1. 提取蛋白裂解液配方：
25 mM HEPEs PH:7.4
5 mM EDTA
5 mM EGTA
50 mM NaCl
1 mM Na3VO3(矾酸钠)
1 mM sodium phosphophate
0.05% SDS
0.05% sodium deoxycholate (脱氧胆酸盐)
1% Triton-X 100
5 mM NaF
0.1% 2-mercaptoethanol
1 mM PMSF (1ul 100mmol/L+纯水99ul)
1uM Microcysin-LR
40ug/ml pepstatin A
40ug/ml aprotinin
40ug/ml leupeptin
2..组织蛋白提取及定量：
称量组织重量置小烧杯
用PBS清洗1-2次
加入组织裂解液【悬浮buffer储存液500ml+苯甲基磺酰氟（PMSF，有毒物）30+leapeptin （蛋白抑制酶）0.5ul于EP管混合，倒入盛组织的烧杯】
置冰上5min
用眼科剪剪碎
倒入5ml匀浆器（反复抽吸匀浆组织）
倒入或吸入EP管
离心（4°C 1000g 10min）取上清
用于蛋白定量或储存于-80°C
蛋白定量
取5ul蛋白样本+15ul去离子水（DW）+200ulBCA（A:B为50:1即196:4），分别混合样本与DW和BCA的A液与B液置于干净的96孔板上37°C，30min
酶联免疫测OD值（570nm，ELX-800型酶标仪）
由OD值计算蛋白浓度（用excel表或用下列公式计算）
（OD值×987.7108－198.342）×103ng/ul；OD=样本OD值－空白对照OD值）。