啤酒中糖含量的测定
蒽酮比色法测总糖
一．实验原理
糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮(C14H10O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色。

该物质在620 nm处有最大吸收，在150 µg/ml范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。

这一方法有很高的灵敏度，糖含量在30 µg左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。

一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。

二．仪器与药品
1.仪器：电热恒温水浴锅，分光光度计，电子天平，容量瓶，刻度吸管等
2.试剂：
(1)葡萄糖标准液（l00 µg/ml）：精确称取100mg干燥葡萄糖，先用蒸馏水定容至100ml，再取出10ml定容至100ml；
(2)浓硫酸；
(3)蒽酮试剂：0.2 g蒽酮溶于100 ml浓 H2SO4中。

当日配制使用；
(4)啤酒（不用处理）。

三．实验步骤
1.葡萄糖标准曲线的制作
取7支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：
在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0m1，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。

自水浴重新煮沸起，准确煮沸l0 min取出，用冰浴冷却至室温，在620 nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管吸光值。

以标准葡萄糖含量（µg）为横坐标，以吸光值为纵坐标，作出标准曲线。

2.稀释：吸取啤酒1-2 m1稀释至500ml（先吸取2ml啤酒定容至100ml，再吸取10ml 已稀释的啤酒将其定容至50ml）
即2ml→100ml→取出10ml→定容至100ml
3.测定
吸取1.00ml已稀释的啤酒于试管中，加入4.O ml蒽酮试剂，平行三份；空白管以等量蒸馏水取代啤酒。

以下操作同标准曲线制作。

根据A620平均值在标准曲线上查出葡萄糖的含量（µg）。

四．数据记录与处理
1.校准空白值
2.标准曲线的绘制
3.由上面表格可作出下面的曲线
Y轴为校正后的A值
X轴为葡萄糖的浓度
4.待测啤酒
编号7 8 9
A 0.480 0.472 0.542
校正后A值0.484 0.480 0.546
5 .数据处理
由标准曲线可得：A=7.1256C(*)
啤酒的A的平均值为：（0.484+0.480+0.546）/3=0.503
将0.503代入(*)式得:C=A÷7.1256=0.0706（mg/ml)
则啤酒中总糖的含量为:0.0706×250=17.6（mg/ml)
=1.8（g/100ml)。