脂质体技术
脂质体电镜图
• 脂质体
• 脂质体（liposome）：是一种类似生物膜结构的双分子层 微小囊泡。脂质体可用于转基因，或制备的药物，利用脂 质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部 。
• 脂质体的分类
• 1.脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同，分为单 室脂质体和多室脂质体。 • 小单室脂质体(SUV)：粒径约0.02～0.08um；大单室脂质 体 (LUV）为单层大泡囊，粒径在0.1～lum。 • 多层双分子层的泡囊称为多室脂质体 (MIV)，粒径在1～ 5um之间。 • 2.按照结构分：单室脂质体，多室脂质体，多囊脂质体 • 3.按照电荷分：中性脂质体，负电荷脂质体，正电荷脂质 体
胆固醇结构
脂质体的作用特点
• 1.脂质体的靶向性 • （1）被动（天然）靶向性：
• （2）物理和化学靶向性：
• （3）主动靶向性：
• 2.脂质体的长效作用（缓释性）
• 3.脂质体降低药物毒性 • 4.脂质体能保护被包封的药物，提高药物稳定性
• 5.脂质体的细胞亲和性与组织相容性
• 脂质体的性质：
速离心法、微型柱离心法和透析法等。
• 药物包封率的测定精密量取配置好的阿霉素脂质体样品, 加人有0.Zu m 的离心管, 低温超速离心3 0 m in, 取滤液测定吸光度, 计算游离阿霉
• 自1965年，脂质体发现以来，至今已有十个脂质体产品上 市（主要是抗肿瘤药物和抗菌药物），其中六个脂质体制 剂是静脉给药。将这些药物制成脂质体后，最显著的特点 是提高药物的治疗指数，降低药物的毒副作用。价格也菲 然（如阿霉素脂质体注射剂，约8000元/支)
阿霉素脂质体注射剂
• 阿霉素脂质体注射液制剂研究 抗肿瘤和抗感染药物被包裹在脂质体中可以在某种程度上提高药物 靶向性, 并大幅度地降低药物的毒副作用, 从而提高治疗指数。脂质体 包裹的阿霉素可明显地降低心脏毒性和皮肤毒性, 试验动物的存活率 比游离药物对照组高。
10 mg/kgDOX
生理盐水
i.p
i.p
20.6±4.6
12.2±1.9
62.8
0
药物包封率的测定
• 包封率又称包裹率，包括重量包封率（Qw）、体积包封率（Qv）、药 脂包封比（Ew）。 • 包封率的测定方法有直接对制剂进行测定和分离出脂质体测定，常用 的分离方法有：葡聚糖凝胶过滤法（分子筛法）、超滤膜过滤法、超
•
脂 质 体
搅 拌
磷 酸 缓 冲 液
薄膜分散法示意 图
• 脂质体技术的重要设备
• 挤压模滤器：滤膜常用聚碳酸脂膜，孔径一般为0.03-0.1µm，可根据需要加以选用。该设备广泛用于脂质体和 亚微乳等制剂的研究和生产中。 • 高压匀质机：是现代广泛使用的制备脂质体等纳米制剂的 设备，由微型空压机，匀质阀，温控系统等组成。
• 磷脂类：卵磷脂、大豆磷脂、脑磷脂、合成磷脂如磷脂酰 乙醇胺（PE）、合成二棕榈酰-DL-α磷脂酰胆碱 （Synthetic dipalmitoyl-DLα-phosphatidyl choline 简称DPPC）、合成磷脂酰丝氨酸（Phosphatidyl Serine, PS）、磷脂酰肌醇（Phosphatidyl inostiols简称PI）等 • 胆固醇类：胆固醇、胆固醇乙酰脂、β- 谷甾醇、牛胆质体的结构图
脂质体的研究热点
亲水性侧链具有空间稳 定和长循环作用 磷脂
包封的药物
嫁接的配体具有主动 靶向功能
同时具有主动靶向和立体稳定的脂质体
• 脂质体的组成和结构：
• 脂质体系由磷脂为膜材及附加剂（如胆固醇）组成。 • 磷脂为两性物质，其结构上有亲水及亲油基团。
• 膜材：
布及对靶细胞作用影响较大。
• 药物脂质体化的方法：
• • • • • • • 薄膜分散法 注入法 超生分散法 逆向蒸发法 冷冻干燥法 冻结溶解法 主动包封法
薄膜分散法
• 将磷脂等膜材溶于适量的氯仿中或其它有机溶剂中，然后减压蒸发旋转除去 有机溶剂，使脂质在器壁形成薄膜，加入缓冲液，进行振摇，即得。脂溶性 的药物加入到有机溶剂中与磷脂一起蒸发。水溶性药物则溶于缓冲液中 通常，薄膜分散法形成的是大多室脂质体，粒径较大，在1～5μ m，且分布 不均匀，因此需要进一步通过其它技术以得到粒径大小均匀的大单室脂质体。 这些技术有干膜超声法、薄膜－振荡分散法、薄膜－均化法、薄膜挤压法 磷脂、 胆固醇、药 物(脂溶性) 氯仿、乙醚 旋转蒸发 形 成 薄 膜
药物
15 mg/kgDONP I 10 mg/kgDONP 5 mg/kgDONP
给药途径
I.h I.h I.h I.h
平均瘤量（g）
0.825±0.309 1.598±0.590 2.904±0.625
抑瘤率（%）
83.3 67.7 41.4
10 mg/kgDOX
生理盐水
2.385±0.645
4.951±1.098
• 阿霉素脂质体注射剂对小鼠S- 180 实体瘤的抑制作用：体内给予阿霉 素脂质体注射剂10 mg/ （kg· d），15mg/（kg· d）8 d，对小鼠S180 实体型的抑瘤率分别为67.7%和83.3%，与同样剂量阿霉素注射液组 比较作用更强。
表1 阿霉素脂质体注射剂 对S- 180 实体瘤抑 瘤作用
• 1.相变温度
• 当升高温度时，脂质双分子层中酰基侧链从有序排列变为无序排列， 这种变化会引起脂膜物理性质的一系列变化，可由“胶晶”态变为 “液晶”态，膜的横切面增加，双分子层厚度减小，膜流动性增加， 这种转变时的温度称为相变温度。
• 2.脂质体荷电性
• 含酸性脂质，如磷脂酸（PA）和磷脂酰丝氨酸（PS）等的脂质体荷负 电，含碱基（胺基）脂质，例如十八胺等的脂质体荷正电，不含离子 的脂质体显电中性。脂质体表面电性对其包封率、稳定性、靶器官分
51.8
0
I.h
表2 阿霉素脂质体注射剂对S180 实体瘤模型 的生命延长率
药物
15 mg/kgDONP 10 mg/kgDONP 5 mg/kg DONP
给药途径
i.p i.p i.p
生存天数（d）
28.4±3.4 23.4±5.7 17.4±3.2
生命延长率（%）
132.8 92.8 42.6