应提供标准曲线的线性方程和相关系数（要 求色谱法的r0.99，生物学方法r0.98）。
R(标样/内标）
25 20 15 10
5 0
0
5 10 15 20 25 30 C（mg.L-1)
图2. 对乙酰氨基酚血浆标准曲线
• 9.精密度(precision）
• 用 日 内 和 日 间 相 对 标 准 误 差 （ relative
➢3. 灵敏度：最低定量浓度
➢ 注意与检测限相区别 ➢ 根据药物体内药物浓度确定 ➢ 一般为3-5个半衰期或峰浓度的1/10-1/20 ➢ MS(pg) ﹥RF(ng)﹥UV(g)
❖4.选择性
❖ 待测药物及内标色谱峰均要与呈基线分 离
❖ 内源性物质、药物的代谢物、可能的合 并用药及中药中其他组分不干扰分析
❖ 提供对照品、空白生物样品、空白生物 样品加对照品及用药后的生物样品色谱 图
5.萃取回收率
一般要求大于50% 液-液萃取 固相萃取 蛋白沉淀、超滤
➢6.工作曲线及线性关系
➢ 做5个点以上，一般6-7个点 ➢ 最高浓度与最低浓度比值应在50-500之
间 ➢ 浓度宽度应涵盖峰浓度和最低浓度 ➢ 相关系数应大于0.99。
➢ 用相对回收率(recovery）表示。 ➢ 其测定与精密度类似应在标准曲线范围
内选用高、中、低三种浓度，每一浓度 至少测定5个样品。
11．实验设计
取样点的设计应兼顾到吸收相、分布相和消除相. 根据研究样品的特性，取样点通常可安排9～13个点 不等，即吸收相应取2～3个点，达峰浓度处取2～3 点，分布相取2～3点，消除相取3～4个点
纯度、保存条件及配制方法。使用的受 试药物应与药效学或毒理学研究使用的 一致。 对照品应是标明含量的纯品
❖2．实验动物
❖ 一般采用成年和健康的动物。常用动物有小 鼠、大鼠、兔、豚鼠和狗等。
❖ 首选动物：应与药效学或毒理学研究一致。
❖ 尽量在清醒状态下实验，动力学研究最好从同 一动物多次采样。
❖ 创新药应选用两种或两种以上的动物，其中一 种为啮齿类动物；另一种为非啮齿类动物。其 他类型的药物，可选用一种动物（建议首选非 啮齿类动物，如犬或兔等）。
;D-Plasma with oral of Salvia miltiorrhiza extract 1-Danshensu
8.标准曲线（standard curve）
应分别制备药物在不同生物样品（如血、尿、 粪、胆汁和组织匀浆等）中的标准曲线。
每条标准曲线至少包括5个浓度，并应覆盖 整个生物样品的浓度范围，不得外推。
用最低检测浓度或定量限（limit of quantitation , LOQ）,如 g/ml或ng/ml等表示。
它是标准曲线上的最低浓度，要求能测至3～ 5个消除半衰期后或Cmax的1/10～1/20的血药 浓度。
6．提取回收率（绝对回收率）
应考察高、中、低三个浓度的提取回收 率
一般应高于50％。
❖ 口服用药不宜选用兔子等食草类动物。
3．给药途径
所用的给药途径和方式，应尽可能与临床用 药一致。
4．试验剂量
药代动力学研究至少应设三个剂量组，其中 一个剂量应相当于药效学试验有效剂量，高剂 量一般接近于最大耐受量(MTD)，以了解药物 在体内的动力学过程是线性动力学还是非线性 动力学。
5.灵敏度(sensitivity)
7.特异性(specificity )
必须能证明所测的物质为原形药物或活 性代谢物，并能排除内源性物质、其它 代谢物和杂质的干扰。
对于色谱法至少要提供标准品、空白样 品、外加样品和用药后的样品色谱图。
Fig 1 HPLC Chromatograms for plasma Danshensu concentration A-Standard B-Blank plasma；C- Blank plasma with Danshensu
排泄、代谢过程和动态变化过程：体内过程和 速率过程 生物利用度包括绝对生物利用度和相对生物利 用度 生物等效性主要是相对生物利用度的内容
2.稳定性
了解待测药物和内标物在不同pH、光照、 溶剂、温度条件下稳定性
对于中药或多组分制剂，应注意他们的 相互作用
体液中药物的稳定性包括室温、冷藏 （2-8℃）、冻融、冷冻（-20--70℃）
药代动力学与生物利用度
药代动力学与生物利用度
药代动力学研究中的生物样品分析 临床前药代动力学研究 人体生物利用度和生物等效性 常用动力学软件介绍
药代动力学研究中的生物样品分析
1.概念的统一 药代动力学、生物利用度、生物等效性为三个
不同且有互相联系的概念，注意区别使用。 药代动力学内容包括药物在体内的吸收、分布、
❖ 测定心、肝、肾、脾、肺、脑、胃、肠、 子宫或睾丸、脂肪和肌肉等重要组织中的 浓度，以了解药物在体内的主要分布组织， 特别是效应靶器官和毒性靶器官的分布。
• 7.方法精密度与准确度
• 精密度包括日内精密度和日间精密度 • 一般要求应做5个点以上 • 准确度一般用相对回收率表示，应作5个点以
上
• RSD应小于10%，在LOQ附近应小于15% • 生物制品RSD应小于15%，在LOQ附近应小于
20%
临床前药代动力学研究
1．实验药品 应注明受试物的名称、批号、来源、
整个采样时间应持续到3～5个半衰期或到Cmax的 1/10～1/20。
在非连续取样的动物试验中，每个时间点至少应 有5只动物的数据;如经同一动物多次采样，每个时 间点至少应有3只动物的数据。
口服给药，一般在给药前应禁食12小时以上。
特布他林浓度-时间曲线图
❖12．组织分布试验
❖ 一般选用小鼠或大鼠，选定一个有效剂 量给药后，分别在吸收相、分布相和消除 相各选一个时间点取样测定。
standard deivation, RSD%）表示方法精密度。
• 要求在标准曲线范围内选用高（接近上限）、
中、低（接近LOQ）三种浓度，每一浓度至 少测定5个样品，求出各自的RSD（%）。
• 对g/ml级水平的RSD应〈10% ，ng/ml级水
平的RSD可〈15%。
➢10.准确度(accuracy）