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应 的基因等。
开时，切开的DNA两条单链的切口，是平
整的，这样的切口叫平末端。
切断的DNA片段要与受体细胞的 DNA连接，你觉得可以用什么酶？
三、基因的针线──DNA连接酶
DNA聚合酶和DNA连接酶有何 相同点和不同点？
限制酶切割后有两种不同的结果， 一种产生黏性末端，一种产生平末端。 那么恢复它们的连接时，所用DNA连 接酶是否可以不加选择？
平末端
限制酶切割DNA后形 成的末端——黏性末端、 平末端是如何形成的？
重播
• 什么叫黏性末端？
当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切 开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切 口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正 好互补配对，这样的切口叫黏性末端。
什么叫平末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切
基因的运输工具——运载体
有标记基因的存 在，将来可用含 青霉素的培养基 鉴别。
有切割位点
能复制并带着插 入的目的基因一 起复制
• 大肠杆菌的质粒：
最常用的质粒是大肠 杆菌的质粒，其中常 含有抗药基因，如四 环素的标记基因。质 粒的存在与否对宿主 细胞生存没有决定性 作用，但复制只能在 宿主细胞内成。
质粒的特点
1. 细胞染色体（或拟核DNA分子）外能自主复制 的小型环状DNA分子；
2. 质粒的存在对宿主细胞无影响；
.质粒的复制只能在宿主细胞内完成。
E.coliDNA连接酶：连接黏性末端
T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端
四、基因进入受体细胞的载体
要让一个从甲生物细胞内取出来 的基因在乙生物体内进行表达，首 先得将这个基因送到乙生物的细胞 内去！能将外源基因送入细胞的工 具就是载体。
基因进入受体细胞的载体
➢假如目的基因导入受体细胞后不能复制 将怎样？