水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法HJ478-2009 方法证实记录一、方法原理用二氯甲烷萃取水中多环芳烃（PAHs），萃取液经弗罗里硅土柱净化，用二氯甲烷和正己烷的混合溶剂洗脱，洗脱液经浓缩后，用具有紫外检测器的高效液相色谱仪分离检测。

二、试剂2.1乙腈：SIGMA-ALDRICH，液相色谱纯2.2 甲醇：Fisher，液相色谱纯2.3 二氯甲烷：天津致远，色谱纯2.4 正己烷：SIMARK，液相色谱纯2.5 无水硫酸钠：天津光复，优级纯，400℃烘烤2h2.6 氯化钠：天津北联，优级纯，400℃烘烤2h2.7 多环芳烃标准溶液：SITAER，甲醇中16种多环芳烃混标（编号：301702F55）2.8 弗罗里硅土柱：100mg/6mL三、主要仪器设备3.1 液相色谱仪：Thermo，Μ-3000，配有紫外检测器3.2色谱柱：Acclaim TM 120 C18 5μm 120Å（4.6X250mm）3.3 分液漏斗：2000mL，活塞不加凡士林3.4 层析柱3.5旋转蒸发仪四、方法步骤4.1 样品预处理4.1.1 萃取摇匀水样，量取1000mL水样，倒入2000mL分液漏斗中，加入30g氯化钠，再加入50mL二氯甲烷，振摇5min，静置分层，收集有机相，放入250mL接收瓶中，重复萃取两遍，合并有机相，加入无水硫酸钠至有流动的无水硫酸钠存在。

放置30min，脱水干燥。

4.1.2 浓缩用旋转蒸发仪浓缩至1mL，加入正己烷至5mL，重复浓缩3次，最后浓缩至1mL，待净化。

4.1.3 净化用1g弗罗里硅土柱净化：先用4mL淋洗液（二氯甲烷：正己烷=1:1）冲洗净化柱，再用10mL正己烷平衡净化柱。

将浓缩后的样品加到柱上，再用3mL正己烷分3次洗涤装样品的容器，一并加到柱上，弃去流出的溶剂。

用10mL淋洗液洗涤净化柱，收集洗脱液于浓缩瓶中，浓缩至0.5~1.0mL后加入3mL乙腈，浓缩至0.5mL，最后用乙腈定容至1.0mL。

4.2 色谱条件4.2.1色谱条件0-15min,乙腈：水=60:40；15-30min，乙腈：水变化至100:0；30-39min，乙腈：水=100:0；39-40min，乙腈：水变化至60:40；40-42min,乙腈：水=60:404.2.2检测器检测器类型：紫外检测器。

检测波长：220nm。

五、标准曲线5.1标准系列的制备取一定量多环芳烃标准溶液，用乙腈稀释至少5个浓度点的标准系列：0.5、1.0、2.0、4.0、5.0、10.0μg/mL。

5.2标准曲线的测定通过自动进样器移取10μL标准系列注入液相色谱仪，得到不同浓度的多环芳烃的色谱图，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

六、方法检出限检出限的2～5倍法。

（采用曲线点0.04μg/mL测量7次得到萃取液检出限，再根据水样体积和萃取液定容体积，算出方法检出限）七、精密度实验室内相对标准偏差：标准曲线点测定法。

（对3组不同浓度的标准曲线点各测定6次，得到3组结果）八、准确度样品加标法。

（分别对6个平行样品加标0.5mg/L，得到6个加标结果）九、结论方法的线性为0.9986~0.9999；检出限为0.001μg/L ~0.010μg/L，均等于或优于方法检出限；精密度为0.08%~2.01%；加标回收率为63.3%~97.1%，均满足方法要求。

附表1方法检出限、测定下限测试数据表平行样品编号试样1（萘）试样2（二氢苊）试样3（苊）备注测定结果（μg/L）1 0.0381 0.0379 0.0376 浓度0.04μg/mL2 0.0370 0.0369 0.03553 0.0371 0.0364 0.03264 0.0372 0.0385 0.03745 0.0371 0.0369 0.03626 0.0370 0.0368 0.03527 0.0377 0.0373 0.0358平均值（μg/L）0.0373 0.0372 0.0358 标准偏差S i（μg/L）0.00042 0.0007 0.00167 t值 3.143 3.143 3.143 检出限（μg/L）0.001 0.002 0.005 测定下限（μg/L）0.005 0.009 0.021方法检出限、测定下限测试数据表平行样品编号试样1（芴）试样2（菲）试样3（蒽）备注测定结果（μg/L）1 0.0413 0.0376 0.0385 浓度0.04μg/mL2 0.0458 0.0369 0.03653 0.0428 0.0361 0.03844 0.0355 0.0351 0.03805 0.0413 0.0361 0.03836 0.0432 0.0361 0.03627 0.0420 0.0.372 0.0393平均值（μg/L）0.0417 0.0364 0.0379 标准偏差S i（μg/L）0.0031 0.0008 0.0011 t值 3.143 3.143 3.143 检出限（μg/L）0.010 0.003 0.004 测定下限（μg/L）0.039 0.011 0.014方法检出限、测定下限测试数据表平行样品编号试样1（荧蒽）试样2（芘）试样3（苯并[a]蒽）备注测定结果（μg/L）1 0.0396 0.0383 0.0396 浓度0.04μg/mL2 0.0387 0.0375 0.04023 0.0382 0.0380 0.03944 0.0384 0.0374 0.03955 0.0384 0.0370 0.03956 0.0383 0.0373 0.03997 0.0382 0.0367 0.0400平均值（μg/L）0.0385 0.0375 0.0397 标准偏差S i（μg/L）0.0005 0.0006 0.0003 t值 3.143 3.143 3.143 检出限（μg/L）0.002 0.002 0.001 测定下限（μg/L）0.006 0.007 0.004平行样品编号试样1（䓛）试样2（苯并[b]荧蒽）试样3（苯并[k]荧蒽）备注测定结果（μg/L）1 0.0406 0.0361 0.0365 浓度0.04μg/mL2 0.0390 0.0367 0.03883 0.0402 0.0367 0.03854 0.0396 0.0361 0.03875 0.0399 0.0365 0.03856 0.0393 0.0362 0.03847 0.0395 0.0362 0.0385平均值（μg/L）0.0397 0.0364 0.0383 标准偏差S i（μg/L）0.0005 0.0003 0.0008 t值 3.143 3.143 3.143 检出限（μg/L）0.002 0.001 0.002 测定下限（μg/L）0.007 0.003 0.010方法检出限、测定下限测试数据表平行样品编号试样1（苯并[a]芘）试样2（二苯并[a,h]蒽）试样3（苯并[g,h,i]苝）备注测定结果（μg/L）1 0.0444 0.0488 0.0416 浓度0.04μg/mL2 0.0421 0.0461 0.03863 0.0428 0.0473 0.03894 0.0440 0.0470 0.03915 0.0440 0.0481 0.03886 0.0423 0.0462 0.03887 0.0421 0.0486 0.0385平均值（μg/L）0.0431 0.0474 0.0392 标准偏差S i（μg/L）0.0010 0.011 0.0011 t值 3.143 3.143 3.143 检出限（μg/L）0.003 0.003 0.003 测定下限（μg/L）0.013 0.014 0.014平行样品编号试样1（茚并[1,2,3,-c,d]芘）试样2（）试样3（）备注测定结果（μg/L）1 0.0394 浓度0.04μg/mL2 0.03863 0.03874 0.03865 0.03886 0.03847 0.0383平均值（μg/L）0.0387标准偏差S i（μg/L）0.0004t值 3.143检出限（μg/L）0.001测定下限（μg/L）0.004附表2方法精密度测试数据表平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注萘测定结果（mg/L）1 1.0184 2.0153 5.07872 1.0309 2.0164 5.07873 1.0290 2.0168 5.08354 1.0335 2.0004 5.07555 1.0342 2.0002 5.07976 1.0349 2.0053 5.0677平均值（mg/L）1.03022.0091 5.0773 标准偏差S i（mg/L）0.0062 0.0080 0.0054 相对标准偏差RSD i%0.60 0.40 0.11平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注苊测定结果（mg/L）1 1.0087 2.0087 5.09002 0.0223 2.0109 5.09293 1.0212 2.0106 5.09844 1.0261 1.9944 5.09605 1.0261 1.9928 5.10246 1.0270 1.9987 5.0952平均值（mg/L）1.02192.0027 5.0958 标准偏差S i（mg/L）0.0062 0.0083 0.0043 相对标准偏差RSD i%0.60 0.42 0.08方法精密度测试数据表平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注芴测定结果（mg/L）1 0.9658 1.9351 5.04912 0.9733 1.9463 5.04613 0.9842 1.9636 4.98294 0.9792 1.9479 4.95785 0.9822 1.8943 4.89706 0.9719 1.9007 5.0241平均值（mg/L）0.9761 1.9313 4.9928 标准偏差S i（mg/L）0.0070 0.0278 0.0591 相对标准偏差RSD i%0.72 1.44 1.18平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注二氢苊测定结果（mg/L）1 1.0091 2.0197 5.12472 1.0245 2.0192 5.12703 1.0201 2.0139 5.14614 1.0274 1.9991 5.09935 1.0270 2.0090 5.12046 1.0298 2.0130 5.1262平均值（mg/L）1.02302.0123 5.1240 标准偏差S i（mg/L）0.0076 0.0076 0.0150 相对标准偏差RSD i%0.74 0.38 0.29方法精密度测试数据表平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注菲测定结果（mg/L）1 0.9848 1.9598 5.15622 0.9961 1.9629 5.16003 0.9943 1.9614 5.16314 0.9999 1.9456 4.95965 1.0011 1.9435 4.96176 0.9995 1.9494 5.1322平均值（mg/L）0.9960 1.9538 5.0888 标准偏差S i（mg/L）0.0060 0.0086 0.0999 相对标准偏差RSD i%0.61 0.44 1.96平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注蒽测定结果（mg/L）1 0.9557 1.9339 5.18692 0.9768 1.9330 5.17373 0.9764 1.9314 5.17944 0.9800 1.9144 4.90355 0.9802 1.9153 4.90896 0.9834 1.9173 5.1399平均值（mg/L）0.9754 1.9242 5.0820 标准偏差S i（mg/L）0.0100 0.0094 0.1372 相对标准偏差RSD i%1.02 0.492.70方法精密度测试数据表平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注荧蒽测定结果（mg/L）1 0.9859 1.9714 5.16412 0.9995 1.9728 5.16513 0.9986 1.9709 5.16914 1.0033 1.9544 5.05395 1.0034 1.9681 5.05936 1.0049 1.9589 5.1354平均值（mg/L）0.9993 1.9661 5.1245 标准偏差S i（mg/L）0.0070 0.0076 0.0540 相对标准偏差RSD i%0.70 0.39 1.05平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注芘测定结果（mg/L）1 0.9597 1.9386 5.24772 0.9733 1.9403 5.23133 0.9715 1.9357 5.22574 0.9756 1.8998 5.05075 0.9764 2.0077 5.04876 0.9782 1.9028 5.1701平均值（mg/L）0.9724 1.9375 5.1624 标准偏差S i（mg/L）0.0067 0.0389 0.0911 相对标准偏差RSD i%0.69 2.01 1.76方法精密度测试数据表平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注䓛测定结果（mg/L）1 0.9956 2.0011 5.16572 1.0136 1.9891 5.13953 1.0275 1.9988 5.15244 1.0172 2.0011 5.08835 1.0198 2.0322 5.10996 1.0205 1.9825 5.1373平均值（mg/L）1.01572.0008 5.1322 标准偏差S i（mg/L）0.0109 0.0171 0.0284 相对标准偏差RSD i%1.07 0.85 0.55平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注苯并[a]蒽测定结果（mg/L）1 0.9919 2.0124 5.10882 1.0114 1.9908 5.12413 1.0270 1.9818 5.11844 1.0135 2.0048 5.08745 1.0149 2.0198 5.08356 1.0132 1.9712 5.0807平均值（mg/L）1.0120 1.9968 5.1005 标准偏差S i（mg/L） 1.0113 0.0187 0.0190 相对标准偏差RSD i%1.12 0.94 0.37方法精密度测试数据表平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注苯并[b]荧蒽测定结果（mg/L）1 0.9822 1.9724 5.07722 0.9943 1.9528 5.07643 1.0054 1.9566 5.07694 0.9979 1.9594 4.99795 0.9973 1.9634 5.00126 0.9982 1.9418 5.0204平均值（mg/L）0.9959 1.9577 5.0417 标准偏差S i（mg/L）0.0076 0.0103 0.0393 相对标准偏差RSD i%0.77 0.53 0.78平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注苯并[k]荧蒽测定结果（mg/L）1 1.0064 1.9945 5.10202 1.0128 2.0039 5.09613 1.0099 2.0028 5.10194 1.0168 1.9861 5.06515 1.0162 1.9840 5.06636 1.0171 1.9841 5.0674平均值（mg/L）1.0132 1.9926 5.0831 标准偏差S i（mg/L）0.0043 0.0092 0.0186 相对标准偏差RSD i%0.43 0.46 0.37方法精密度测试数据表平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注苯并[a]芘测定结果（mg/L）1 0.9701 1.9827 5.13692 0.9930 2.0000 5.14073 0.9887 1.9962 5.14004 0.9945 1.9803 5.02405 0.9982 1.9804 5.02446 0.9955 1.9707 5.0237平均值（mg/L）0.9900 1.9850 5.0816 标准偏差S i（mg/L）0.0102 0.0110 0.0631 相对标准偏差RSD i%1.03 0.55 1.24平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注二苯并[a,h]蒽测定结果（mg/L）1 0.9736 1.9921 5.00232 1.0001 2.0041 4.98473 1.0025 1.9972 4.99124 0.9965 1.9733 4.98375 1.0170 1.9745 4.98066 1.0119 1.9844 4.9757平均值（mg/L）1.0002 1.9876 4.9864 标准偏差S i（mg/L）0.0151 0.0124 0.0093 相对标准偏差RSD i%1.51 0.62 0.19方法精密度测试数据表平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注苯并[ghi]苝测定结果（mg/L）1 1.0092 2.0111 5.09162 1.0217 2.0135 5.09103 1.0190 2.0116 5.09324 1.0241 1.9948 5.08705 1.0249 1.9929 5.08966 1.0225 1.9985 5.0810平均值（mg/L）1.02022.0037 5.0889 标准偏差S i（mg/L）0.0058 0.0093 0.0044 相对标准偏差RSD i%0.57 0.47 0.09平行样品编号试样1（1.00mg/L）试样2（2.00mg/L）试样3（5.00mg/L）备注茚并[1,2,3-c,d]芘测定结果（mg/L）1 1.0063 2.0122 5.09752 1.0215 2.0133 5.09473 1.0189 2.0122 5.09894 1.0273 1.9954 5.09255 1.0246 1.9942 5.09496 1.0240 1.9998 5.0854平均值（mg/L）1.02042.0045 5.0940标准偏差S i（mg/L）0.0075 0.0090 0.0048相对标准偏差RSD i%0.73 0.45 0.09附表4方法准确度测试数据表(实际样品加标测试数据)平行样品编号有证标准样品备注试样1 萘试样2苊试样3 芴样品加标样品样品加标样品样品加标样品测定结果（μg/L）1 0.1713 0.4873 0 0.4830 0 0.46802 0.1686 0.4888 0 0.4822 0 0.46633 0.1716 0.4871 0 0.4821 0 0.46104 0.1713 0.4874 0 0.4835 0 0.47535 0.1724 0.4878 0 0.4822 0 0.46586 0.1730 0.4899 0 0.4854 0 0.4605平均值（μg/L）0.1714 0.4880 0 0.4831 0 0.4662 加标量μ（μg/L）0.5 0.5 0.5加标回收率P i（% ）63.3 96.6 93.2平行样品编号有证标准样品备注试样1 二氢苊试样2菲试样3 蒽样品加标样品样品加标样品样品加标样品测定结果（μg/L）1 0 0.4847 0 0.4736 0 0.45952 0 0.4851 0 0.4715 0 0.46113 0 0.4849 0 0.4715 0 0.46014 0 0.4831 0 0.4713 0 0.46145 0 0.4855 0 0.4714 0 0.46076 0 0.4889 0 0.4685 0 0.4633平均值（μg/L）0 0.4854 0 0.4713 0 0.4610加标量μ（μg/L）0.5 0.5 0.5加标回收率P i（% ）97.1 94.3 92.2方法准确度测试数据表(实际样品加标测试数据)平行样品编号有证标准样品备注试样1荧蒽试样2芘试样3 䓛样品加标样品样品加标样品样品加标样品测定结果（μg/L）1 0 0.4742 0 0.4616 0 0.47662 0 0.4745 0 0.4613 0 0.47963 0 0.4736 0 0.4616 0 0.47764 0 0.4743 0 0.4619 0 0.47895 0 0.4751 0 0.4632 0 0.47676 0 0.4757 0 0.4653 0 0.4802平均值（μg/L）0 0.4746 0 0.4625 0 0.4783 加标量μ（μg/L）0.5 0.5 0.5加标回收率P i（% ）94.9 92.5 95.7平行样品编号有证标准样品备注试样1苯并[a]蒽试样2苯并[b]荧蒽试样3苯并[k]荧蒽样品加标样品样品加标样品样品加标样品测定结果（μg/L）1 0 0.4787 0 0.4692 0 0.48052 0 0.4762 0 0.4694 0 0.48033 0 0.4766 0 0.4681 0 0.47904 0 0.4767 0 0.4689 0 0.48055 0 0.4792 0 0.4685 0 0.48056 0 0.4790 0 0.4707 0 0.4816平均值（μg/L）0 0.4777 0 0.4691 0 0.4804加标量μ（μg/L）0.5 0.5 0.5加标回收率P i（% ）95.5 93.8 96.1方法准确度测试数据表(实际样品加标测试数据)平行样品编号有证标准样品备注试样1苯并[a]芘试样2二苯并[a,h]蒽试样3苯并[ghi]苝样品加标样品样品加标样品样品加标样品测定结果（μg/L）1 0 0.4727 0 0.4807 0 0.48212 0 0.4768 0 0.4736 0 0.48173 0 0.4737 0 0.4874 0 0.48064 0 0.4732 0 0.4937 0 0.48305 0 0.4732 0 0.4811 0 0.48276 0 0.4741 0 0.4911 0 0.4842平均值（μg/L）0 0.4740 0 0.4846 0 0.4824 加标量μ（μg/L）0.5 0.5 0.5加标回收率P i（% ）94.8 96.9 96.5平行样品编号有证标准样品备注试样1茚并[1,2,3-c,d]芘试样2 试样3样品加标样品样品加标样品样品加标样品测定结果（μg/L）1 0 0.48252 0 0.48283 0 0.48014 0 0.48315 0 0.48326 0 0.4842平均值（μg/L）0 0.4826 加标量μ（μg/L）0.5加标回收率P i（% ）96.5。