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含量测定
• 许多常用中药中都含有挥发油，中草药中 的挥发油一般在1%以下，亦有少数达10%以 上，如丁香中含挥发油可高达14～21%。
• 挥发油中所含成分相当复杂，一种挥发油 常含有几十种到一、二百种成分，但其中 往往以某种或数种成分占较大的量。
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• 含量测定包括总挥发油和单一成分的测定 • 总挥发油测定：
用 而显荧光或呈色）、香草醛-浓硫酸（ 使萜类显不同颜色）、对二甲氨基苯甲醛 （使薁类化合物呈蓝色）
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2、气相色谱法（挥发油容易气化）
①非极性固定液：饱和烃润滑油、甲基硅酮 （SE-30）、三氟丙基甲基硅酮（OV-210 ）
②极性固定液：聚乙二醇类、己二酸酯 ③担体：硅烷化白色硅藻土。担体上不应有
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理化性质
• 常温液态 • 具有特殊气味 • 具有挥发性 • 不溶于水易溶于有机溶剂 • 密度比水小（仅少数比水大，如丁香油、
桂皮油等） • 易氧化变质 • 大多数挥发油具有光学活性
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（一）化学反应法
• 萜类中多有双键，能与溴、氢卤酸等起加 成反应
• 不饱和萜类可被氧化剂（如高锰酸钾、铬 酸等）氧化，生成不同产物
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牡荆油胶丸挥发油含量测定
【含量测定】 取本品100 丸，加醋酸溶液(1→10)500ml，照挥 发油测定法（附录ⅩD）测定，所得油量按相对密度为0.897 计 算，即得。（2005年版《中国药典》一部 473页） 测定法 甲法：本法适用于测定相对密度在1.0以下的挥发油。取 供试品适量(约相当于含挥发油0.5～1.0ml)，称定重量(准确至 0.01g), 置烧瓶中，加水300～500ml（或适量）与玻璃珠数粒， 振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管。自冷凝管上端加 水使充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止。置电 热套中或用其他适宜方法缓缓加热至沸，并保持微沸约5小时,至 测定器中油量不再增加，停止加热,放置片刻,开启测定器下端的活 塞，将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面5mm处为止。 放置1小时以上，再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0线平 齐，读取挥发油量，并计算供试品中挥发油的含量（%）。
气质联用（GC-MS）： 具有测定未知成分相对分子质量、快速定 性和推断分子结构的高鉴别能力，特别适 合做多组分混合物中未知组分的鉴别； 还可修正色谱分析的错误判断，利用多离 子检测技术可以检测出部分分离甚至未分 离的色谱峰，以增加定性鉴别的准确性和 可靠性。
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气-红联用（GC-FTIR）原理与GC-MS相同 ，傅里叶变换红外分光光度法作为气相色 谱的检测器，同样具有分离分析的双重能 力，提高了鉴别的准确性。
采用挥发油测定器，用蒸馏法测定，可分别 测定相对密度在1.0以下和1.0以上的挥发油 含量。（按药典附录方法） • 单一成分测定： 首选气相色谱法 其次 HPLC，TLCS,GC-MS 关键是分离，色谱法是挥发油成分分析的主 要方法
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1.气相色谱法
方法：一般气相色谱 闪蒸气相色谱法 顶空气相色谱法
件稳定性的影响较大
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• 供试品前处理 • 原料药材：粉碎后，直接水蒸气蒸馏，所
得挥发油用乙醚、石油醚提取 • 制剂：有机溶剂提取
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2.高效液相色谱法
挥发性成分有些具有紫外吸收，如芳香族 化合物类（桂皮醛、丹皮酚、丁香酚、茴 香脑等），可用高效液相色谱法进行测定 。
闪蒸气相色谱法——将样品置闪蒸器内，在 一定温度下，挥发性成分气化，被载气带入色 谱柱进行分析 顶空气相色谱——在热力学平衡的蒸气相与 被分析样品同时存在于一个密闭恒温的样品瓶 中，测定恒温后样品瓶蒸气相中挥发性成分的 含量
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• 固定液——聚乙二醇类、聚酯类、硅氧烷 类和阿皮松类等，大多采用极性固定液
单萜：极性固定液（沸点接近） 倍半萜：极性、非极性固定液 含氧萜类衍生物：如含醇、醛、酮、酯等挥
发油类成分，极性固定液聚乙二醇和聚酯 类分离效果较好
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• 色谱柱：石英毛细管柱 • 检测器：氢火焰离子化检测器（FID） • 定量方法： （1）测定已知成分，含量较高且分离度好，
多用内标法 （2）有未知成分，不加校正因子的归一化法 （3）外标法 准确性受进样重复性和实验条
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挥发油含量的计算 含量（W/W ％）=
VO ××D1O 00%
WS
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3.薄层扫描法
主要用于定性分析，定量较少。 因为挥发油成分复杂，薄层分离困难，往 往很难达到定量要求，仅用于主要成分含 量高的挥发油的制剂分析；再者大多挥发 油成分都需显色后才可测定，操作复杂， 引入误差机会较多
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4.GC-FTIR和GC-MS联用技术
气相-红外（GC-FTIR）和气相-质谱（GCMS）联用技术不但可用于挥发性成分的鉴 别，而且也可以对其中成分进行定量，具 有方法简便、快速等优点. 特别是在没有标准品而需要定性未知物时 ，可从谱库检索中得到特征官能团有价值 的信息对化合物进行定性，用归一化法进 行百分含量计算。
挥发油类成分分析
讲解人：陶宇 制作人：汪鑫霞 刘伟平 龚楚婷 石玲玲
目录
• 结构特征 • 理化性质 • 鉴别（化学反应法、色谱法） • 含量测定（气相色谱法 、高效液相色
谱法、联用技术）
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• 脂肪族化合物较多存在于植物的果实和水 果中，包括烃、醇、醛、酮和酯等，例如 鱼腥草中的甲基正壬酮(methyl-nonylketone)、松节油中的正庚烷(n-keptane)、 桂花中的正癸烷(dacane)等。
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常见挥发性成分分析方法
• 薄荷醇(menthol) － GC • 丁香酚(eugenol) － GC • 龙脑(borneol)－ GC,TLCS • 樟脑(camphor) - GC • 桂皮醛(cinnam-aldehyde) － GC，
HPLC,TLCS • 桉油精(cineole) －GC • 丹皮酚(paeonol)- HPLC,GC,UV,TLCS
酸、碱、铁离子等杂志存在，否则萜类成 分易引起变化。 ④柱温：根据挥发油不同成分沸点不同选择 不同柱温，现多采用程序升温。
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挥发油中各化合物常用对照品对照法进行 鉴别，即在相同的色谱条件下测定供试品 与对照品的保留时间（tR）,以确定某组分 的存在与否。
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3、联用技术
CH3CO(CH2)8CH3 CH3(CH2)8CH3 CH3(CH2)5CH3
甲基正壬酮 正癸烷 正庚烷
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• 挥发油的组成除了上述三种物质外，还有 一些其它化合物 如：当归、川芎、和藁本等药材中的藁本 内酯、洋川芎内酯A，洋甘菊中的薁类化合 物兰香油薁，大蒜中的大蒜辣素，芥子中 的芥子油等。
• 多数挥发油能在浓硫酸（或浓盐酸）存在 下与香草醛形成各种颜色产物
• 缺点：专属性不强（中药制剂成分复杂， 干扰因素多）
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（二）色谱法
1、薄层色谱法 ①依据：挥发油极性大小 ②吸附剂：硅胶、氧化铝、硝酸银 ③展开剂：石油醚、正己烷、混合展开剂 ④显色剂：10%硫酸乙醇（萜类经脱水等作