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最新干细胞的体外培养

它可以无限增殖并分化成为全身200多种细胞类型,
进一步形成机体的所有组织、器官。为全能干细胞。
成体干细胞
是成体组织内具有自我更新及分化一种或一种 以上子细胞的未成熟细胞。 来源于成年组织或器官,一般具有组织特异性, 只能分化成特定的细胞或组织。为多能干细胞 或单能干细胞,如造血干细胞和上皮干细胞等。
干细胞几个主要特征
具有自我更新能力与自我维持能力,可以无限增 殖分裂。干细胞一旦形成,在机体内终生都具有 自我更新能力,以维持自身数目的恒定。 既具有生理性的更新能力,也具有对损伤或疾病 导致的反应有修复能力,如骨髓间充质干细胞等。
干细胞维持自稳性的机制:对称分裂和不对称分裂
干细胞的对称分裂和不对称分裂
干细胞几个主要特征
干细胞的自我更新与分化需要特定的微环境,也就是说 干细胞往哪一种方向分化,必须在该细胞生存的特定微 环境前提下进行分化。已有诸多的实验表明,如将ES细 胞种植入小鼠大脑内,这些干细胞将向神经系统分化。
在不同生长因子刺 激下干细胞可表现 出不同分化潜能
干细胞几个主要特征
干细胞分裂产生的子细胞只能有两种命运——保持 为干细胞或分化为特定细胞。
干细胞
分化细胞
干细胞
分 化 细 胞
对称分裂 (symmetry division)
不对称分裂 (asymmetry division)
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干细胞几个主要特征
干细胞本身不是终末分化细胞;具有多向分化的能力 (多能性或全能性),即可以分化发育成各种胚层组 织的细胞(ES细胞),或可以分化成为本系统各谱系 的细胞(特定组织干细胞,如造血干细胞)。
干细胞的体外培养
一、干细胞的概念


干细胞 (stem cells, SC) 是一类具有自 我 复 制 能 力 (self-renewing) 的 多 潜 能 细胞,在一定条件下,它可以分化成多 种功能细胞。 干细胞是一种未充分分化,尚不成熟的 细胞,具有再生各种组织器官和人体的 潜在功能,医学界称之为“万用细胞”。




1998年美国有两个小组分别培养出了人的多能干细胞: James A. Thomson在 Wisconsin大学领导的研究小组的 方法是:人卵体外受精后,将胚胎培育到囊胚阶段,提取 inner cell mass细胞,建立细胞株。 John D. Gearhart 在 Johns Hopkins大学领导的另一个研究小组的方法是: 从受精后5-9周人工流产的胚胎中提取生殖母细胞 ( primordial germ cell ),建立细胞株。 1999年12月,美国科学家在《美国科学院院刊》报告说, 小鼠肌肉组织的成体干细胞可以“横向分化”为血液细胞。 随后,世界各国的科学家相继证实,成体干细胞,包括人 类的成体干细胞具有可塑性。 1999年12月,干细胞研究进展被《科学》杂志评选为该 年度世界十大科学进展之首。 2007年日本的Yamanaka研究小组和美国的James Thomson 研究小组分别获得诱导多能性干细胞 (induced pluripotent stem cell,iPS细胞)。
3、根据干细胞组织发生的名称进行分类:
胎胎干细胞 造血干细胞 骨髓间质干细胞 肌肉干细胞 成骨干细胞 内胚层干细胞 视网膜干细胞 胰腺干细胞
三、干细胞研究的历史情况





1959年,美国首次报道了通过体外受精(IVF)动物。 60年代,几个近亲种系的小鼠睾丸畸胎瘤的研究表明其 来源于胚胎生殖细胞(embryonic germ cells, EG细 胞),此工作确立了胚胎癌细胞(embryonic carcinoma cells, EC细胞)是一种干细胞。 1968年,Edwards 和Bavister 在体外获得了第一个人 卵子。 70年代,EC细胞注入小鼠胚泡产生杂合小鼠。培养的EC 细胞作为胚胎发育的模型,虽然其染色体的数目属于异常。 1978年,第一个试管婴儿在英国诞生。
至今已分离得到的胚胎干细胞物种有:



小鼠的胚胎干细胞(1981) 金黄地鼠(1988)、貂(1993)、猪 (1994,1997)、鸡(1996)、恒河猴 (1995)、绒猴(1996)。 分离得到人的胚胎干细胞(1998),胚胎生 殖细胞(1998), 目前不断报道成年组织来源的的干细胞。
二、干细胞的分类
1、按分化潜能大小来分类:
全能干细胞( Totipotent stem cell ):能分化成所有组织
和器官的干细胞,它具有形成完整个体的分化潜能。如受精 卵,胚胎干细胞。 多能干细胞( pluripotent stem cell ),具有分化出多种组 织细胞的潜能,但却失去了发育成完整个体的能力,发育 潜能受到一定的限制。如骨髓多能造血干细胞是典型的例 子,它可分化出至少十二种血细胞 。 专能干细胞( unipotent stem cell ),这类干细胞只能向 一种类型或密切相关的两种类型的细胞分化,如上皮组织 基底层干细胞、肌肉中的成肌细胞等。



1981年,从小鼠胚泡内细胞团分离出小鼠ES细胞, 并建立了小鼠ES细胞体外培养条件。将ES细胞注入小 鼠,能诱导形成畸胎瘤。 1984-1988年,Anderews 等人从人睾丸畸胎瘤细 胞系Tera-2中产生出多能的、可鉴定的(克隆化的) 细胞,称之为胚胎癌细胞(embryonic carcinoma cells, EC细胞)。克隆的人EC细胞在视黄酸的作用下 分化形成神经元样细胞和其他类型的细胞。 1989年,Pera 等分离了一个人EC细胞系,此细胞系 能产生出三个胚层的组织。这些细胞是非整倍体的 (比正常细胞染色体多或少),他们在体外的分化潜 能是有限的。
2、根据来源来分:
来源于胚胎--- 胚胎干细胞 ESC
(Embryonic Stem Cell )
胚胎性生殖细胞 EGC
(Embryonic Germ Cell )
来源于成体组织--- 成体干细胞 ASC (Adult-derive(桑椹胚)或原始 生殖细胞获得的一种具有多潜能性、可发育成 为各种细胞、同时可保持不分化状态而持续生 长的克隆细胞系。
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