根据载体的不同可将间接凝集反应分为： 间接血细胞凝集试验、间接乳胶凝集试验（及 间接乳胶凝集抑制试验）和金黄色葡萄球菌协 同凝集试验等。
免疫学实验
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间接凝集抑制试验——妊娠试验
【实验原理】
可溶性抗原致敏的乳胶颗粒与相应抗体作用可 使乳胶颗粒凝集，此为间接乳胶凝集试验。若使抗 体先与可溶性抗原作用，再加入该抗原致敏的乳胶 颗粒，则乳胶凝集被抑制，此为间接乳胶凝集抑制 试验。
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【实验思考】
1、在吞噬细胞中发现细菌时， 如何区别吞噬的细菌和粘附在吞噬 细胞表面的细菌？
2、简述机体非特异性免疫的概 念及特点。
免疫学实验
7
凝集反应
【实验目的】 1．了解凝集反应的原理、基本类型及其
临床意义。 2．掌握玻片凝集实验、间接凝集实验的
实验方法和结果分析。
免疫学实验
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【概述】
在一定浓度的电解质溶液中，颗粒性抗 原与相应抗体结合后，出现肉眼可见的凝集 块，称为凝集反应。凝集反应是一种定性的 检测方法，也可以进行半定量检测。凝集反 应可分为直接凝集反应和间接凝集反应。由 于凝集反应方法简便，目前在临床检验中仍 被广泛应用。
免疫学实验
3
【实验材料】
1.表皮（白色）葡萄球菌菌液（浓度 6~10亿/ml)。
2.肝素溶液（25U/ml）；甲醇，碱性 美蓝（或瑞氏）染液。
3.血红蛋白吸管，凹玻片，载玻片， 采血针，微量加样器，湿盒，显微镜，恒 温培养箱，75%酒精，棉签，香柏油，二甲 苯等。
免疫学实验
4
【实验方法】
1、用微量加样器，吸取肝素20ul加入洁净凹玻片 凹孔内。
A型
A
抗B
B型
B
抗A
AB型
A、B
—、—O型—、—来自抗A、抗B免疫学实验
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【实验材料】
1．ABO血型鉴定试剂盒 内含抗A 分型试剂和抗B分型试剂各1支。
2．一次性采血针1枚、洁净玻片2 块、75％酒精、灭菌棉签。
3．84消毒液
免疫学实验
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【实验方法】
1．取洁净载玻片1块，并标记（如图）
2．将抗A、B分型试剂分别加 A
（抗HCG）、乳胶抗原（HCG致敏） 各一支 2．待检尿、孕妇尿、正常尿。 3．有格玻片和毛细吸管等。
免疫学实验
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【实验方法】
1．在玻片的第1、第2和第3格内分别 加1滴正常尿、待检尿及孕妇尿。
2．每格内加入妊娠诊断试剂抗血清1 滴。轻轻摇动1~2 min使其充分混匀。
3．每格加入乳胶抗原1滴，轻轻摇动 玻片3~5 min后观察结果，记录各标本有无 凝集现象。
免疫学实验
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【实验结果】 记录受检者红细胞凝集情况，根
据ABO血型鉴定表(下表)，判断受检 者的血型。
ABO血型鉴定表
抗A分型试剂侧 抗B分型试剂侧
血型
+
—
A
—
+
B
+
+
AB
—
—
O
“＋”表示红细胞凝集，“－”表示红细胞未凝集
免疫学实验
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二、间接凝集反应
将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小 的颗粒性载体表面（这种载体与免疫无关）， 然后与相应抗体或抗原结合，在适量的电解质 存在下，出现特异性凝集现象，称为间接凝集 反应。
免疫学实验课件
免疫学实验室
免疫学实验
1
中性粒细胞的吞噬作用
【实验目的】 1.熟悉中性粒细胞吞噬实验
的原理和方法。 2.通过本实验理解机体的非
特异性免疫机制。
免疫学实验
2
【实验原理】
中性粒细胞具有吞噬杀菌功 能，当与颗粒性物质（如葡萄球 菌等）混合孵育一定时间后，颗 粒性物质被吞噬杀灭，根据吞噬 率、吞噬指数可反映该细胞的吞 噬功能。
免疫学实验
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【实验结果】
孕妇尿格呈均匀浑浊乳状液，无凝集， 妊娠试验阳性；正常尿格出现白色细小凝集 物，随时间延长凝集物变成小块状，妊娠试 验阴性。待检尿若为乳状液，妊娠试验阳性； 若出现凝集，则妊娠试验阴性。
免疫学实验
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一、直接凝集反应
细菌、细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参与 下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为直接凝集 反应 。常用的凝集试验有玻片法和试管法两种。
玻片凝集试验——ABO血型鉴定
玻片凝集试验为定性试验，一般用已知抗体作 为诊断血清，与受检颗粒抗原，如菌液或红细胞抗 原各加一滴在玻片上，混匀，数分钟后即可用肉眼 观察凝集结果，出现凝集颗粒的为阳性。此法简便， 快速，适用于从病人标本中分离得到的菌种的诊断 或分型，也可用于红细胞ABO血型的鉴定。
孕妇尿中绒毛膜促性腺激素（HCG）含量明显增 高。HCG与抗HCG抗体先作用后，再加入HCG致敏的乳 胶颗粒，不出现凝集反应，此为妊娠试验阳性；非 孕妇尿中HCG含量不足以消耗掉抗HCG抗体，抗体与 后加入的HCG致敏乳胶结合呈现凝集现象，则妊娠试 验阴性。
免疫学实验
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【实验材料】 1．妊娠诊断试剂盒：内含抗血清
6、滴加甲醇固定3min，水洗。 7、加碱性美蓝染色1~2min，水洗，印干。 8、置油镜下观察吞噬和未吞噬的白细胞并计数。
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【实验结果】
吞噬百分 吞 观 率噬 察细 记菌 录的 的中 吞性 噬 数 数粒 细 10细 胞% 0胞 总
吞噬指数
被吞噬的细菌总数 观察记录的吞噬细胞 数总
免疫学实验
1滴于标记有A、B的玻片两侧。
抗 A
B
抗
B
3．用酒精棉签消毒被检者手指尖端，以
采血针刺破皮肤，稍加挤压，使血液流出。
用另一载玻片一端取适量血液加入抗抗A分型
试剂，并混匀；用另一端再取适量血液加入
抗抗B分型试剂，并混匀。用干棉签止血。
4．观察红细胞有无凝集发生。如有凝集， 可见红细胞凝集成块；无凝集，红细胞呈均 匀分散。判定结果后把玻片放入消毒液中。
2、用酒精棉签消毒手指后，刺破皮肤，以血红蛋 白吸管取血40ul，立即放入盛有肝素的凹玻片凹孔内， 并充分混匀。
3、用微量加样器取葡萄球菌菌液20ul加入上述凹 玻片凹孔内，充分混匀。
4、将凹玻片置于湿盒内，30℃温箱中30min，其间 每隔10min摇匀一次。
5、取一小滴上述混合液，置于载玻片上，用另一 载玻片推成薄血片，待干。
免疫学实验
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【实验原理】
人类ABO血型抗原主要有A和B两种，根 据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分 为四种。据此，将抗A和抗B抗体分别与待测 红细胞混合，抗A或（和）抗B抗体与红细胞 表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集， 据其凝集情况便可判定出受试者的血型。
ABO血型的划分
红细胞表面Ag
血清中Ab