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第三章 病毒-2013-2014(2)


二、噬菌体的繁殖
第二节 噬菌体
二、噬菌体的繁殖
病毒利用宿主的生物合成机构和场所,使病毒核酸表达和复制, 产生大量的病毒蛋白质和核酸。
(3)增殖(病毒基因组的表达与复制存在着强烈的时序性)
第二节 噬菌体
二、噬菌体的繁殖
(4)成熟(装配)
第二节 噬菌体
二、噬菌体的繁殖
(5)裂解(释放)
第二节 噬菌体
第一节 病毒的特性
五、亚病毒因子

类病毒:是一个裸露的闭合环状RNA分子,它能感染寄主细胞并
在其中进行自我复制使寄主产生病症
第一节 病毒的特性
五、亚病毒因子

拟病毒:又称“类类病毒”,指一类包裹在真病毒粒(辅助病毒)
中的有缺陷的类病毒。 •由裸露的RNA组成; 例如:绒毛烟斑驳病毒、莨 •其复制必须依赖辅助病毒的协助;菪斑驳病毒、苜蓿暂时性条 单独的拟病毒或辅助病毒 不能使植物受到感染; 只有两者同时存在时才能 感染宿主。 斑病毒、地下三叶草斑驳病 毒中的拟病毒RNA两者合在 一起才能感染和复制;
(1)吸附
尾丝尖端与宿主细胞表面的特异性 受体接触,可触发尾丝散开,附着 在受体上,随之把刺突、基板固定
第二节 噬菌体
二、噬菌体的繁殖
(2)侵入 尾部的酶水解细胞壁的肽聚糖, 使细胞壁产生小孔;尾鞘收缩, 核酸通过中空的尾管压入胞内, 蛋白质外壳留在胞外;
吸附
尾钉固着
尾鞘收缩
尾管穿入
DNA注入
第二节 噬菌体
致病机理不太清楚;主要存在于神经细胞中,朊病毒不破坏 寄主细胞的酶,而是使正常的寄主基因产生更多的致病蛋白
病毒的群体形态(p69)
噬菌斑:噬菌体在菌苔上形成的“负菌落” 包含体:是寄主细胞被病毒感染后形成的蛋 白质结晶体,内含1至几个病毒粒子。 枯斑/空斑:

第二节 噬菌体

定义:噬菌体(phage)是侵染原核生物的病毒。 一、噬菌体的形态及分类 基本形态为蝌蚪形、微球形和线状3种

类病毒:只含具有独立侵染性的RNA组分 拟病毒:只含不具独立侵染性的RNA组分 朊病毒:只含具有侵染力的蛋白质组分
第一节 病毒的特性
四、病毒的分类 根据对寄主的影响程度划分为2种病毒 温和性的病毒: 病毒的基因组可以与寄主基因组同 时复制,并且可以形成一种溶原化状态, 从而不导致细胞死亡。 烈性病毒:感染后能杀死细胞的病毒
噬菌体效价的测定-双层平板法
问题2:1个烈性噬菌体粒子侵染1个宿主 细胞后,经过烈性增值周期后,1个宿主 细胞能释放多少个子代噬菌体?
噬菌体的繁殖曲线——一步生长曲线 概念
\定量描述毒性噬菌体增殖规律的实验曲线,该
曲线反映3个重要的特性参数,即潜伏期、裂解 期、裂解量;
第一节 病毒的特性
五、亚病毒因子

朊病毒:又称蛋白质侵染因子,具有侵染性的蛋白质颗粒,称为
Prion,即朊病毒,毒朊 。 1982年,美国加洲大学旧金山分校动物病毒学家S. B. Prusiner 发现羊瘙痒病是蛋白质侵染引起的疾病,并称为“Prion”即朊 病毒
现在已经发现与朊病毒有关的疾病有羊瘙痒病、疯牛病(BSE)、人的库 鲁病(震颤病)和克─雅氏病。有人还推测人类的一些慢性退化性紊乱疾 病,像早老年痴呆,帕金森氏病、糖尿病、风湿性关节炎和红斑狼疮等疾 病也可能是由朊病毒引起的。
第三章 病毒和亚病毒因子
教学大纲关于本章学习要求
本章重点、难点: 1. 病毒的形态构造 2. 温和噬菌体与毒性噬菌体 3. 类病毒、拟病毒、朊病毒 本章思考题: 1. 病毒的特点、基本结构和化学组成? 2、噬菌体的效价与溶源性? 3. 类病毒、拟病毒、朊病毒的定义及主要特点 4. 各类病毒复制的主要过程? 5. 病毒的一步生长曲线?
二、噬菌体的繁殖
噬菌体效价的测定
效价:又称噬菌斑形成单位数(pfu)或感染中 心数,表示每毫升试样中所含有的具侵染性的 噬菌体粒子数 测定的方法——双层平板法
双层琼脂平板法
需要配置2%和1%琼脂的两种培养基,以2%琼脂培养基作底层铺 成平板,然后将对数期的生产菌悬液0.2ml,待检样品0.1ml以 及冷却至45 ℃左右1%琼脂培养基3~4ml混合倒入底层平板上, 37 ℃培养过夜,如果存在噬菌体,在双层琼脂上层将出现透明 的空斑,即为噬菌斑。

根据对寄主的影响程度不同,分为 烈性噬菌体 温和噬菌体
第二节 噬菌体
二、噬菌体的繁殖

(一)烈性噬菌体
\ 定义:感染宿主细胞,能在宿主细胞内增值,产生大量
子代噬菌体并引起细菌裂解的一类噬菌体称为烈性噬菌 体,其可在短时间内能连续完成吸附、侵入、增值(复 制与生物合成)成熟(装配)和裂解(释放)5个阶段而 实现其繁殖。
第一节 病毒的特性

二、病毒的形状和大小
1.病毒的形状
病毒形态多种多样,有球状、棒 杆状、蝌蚪状和线状等多种形态
第一节 病毒的特性
多数—球状(腺病毒、蘑菇病毒) 人、动物、真菌 少数—枪弹状或砖状(弹状病毒、 痘病毒) 多数—线状和杆状(TMV、家蚕核 型多角体病毒) 少数—球状(花椰菜病毒) 蝌蚪状(T2、T4 、λ噬菌体) 细菌病毒(噬菌体) 线状(fd、M13) 球状(MS2 、φX174 )
植物、昆虫病毒
第一节 病毒的特性
2.病毒的大小
病毒个体用纳米(nm)量度 病毒个体大小相差悬殊,10-300nm;通常在100nm左右 较大的病毒如痘类病毒250-300*200-250nm;最小的 病毒如菜豆畸矮病毒9-11nm;
第一节 病毒的特性
三、病毒的结构和化学组成 1. 病毒粒子结构
类病毒:
1971年T.O.Diener阐明马铃薯纺锤形块茎病的病原是一种具有 感染性和自主复制能力的低分子RNA(类病毒,Diener,1971)
马铃薯纺锤形块茎病类病毒(Potato spindletuber viroid,PSTV), 这是一种导致马铃薯严重减产的病原体,棒状,无蛋白外壳; 它仅含一个由359个核苷酸组成的单链环状RNA分子(相对分子 质量约100 000)。该分子内有很多碱基(~70%)通过氢键配对而形成双 螺旋区,未配对碱基则形成内环。双螺旋区与内环交替排列形成一 个伸长的棒状分子; 类病毒RNA相对分子质量虽小,但能独立侵染寄主,侵入寄主 后也能自我复制,不需要辅助病毒。
(2)二十面体对称
第一节 病毒的特性

(2)复合对称 大肠杆菌 T4噬菌体是复合对称病毒的代表
第一节 病毒的特性

(2)复合对称 大肠杆菌噬菌体T4是复合对称病毒的代表
第一节 病毒的特性

(2)复合对称:大肠杆菌噬菌体T4
头部
z z
头部:212个衣壳粒, 二十面体对称 核心:在头部内,线状 双链DNA
大部分病毒的遗传物质为DNA,少数RNA病毒能以RNA为遗传物质。
第一节 病毒的特性

病毒的化学组成
病毒蛋白质:
主要在构成病毒结构、病毒的侵染与增殖过程中发挥作用。

(1)结构功能 衣壳蛋白包在病毒核酸外面构成病毒的基本结构──核 衣壳,保护着病毒核酸免遭破坏 (2)吸附 噬菌体的尾丝与流感病毒包膜上的糖蛋白刺突吸附在宿主细 胞表面的受体上; (3)破坏宿主细胞膜与细胞壁 如噬菌体的溶菌酶与流感病毒的神经氨 酸酶; (4)增殖 如DNA和RNA聚合酶、 RNA复制酶、逆转录酶等核酸复制酶以 及合成病毒蛋白质所需的各种酶等。
毒粒(viron):病毒的细胞外颗粒形式
核衣壳 包膜 衣壳
衣壳
第一节 病毒的特性
三、病毒的结构和化学组成 病毒粒子结构
裸露病毒 核心(核酸) 壳体(蛋白质) 核衣壳
壳体的化学成分是蛋白质,由称为衣壳粒的亚单位组成; 核衣壳是任何病毒(指“真病毒”)都具有的基本结构。
第一节 病毒的特性
三、病毒的结构和化学组成 病毒粒子结构

烈性噬菌体所经历的繁殖过程,称为裂解性周期或 增殖性周期。 现以T偶数噬菌体为例说明


T4 噬 菌 体
尾髓 尾鞘
颈部
基板 尾丝 刺突
毒性噬菌体的生活周期: 5个阶段 (1)吸附;
增 (2)侵入; 殖
(3)增值(复制与生物合成); (4)成熟(装配); (5)裂解(释放)
第二节 噬菌体
二、噬菌体的繁殖

无 单链DNA有包膜 的病毒类型
第一节 病毒的特性
四、病毒的分类 根据寄主划分为5种病毒

动物病毒:人类病毒(300余种)
脊椎动物病毒(931种) 昆虫病毒(1671种)

植物病毒:600余种 真菌病毒:100余种 细菌病毒:2850余种 拟病毒:
第一节 病毒的特性
四、病毒的分类 根据化学成分划分为2种病毒 真病毒 亚病毒
第一节 病毒的特性
第一节 病毒的特性

一、病毒的特点
1.病毒的定义 含一种核酸(DNA或RNA),专性活细胞内寄生,只能依 靠宿主细胞的代谢系统完成核酸的复制和蛋白质的合成, 并经装配而达到增值,又能在细胞外以无生命的大分子状 态存在的非细胞型微生物。
第一节 病毒的特性
2.病毒的特点
(1)形态极其微小,一般能通过细菌滤器,需借助电 子显微镜才能观察 (2)无细胞结构,其主要成分仅为核酸和蛋白质两 种,故又称“分子生物” ; (3)只含有1种核酸:DNA或RNA ; (4)没有核糖体,也没有合成蛋白质所必需的酶,必须 严格活细胞内寄生; (5)病毒不会长大,不经分裂繁殖,而是在宿主细胞内 合成大量组分,通过装配而增殖 (6)对抗生素不敏感;对干扰素敏感。
第一节 病毒的特性

病毒的化学组成

脂类和糖类(包膜病毒):
脂类主要是磷脂、胆固醇和中性脂肪;糖类主要是葡萄糖, 龙胆二糖,岩藻糖,半乳糖等,与碱基或氨基酸相接。
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