荧光光谱仪
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荧光光谱仪
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荧光光谱仪
一、荧光光谱仪的工作原理 (一)基本原理
荧光是物质分子吸收光能量被激发后,从 激发态的最低振动能级跃迁返回基态时所发 射出的光,而当光停止照射时,所发射出的 光线也随之很快地消失。
其定量公式为:
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第四节 荧光光谱仪
(二)荧光的激发光谱和荧光光谱 • 固定荧光的发射波长而不断改变激发光(即入射光)的波长,
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(四)检测器 检测器的作用是接受光信号,并将其转变
为电信号,检测器出来的电信号须经过放大 器放大后,再由记录仪记录下来,并可数字 显示和打印。荧光的强度比较弱,因此要求 检测器有较高的灵敏度。
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三、荧光光谱仪的性能指标 • 灵敏度 • 波长范围 • 波长精度 • 分辨率 • 光谱带通 • 响应
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四、荧光光谱仪的使用与常见故障及处理 (一)荧光光谱仪的使用
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打开主机、PC 电源,进入 WINDOWS 界面,启动工作站,连
荧
开机
接主机,待仪器自动进行初始化自检结束后,即可开始工作
光
分
光
参数设置
进入菜单,设置实验所需的参数
光
度
样品装载
将待测样品放入石英比色皿或固体样品架
氙灯
氢灯 钨 灯
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(二)单色器 单色器的作用是将复合光变成单色光,
荧光仪器的单色器分为激收放在与入射光垂直的方向上。
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(三)样品池 样品池是用来盛放测试样品,荧光分析
用的样品池一般用石英制成。样品池的形状 以散射光较少的方形为宜,最常用的厚度为 1cm。
象; ②发射光谱的形状与激发波长无关; ③发射光谱与激发光谱呈镜像关系。
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二、荧光光谱仪的基本结构 荧光光谱仪由光源、单色器、样品池和检
测器组成。
图5-9 荧光分光光度计的基本结构示意图 返回目录
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(一)激光光源 激光光源是用来激发荧光物质分子产生荧
光。常用氙灯、汞灯、氙-汞弧灯、激光器及 闪光灯等。
计
基
本
样品测定
按已设定的参数和程序,按开始键仪器自动完成检测
操
作
结果分析
根据实验所得结果进行分析,产生报告
流
程
关机
退出工作站,关掉 PC 电源和主机电源
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(二)荧光光谱仪常见故障及处理
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第四节 荧光光谱仪
五、荧光光谱仪的临床应用与进展 1.应用 • 生化分析 • 临床检验 2.进展
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并记录相应的荧光强度,所得到的荧光强度对激发波长的谱 图称为荧光的激发光谱,简称激发光谱。 • 使激发光的波长和强度保持不变,不断改变荧光的发射波长 并记录相应的荧光强度,所得到的荧光强度对发射波长的谱 图称为荧光的发射光谱,简称发射光谱。
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荧光光谱仪
• 溶液荧光光谱通常具有如下特征: ①斯托克斯位移,即荧光的发射波长总是大于激发波长的现