清洁验证淋洗法取样回收率验证方案及报告第一部分：方案类别：取样方法验证方案编号：W/ER-1-002-00清洁验证残留物测定淋洗水取样验证方案文件编号：W/ER-1-002-00XXXXXX制药公司验证方案审批表验证组主要成员及其职责目录一、验证概述二、验证目的三、验证过程中使用到的相关文件四、验证范围五、验证时间计划六、合格标准七、残留物测定淋洗水取样方法的验证1. 取样方法的验证原因2. 取样方法的验证方法3. 取样方法的验证过程3.1 对照品溶液的配制3.2 供试品溶液的配制3.3 测试过程与结果记录3.4 结果计算3.5 验证结论八、变更与偏差控制九、再验证计划及周期一、验证概述制药企业生产设备、生产场所、用具等需清洁，清洁后残留物限度经检验应符合要求, 检验残留物的限度有两种方法:一是最终淋洗水取样；二是擦拭取样。
最终淋洗水取样为大面积取样方法，其优点是取样面积大，对于不便拆卸、不宜经常拆卸的设备、大型密闭系统、管道等也能取样。
因此其适用于与擦拭取样不易接触到的表面尤其适用于设备表面平坦、管道多且长的液体制剂的生产设备。
为评价淋洗水取样法的可行性，特制定此验证方案并根据方案对淋洗水取样法的回收率进行验证。
二、验证目的本验证是验证最终淋洗水取样方法，通过对清洗消毒后取样方法的回收率试验，评价淋洗水取样方法的有效性、代表性和科学性，并为证明清洗方法有效性提供基本依据。
三、验证过程中使用到的相关文件1 《药品生产质量管理规范》(2010年修订)2 《药品GMP指南》3 《验证管理制度》（HF-SMP-001-01）4 《清洁验证管理制度》（HF-SMP-005-01）四、验证范围1. 范围：本方案适用于最终淋洗水取样法回收率验证。
2. 选择样品：XXXX颗粒中的XXXX成分。
五、验证时间计划验证计划于年月日起至年月日实施。
1.文件确认检查人：日期：复核人：日期：2.仪器及仪表确认检查人：日期：复核人：日期：六、合格标准回收率≧80%回收率的RSD≦20%七、残留物测定淋洗水取样方法的验证1取样方法的验证原因取样过程需经过验证，通过回收率试验验证取样过程的回收率和重现性。
要求取样回收率不低于80%，体现重现性的多次取样回收率的RSD不大于20%。
(参照李均编著《药品GMP验证教程》“要求包括取样回收率和检验方法回收率在内的综合回收率不低于50%”，本验证方案中仅做取样回收率试验。
) 淋洗水取样过程的验证实际上是对冲洗溶剂的选择，取样人员的操作，残留物转移到最终淋洗水过程的全面考察。
2 验证方法2.1方法：高效液相色谱法。
2.2仪器：高效液相色谱仪。
2.3 活性组分残留量限度的计算我公司直接接触药品的设备表面大部分为不锈钢材质，选取XX-XX多功能提取罐为验证对象，内总表面积为：S=π*d*h=3.14×160cm×580cm=291392cm2。
按有关残留物限量10mg/kg（一般标准），最小生产批量为900kg药材加水煎煮，因残留在容器内壁的物质主要是提取液中的药膏成分，因此以最终收膏量121.5kg计算，允许残留121.5kg×10mg/kg＝1215 mg。
即XX-XX多功能提取罐内总表面积为291392cm2上允许残留1215mg，则400cm2（不锈钢板试验用面积）上允许残留1.67mg 。
3 取样方法的验证过程以XXXX成分为活性物质，按残留物限量配制成一定浓度的溶液,按XXXX颗粒【含量测定】的法定方法，照高效液相色谱法进行测定。
3.1 对照品溶液的制备：精密称取XXXX成分对照品（中检院，批号：） mg（约12.5mg），置于50ml容量瓶中，加适量50%甲醇溶解，摇匀，定容至刻度摇匀，再精密量1ml置于5ml容量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。
每1ml 含µg XXXX成分。
（XXXX 成分浓度约为50µg/ml）3.2 供试品溶液的制备3.2.1 准备一块250mm×250mm的平整光洁不锈钢板3.2.2 在钢板上用钢锥划出200mm×200mm的区域，(400cm2)每隔50mm 划线形成16块50mm×50mm的方块(每块25cm2)3.2.3取XXXX颗粒稠膏（批号： XXXX成分含量：），精密称定（折算后约含XXXX成分1.67mg），加50%甲醇25ml，超声处理15分钟。
3.2.4 将约25ml溶液用吸管尽量均匀滴在200mm×200mm(400cm2)的区域内。
3.2.5 自然干燥或用电吹风温和地吹干不锈钢板。
3.2.6 模拟冲洗过程：在洁净的收集容器（1000ml烧杯）上方悬挂已涂布XXXX 颗粒稠膏物质的不锈钢板试样，然后将100ml水从不锈钢板表面冲过，冲洗液收集在烧杯中，水浴蒸干至约25ml，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得供试品溶液。
同法制备另外5份供试品。
3.3测试过程与结果记录取对照品溶液、供试品溶液照高效液相色谱法检验。
测试结果记录如下：3.4 结果计算选择对照品溶液和供试品溶液的峰面积，计算回收率和回收率的RSD。
校正因子计算：1.67×103≈0.66850×50回收率计算：供试品①峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品②峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品③峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品④峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品⑤峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品⑥峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积平均回收率：回收率的RSD：n ·Σ(xi2) —［Σ(xi)］2n·（n—1）回收率的RSD = ×100% =回收率的平均值x i：各回收率 n：测量数3.5 验证结论：最终淋洗水取样法用于不锈钢材质的设备表面，样品回收率☐大于☐小于80%，RSD ☐大于☐小于20%，证明该取样方法☐可以☐不可以用于生产设备清洁验证的表面取样。
评价人: 日期:八、变更与偏差控制1 如验证过程中出现变更，则按《变更控制标准操作规程》进行处理。
2 如验证过程中出现偏差，则按《偏差处理标准操作规程》进行处理。
3 任何可接受的变更、调查、偏差和采取的措施，均应记录。
九再验证计划及周期1 清洁规程有重要修改。
2 设备形状、材质有重大变更。
3 正常情况下，再验证周期为五年。
第二部分：报告类别：取样方法验证报告编号：W/ER-2-002-00清洁验证残留物测定淋洗水取样方法验证报告文件编号：W/ER-2-002-00XXXXXX制药公司验证报告审批表目录一、验证目的二、验证进度安排三、验证条件确认1 人员培训确认2 文件确认3 仪器仪表确认四、验证方案实施情况五、变更与偏差控制1 变更情况2 偏差控制情况六、再验证计划及周期七、验证证书一、验证目的通过对清洗消毒后淋洗水取样方法的回收率试验，评价该取样方法的有效性、代表性和科学性，为证明清洁方法的有效性提供基本依据。
二、验证进度安排验证小组完全按照已经批准的验证方案，对淋洗水取样方法的取样回收率进行验证。
验证进度安排如下：验证时间：年月日至年月日。
三、验证条件确认1 人员培训确认检查人：日期：复核人：日期：2 文件确认检查人：日期：复核人：日期：3 仪器仪表确认检查人：日期：复核人：日期：四、验证方案实施情况1取样方法的验证原因取样过程需经过验证，通过回收率试验验证取样过程的回收率和重现性。
要求取样回收率不低于80%，体现重现性的多次取样回收率的RSD不大于20%。
(参照李均编著《药品GMP验证教程》“要求包括取样回收率和检验方法回收率在内的综合回收率不低于50%”，本验证方案中仅做取样回收率试验。
) 取样过程的验证实际上是对溶剂的选择，取样人员的操作，残留物转移到最终淋洗水的全面考察。
2 验证方法2.1方法：高效液相色谱法。
2.2仪器：高效液相色谱仪。
2.3 活性组分残留量限度的计算我公司直接接触药品的设备表面大部分为不锈钢材质，选取XX-XX多功能提取罐为验证对象，内总表面积为：S=π*d*h=3.14×160cm×580cm=291392cm2。
按有关残留物限量10mg/kg（一般标准），最小生产批量为900kg药材加水煎煮，因残留在容器内壁的物质主要是提取液中的药膏成分，因此以最终收膏量121.5kg计算，允许残留121.5kg×10mg/kg＝1215 mg。
即XX-XX多功能提取罐内总表面积为291392cm2上允许残留1215mg，则400cm2（不锈钢板试验用面积）上允许残留1.67mg 。
3 取样方法的验证过程以XXXX成分为活性物质，按残留物限量配制成一定浓度的溶液,按XXXX颗粒【含量测定】的法定方法，照高效液相色谱法进行测定。
3.1 对照品溶液的制备：精密称取XXXX成分对照品（中检院，批号：） mg（约12.5mg），置于50ml容量瓶中，加适量50%甲醇溶解，摇匀，定容至刻度摇匀，再精密量1ml置于5ml容量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得。
每1ml 含µg XXXX成分。
（XXXX 成分浓度约为50µg/ml）3.2 供试品溶液的制备3.2.1 准备一块250mm×250mm的平整光洁不锈钢板3.2.2 在钢板上用钢锥划出200mm×200mm的区域，(400cm2)每隔50mm 划线形成16块50mm×50mm的方块(每块25cm2)3.2.3取XXXX颗粒稠膏（批号： XXXX成分含量：），精密称定（折算后约含XXXX成分1.67mg），加50%甲醇25ml，超声处理15分钟。
3.2.4 将约25ml溶液用吸管尽量均匀滴在200mm×200mm(400cm2)的区域内。
3.2.5 自然干燥或用电吹风温和地吹干不锈钢板。
3.2.6 模拟冲洗过程：在洁净的收集容器（1000ml烧杯）上方悬挂已涂布XXXX 颗粒稠膏物质的不锈钢板试样，然后将100ml水从不锈钢板表面冲过，冲洗液收集在烧杯中，水浴蒸干至约25ml，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得供试品溶液。
同法制备另外5份供试品。
3.3测试过程与结果记录取对照品溶液、供试品溶液照高效液相色谱法检验。
测试结果记录如下：3.4 结果计算选择对照品溶液和供试品溶液的峰面积，计算回收率和回收率的RSD。
校正因子计算：1.67×103≈0.66850×50回收率计算：供试品①峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品②峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品③峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品④峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品⑤峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积供试品⑥峰面积×校正因子×100% =对照品峰面积平均回收率：回收率的RSD：n ·Σ(xi2) —［Σ(xi)］2n·（n—1）回收率的RSD = ×100% =回收率的平均值x i：各回收率 n：测量数3.5 验证结论：最终淋洗水取样法用于不锈钢材质的设备表面，样品回收率☐大于☐小于80%，RSD ☐大于☐小于20%，证明该取样方法☐可以☐不可以用于生产设备清洁验证的表面取样。