四、实验步骤
1、细菌水解大分子物质试验 2、糖发酵试验
➢培养基：葡萄糖发酵培养基和乳糖发酵培养基 （内装杜氏小管）（各3支） ➢菌种：大肠杆菌和产气肠杆菌 ➢方法：分别接种于葡萄糖发酵培养基和乳糖发 酵培养基
四、实验步骤 1、细菌水解大分子物质试验 2、糖发酵试验 3、IMViC试验
IMViC试验
➢大 产肠气肠杆杆菌菌：阳：阳性性 ➢产气肠杆菌：阴性
三、实验材料
1、菌种：枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿 假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa），普通变形杆菌（Proteus vularis），产气肠杆菌。
2、培养基：固体油脂培养基，固体淀粉培养基，明胶培养基 试管，石蕊牛奶试管，尿素琼脂试管、葡萄糖发酵培养基试 管和乳糖发酵培养基试管各3支，普通变形杆菌（内装有倒 置的德汉氏小管） ，蛋白胨水培养基，葡萄糖蛋白胨水培 养基，柠檬酸盐斜面培养基，醋酸铅培养基。
3、溶液或试剂：革兰氏染色用卢氏碘液（Lugol’s iodine solution），甲基红指示剂，40% KOH，5% α-萘酚，乙醚， 吲哚试剂等。
4、仪器或其他用具：无菌平板，无菌试管，接种环，接种针， 试管架。
四、实验步骤
1、细菌水解大分子物质试验
淀粉水解试验 油➢脂培水养解基试：验淀粉培养基平板 明➢➢胶菌 培液种 养化： 基试：大验肠 油杆脂菌培和养枯基草平芽板孢杆菌 石➢➢➢蕊方 菌 培牛法种 养乳： 基：试：平 大肠 试板验上杆管划菌明和胶“金培十黄养”色基字葡接萄种球菌
5、假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵试验 应该出现什么结果？
6、为什么大肠杆菌的甲基红反应阳性，而产气肠杆 菌为阴性？这个试验与伏－普试验最初底物与最终 产物有何异同之处？
7、说明在硫化氢试验中醋酸铅的作用，可以用哪种 化合物代替醋酸铅？
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➢大 ➢➢➢➢➢➢注 方 注 菌 方 培 菌 方种意 法 意 法 法种 养： ： ： ： ：：： 基接 平 接 穿 粘 斜：大种 板 种 刺 面乳肠试产前上前接划杆管碱在划在种线菌石平折平接菌或蕊板线板种或牛产底接底铜乳气部种部绿培肠作作假养杆记记单基菌号 号胞（；菌2支“）十”字不要太 ➢➢注 注意意：：观20察℃结培构养注意牛乳产酸、产碱、凝固、 胨化现象是连续出现的。
试验名称
培养基名称
菌种名称 接种 接种 方式 管数
吲哚试验
蛋白胨水培养基 大肠杆菌和 液体 1
甲基红试验 葡萄糖蛋白胨培养基 产气肠杆菌 液体 1
伏普试验 葡萄糖蛋白胨培养基
液体 1
柠檬酸盐试验 柠檬酸盐培养基
斜面 1
五、实验报告
1、分别记录试验菌种对淀粉水解、脂肪水解、明胶 液化、石蕊牛奶及尿素试验的结果。以“＋”表示 阳性，“－”表示阴性。
2、记录大肠杆菌及普通变形杆菌对葡萄糖和乳糖的 发酵试验结果。以“+”表示产酸或产气，“－”表 示不产酸或不产气。
3、记录大肠杆菌和产气杆菌的吲哚试验、甲基红试 验、伏-普试验、柠檬酸盐试验及硫化氢试验结果， 以“+”表示阳性反应。“－”表示阴性反应。
4、不利用碘液验
吲哚试验：
甲➢色基氨红酸试酶验：（色M氨.R.酸试→验吲）哚：＋对二甲基氨基苯甲醛→ 伏玫➢产-瑰普酸吲试能哚验力（（：红乙强色酰，）甲甲基基甲红醇变试红验；）弱：：甲基红不变色 柠➢葡檬➢萄酸大糖盐肠→试杆丙验菌酮：：酸阳→性乙酰甲基甲醇→2,3-丁二醇
➢乙能➢否酰产利甲气用基肠柠甲杆檬醇菌酸→：作O阴H为性－碳→源二乙酰＋精氨酸的胍基→红 色化➢合大物肠杆菌：阴性
实验十细菌生化实验-微生物实 验
二、实验原理
1、微生物对生物大分子的分解利用 2、➢糖淀发粉酵水试解验：淀粉酶 3、➢I油产M脂酸ViC水：试解溴验：甲脂酚肪紫酶指示剂
➢明➢胶大液肠化杆：菌蛋：白酶 ➢石➢蕊产牛气乳肠试杆验菌：：产酸、产碱、胨化、酸凝固等。 ➢产气：杜氏小管检测
➢大肠杆菌： ➢产气肠杆菌：