②外植体接种。 把消毒好的胡萝卜直根放入无菌培养皿中，用消毒好的 小刀沿截面将其横切成厚度1mm 左右的小圆片，然后 将小圆片的韧皮部和木质部切去，留下形成层，再将形 成层切成大约长5mm、宽5mm、高1mm 的小长块。具 体操作方法:把消毒好的胡萝卜直根放于无菌培养皿中， 用小刀将其切成2 ～ 3cm 的小段，用灭过菌的打孔器沿 着形成层穿入胡萝卜中，取得一段含有形成层的2 ～ 3cm 的圆柱体，然后用无菌解剖刀片将其切成厚1mm 的小薄片，将切好的胡萝卜外植体接种在MS + 2mg /L 2，4 － D +1. 5mg /L KT 的固体培养基上( 如图1 b) ， 放于黑暗处25℃条件下进行暗培养，50d 后长出淡黄色 愈伤。
组织培养实验室模式布局
三、实验步骤ຫໍສະໝຸດ (1) 胡萝卜愈伤组织的诱导 ①外植体消毒。用清水洗干净胡萝卜直根， 用小刀给其削去表皮，并切成小段放入烧 杯中。先用70% 酒精对胡萝卜直根消毒 5min，用无菌吸水纸吸干，再用10% 的次 氯酸钠溶液消毒10min，放入无菌水中漂洗 2 ～ 3 次，用无菌吸水纸吸干待用。
(2) 胡萝卜愈伤组织悬浮 体系的建立 用镊子夹取在固体培养 基上的胚性愈伤组织即 分散性好、疏松的愈伤 用解剖刀切碎，接种在 MS+ 0. 3mg /L 2，4 － D + 3%蔗糖的液体培 养基( pH5. 8 ) 中，每 100mL 的三角瓶中加 入MS 液体培养基50mL， 摇床转速为110r / min， 温度为25℃，黑暗培 养3 ～ 5d。

(3) 胡萝卜愈伤分化 将胡萝卜悬浮细胞 和愈伤转接在不添 加激素的MS 固体培 养基中，25℃条件 下光培养。30d 左右 愈伤长出胚状体， 40d 后长出小绿芽， 接着生根长出绿叶 片。



(4) 再生苗的生 根及移栽 将没有生根的 再生苗转移至 MS + 0. 2mg /L NAA 生根培养 基中生根壮苗。 待根系发达移 栽至蛭石∶ 草 炭土= 3∶ 1的 基质中培养。
胡萝卜组织培养
一、实验目的
通过把培养出来的胡萝卜的愈伤组织进行 悬浮培养后，再转接到固体培养基上，从 而使得胡萝卜愈伤组织更容易分化出芽来。
植物组织培养的简单过程
二、实验材料与仪器

胡萝卜( 市场购 买)、超净工作台、 光照培养架、高压 蒸汽灭菌锅、恒温 振荡器、打孔器、 小刀、培养皿、解 剖刀、镊子、植物 组培试剂盒。