常用反相固相萃取柱
BauloTM SPE小柱 50um球形高效硅胶，颗粒分布窄，传质 均匀 99.9％高纯硅胶，杂质干扰小 单层C18键合填料，全封尾，更好的重现 性
正相固相萃取
流动相：非极性
正相固相萃取原理
保留取决于分析物的极性官能团与吸 附剂表面的极性官能团之间的相互作 用。
操作程序
活化吸附剂
萃取之前要用适当的溶剂淋 洗小柱，以使吸附剂保持湿润， 可以吸附目标化合物或干扰化 合物。
操作程序
上样（吸附）
样品倒入活化后的固相萃 取小柱，然后利用抽真空，加压 或离心的方法使样品进入吸附剂。
操作程序
洗涤（去除杂质）
在样品进入吸附剂，目标化合 物被吸附后，可先用较弱的溶剂 将弱保留干扰化合物洗掉。
固相萃取的分类
• 反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物
通常是非极性的或极性较弱的，主要是靠 非极性－非极性相互作用，是范德华力或 色散力。
• 离子交换固相萃取是靠目标化合物与吸附
剂之间的相互作用是静电吸引力。
固相萃取选择分离模式和吸附剂时还要考虑 以下几点：
1. 目标化合物在极性或非极性溶剂中的溶解 度，这主要涉及淋洗液的选择。
用比样品本身更强极性的溶剂洗脱吸 附的分析物质。
常用正相固相萃取柱
① 极性官能团键合硅胶 -CN， -NH2， -Diol
② 极性吸附物质 BauloTM-Silica， BauloTM-Florisil， BauloTM-Alumina
溶剂极性图
反相溶剂洗脱强度
己烷 异辛烷 四氯化碳 氯仿 二氯甲烷 四氢呋喃 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙腈 异丙醇 甲醇 水
• 从基质中消除干扰物 • 保护色谱柱 • 减少样品与溶剂使用量 • 缩短处理时间 • 提高回收率
固相萃取使用要点
• 1.准确了解样品物理及化学特性 • 2.选择合适的样品净化机理 -保留被分析物，洗脱污染物 -保留污染物，洗脱被分析物 • 3.选择适当的SPE产品-填料类型、柱容量、配套
附件 • 4.选择老化及洗脱溶剂
通用SPE萃取程序
正相填料 A.老化
1.用3-5ml非极性溶剂冲洗填料 B.上样
2.样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若所 需样品不会被保留，此时应收集样品作分析。 C.冲洗 4.如果样品被保留，使用约5ml非极性溶剂将弱保留干扰 物洗出。 D.用1-2ml极性溶剂将所需物质洗脱，收集用于分析。
2. 目标化合物有无可能离子化（可用调节 pH 值实现离子化），从而决定是否采用离 子交换固相萃取。
3. 目标化合物有无可能与吸附剂形成共价键， 如形成共价键，在洗脱时可能会遇到麻烦。
4. 非目标化合物与目标化合物在吸附剂上吸 附点上的竞争程度，这关系到目标化合物 与干扰化合物是否能很好分离。
SPE产品选择指导
通用SPE萃取程序
离子交换填料 A.老化
1。用5ml去离子水或低离子强度缓冲液(0.001M-0.01M)冲洗填料 B.上样
2.样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若所需样品不会 被保留，此时应收集样品作分析。 C.冲洗 3.如果样品被保留，使用约5ml去离子水或低离子强度缓冲液将弱保 留干扰物洗出。 D.用1-5ml高浓度缓冲液(0.1-0.5M) ，或以缓冲液改变pH，使得样品不 再离子化，将所需物质洗脱，收集用于分析。
可溶解样品
非极性样品
极性样品
离子型样品
反相填料
正相填料
离子交换填料
反相固相萃取
流动相：极性（水溶液）或中等极性 固定相：非极性 分离对象：中等到非极性物质
反相固相萃取原理
分析物中的CH键 + 硅胶表面官能团→吸附→极性 溶液中的弱有机分析物→保留在SPE。 用非极性溶剂解吸吸附在固定相中的目标物质。
操作程序
洗脱和收集 再用较强的溶剂将
目标化合物洗脱下来，加 以收集。
活化吸附剂 进 样 洗 涤 洗 脱
SPE分离机制与溶剂的选择
分离机制
反相SPE
正相溶剂洗脱强度
离子交换固相萃取
适用于带有电荷的化合物（水溶液、有机溶 液）。 原理：静电吸引，化合物上的带电荷基团与 键合硅胶上的带电荷基团之间的吸引。 分为：阴离子交换和阳离子交换。
阴离子（负电荷）交换
SAX、NH2：脂肪族季铵类盐 + 硅胶
阳离子交换
SCX：磺酸基；WCX：羧酸基团
离子交换固相萃取法的要求
HPLC与SPE比较
硬件 颗粒度(um) 颗粒形状 塔板数/柱 分离机理
操作成本 设备成本 分离模式 操作
HPLC
不锈钢柱 3\5 球型 20-25,000 连续洗脱
中至高 高 多种 可重复使用
SPE
塑料柱 40\50 无定型 球型 <100
“数字式”开关 洗脱 低 低 多种 一次性
为什么用SPE？
①
流
②
动
相
固相萃取的模式及原理
反相固相萃取 正相固相萃取 离子交换固相萃取
① 阴离子交换 ② 阳离子交换
固相萃取的分类
• 正相固相萃取所用的吸附剂都是极性
的．取决于目标化合物的极性官能团与吸 附剂表面的极性官能团之间相互作用，其 中包括了氢键，π—π键相互作用，偶极－ 偶极相互作用和偶极－诱导偶极相互作用 以及其他的极性－极性作用。
前言
试样的前处理是样品分析中至关重要 的一环，传统的样品预处理方法往往手 续复杂、耗时。具有溶剂消耗量少、对 样品污染少、预处理时间短等优点的固 相萃取技术已广泛地应用于环境的监测 与分析中，成为一种常规分析方法。
固相萃取(SPE)概念
SPE ：Solid Phase Extraction 是一种液相色谱分离，利用固体吸附剂 将液体样品中的目标化合物与干扰化合 物分离，达到分离和富集目标化合物的 目的。
通用SPE萃取程序
反相填料 A.老化
1.用3-5ml甲醇冲洗填料 2.用3-5ml水或缓冲液冲洗，上样前勿让填料流干。 B.上样 3.样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若所 需样品不会被保留，此时应收集样品作分析。 C.冲洗 4.如果样品被保留，使用约5ml极性溶剂(如水、缓冲液或 有机溶剂/水混合液)将弱保留干扰物洗出。 D.用1-2ml非极性溶剂将所需物质洗脱，收集用于分析。