血清尿素UREA测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理
在下述反应中，NAD+生成速率与样本中尿素（尿素氮）的浓度成正比。

通过在340 nm处测定固定时间间隔内吸光度的下降速率，即可测得样本中尿素（尿素氮）的浓度。

尿素酶
尿素 + 2H2O 2 NH4＋ + 2 HCO3－
谷氨酸脱氢酶
NH4＋+α-酮戊二酸+NADH+H+ L-谷氨酸+NAD＋+H2O
3 标本：
3.1 病人准备：血清无特殊要求。

要留取24小时尿样。

3.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。

无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子
的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。

用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。

3.3标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。

尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。

4 实验材料
4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司UREA试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成
试剂1（R1）：α-酮戊二
酸
7.5mmol/
L
谷氨酸脱氢
酶
＞800U/L
NADH 0.35mmol
/L
二磷酸腺苷 1.5mmol/L Tris缓冲液
115mmol/L
试剂2（R2）：
Tris缓冲液115mmol/
L
尿素酶＞40000 U/L α-酮戊二酸7mmol/L
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含有防腐剂叠氮化钠，可能存在一定的刺激作用，请勿直接接触皮肤、眼睛。

一旦接触，即用大量清水冲洗。

请勿吞服。

4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的UREA校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法：以UREA复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L 报告。

9 参考值范围
成人2.5-6.4 mmol/L（注：各实验室应有自己的参考范围。

）
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

我室参考值2.5-6.6 mmol/L
10 临床意义
尿素是蛋白质分解代谢的含氮终产物。

高尿素血症或氮血症表现为血液中尿素水平升高。

鉴别肾前和肾后氮血症时可以同时检测尿素和肌酐。

因脱水、蛋白质代谢增加、皮质醇治疗或肾脏灌注减少等引起的肾前氮血症，表现为尿素水平升高而肌酐水平正常。

由泌尿管道阻塞引起的肾后氮血症，表现为尿素和肌酐水平都升高，但肌酐升高程度较小。

发生肾病时，肾小球滤过作用明显下降或蛋白质摄入量大于200 g/天都会导致尿素浓度升高。

尿素氮的检测用于诊断和治疗某些肾脏疾病和代谢紊乱。

尿素氮大约占血液中非蛋白氮的75%。

它通过肝脏中的氨进行合成，是蛋白质脱氨作用的产物。

通过肾小球从血液中过滤尿素到尿中，是消除体内多余氮的主要方法。

血液尿素氮（BUN）水平是肾功能以及肾前状态和肾后状态的度量标准，肾前因素引起的BUN的升高包括心脏代偿失调，缺水或增加的蛋白质分解代谢。

水平增加的肾脏因素有急性肾小球肾炎，慢性肾炎，多囊肾，肾纤维化和肾小管坏死。

任何类型的泌尿道的梗塞受阻是BUN水平升高的肾后因素1。

肾小球清除尿素和肌酸酐，但是，尿素随后部分地被肾小管重吸收，然而肌酸酐却不会。

因此，血清尿素氮和血清肌酸酐测定经常同时用于肾功能的不同诊断中。

11 操作性能
11.1试剂空白：
a)试剂空白吸光度：应不小于1.65
b)试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）：应不大于0.001。

11.2分析灵敏度：1.00mmol/L样本的吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.011。

11.3线性范围：试剂（盒）线性范围应覆盖[0～40]mmol/L。

a) 线性相关系数（r）应不小于0.990；b) [0～10] mmol/L 范围内的绝对偏差应不超过±2mmol/L；[11～40]mmol/L范围内的相对偏差应不超过±10％。

11.4准确度：相对偏差（B）应不大于±10%。

11.5精密度：(1)重复性：变异系数（CV）应不大于5%；(2)批间差：相对极差（R）应不大于5%。

12 超出范围结果处理
本法线性上限血清/血浆为40mmol/L、尿液为5mol/L。

如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%的氯化钠溶液作1:4稀释，重新测定，结果乘以5。

13 病危报警值的处理
当尿素氮测定值>30mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。

14 方法局限性
14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。

14.2在样本加入后的30秒钟前或120秒钟后读取吸ΔA/min 所测定的结果均不准确。

14.3有关可能干扰本测定的药物或物质，请参阅参考文献16.3。

14.4试剂启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定14天。

若试剂混浊，或以水为空白在波长340nm处的吸光度值低于1.0A，则不能使用。

15 补救措施
当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。

16 参考文献
16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编·全国临床检验操作规程·中华人民共和国卫生部医政司编·(第四版)
16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版。

16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版
16.4试剂说明书。