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神经系统疾病的细胞治疗
如帕金森氏病细胞治疗
胚胎干细胞细胞移植 神经干细胞细胞移植
1、干细胞直接移植 2、诱导分化成相应神经细胞（多巴胺能神经元）后进 行细胞移植
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心肌疾病的细胞治疗
如心肌梗塞的细胞治疗
胚胎干细胞 诱导分化成心肌细胞 细胞移植 成体干细胞（骨髓基质干细胞、脂肪干细胞、心肌干细胞等） 诱导分化成心肌细胞 细胞移植
干细胞和干细胞 治疗.ppt
干细胞 stem cell
未分化细胞 自我更新 (self-renew) 无限增殖 体外长期培养 多向分化潜能 (multipotential)
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干细胞的类型：
胚胎干细胞 embryonic stem cells
胚胎干细胞主要是指来自囊胚内细胞团的细胞， 有自我更新和多向分化潜能，可以分化为内、中、外 三个胚层的各类细胞。
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干细胞治疗中的难点
异体移植的免疫排斥反应
解决途径：自身体细胞核移植（治疗性克隆） 干细胞基因改造 采用自身干细胞
成瘤性的危险
胚胎干细胞植入动物体内会形成畸胎瘤，如何防止干细胞移植后 可能因分化不彻底形成肿瘤，是必须解决的问题。 解决途径：完善定向诱导分化方法 改进筛选纯化技术
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治疗性克隆 （体细胞核移植）
胚胎干细胞可在体外 诱导分化形成各种成体细胞
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胚胎干细胞体外诱导分化
外源诱导因子诱导ES细胞分化
诱导因子：维甲酸(RA)、骨形成蛋白BMPs)、成纤维 细胞生长因子(FGFs)等
转基因诱导ES细胞分化
用转基因技术使某种促分化基因在ES细胞中表达、调 节其分化
与其他细胞共培养诱导ES细胞分化
创造细胞分化的微环境
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胚胎早期发生：囊胚形成 （囊胚内细胞团）
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排卵、早期胚胎发生 (囊胚形成)
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胚胎干细胞的分离和建系
将囊胚内细胞团的细胞通过体外培养产生 未分化的细胞克隆，建立胚胎干细胞系

1981年Evans 和 Martin 首次成功分离和建立 小鼠胚胎干细胞系 1998年Thomson 等首次成功分离和建立人胚 胎干细胞系
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人胎胰腺的 nestin 阳性细胞的分布
免疫组化技术显示nestin阳性细胞
nestin 阳性细胞位于胰腺小导管壁及其相连的原始细胞团
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分离胎胰导管和细胞团
在EHAA培养液（含2% FBS ）中进行原代培养
在 EHAA 培养液中的 胎胰导管和细胞团
培养48小时后细胞贴壁 并开始铺开
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血液病的细胞治疗
如白血病的细胞治疗
造血干细胞移植：
自体移植（脐带血造血干细胞） 无排斥反应 同系移植（同卵孪生之间骨髓 造血干细胞） 一般无排斥反应 同种移植（人与人之间骨髓造血干细胞） 有排斥反应（供、受者组织相容性抗原不同） 需组织配型、选择供者（骨髓库）； 抑制受者的免疫应答、诱导免疫耐受。
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成体干细胞的功能
自然条件下成体干细胞倾向于分化成所 在组织的细胞，参与组织更新和损伤修 复； 外界条件诱导下成体干细胞可横向分化 成其他组织的细胞，参与这些组织的损 伤修复。
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造血干细胞的分化
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表皮干细胞的分化
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干细胞应用前景
细胞治疗 组织工程 药物筛选 发育研究 基因功能研究
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胚胎干细胞体外诱导分化
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成体干细胞
adult stem cells
又称 组织干细胞 tissue stem cells
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成体干细胞的概念
成体干细胞又称组织干细胞，传统的观念认为 它们是存在于成体组织的未分化细胞，现在认 为也包括未成年动物的组织干细胞，它们具有 不断增殖和自我更新能力、又具有多向分化潜 能。 如造血干细胞、骨髓间质干细胞、神经干细胞、 脂肪干细胞、上皮干细胞、胰腺干细胞、肝干 细胞等
细胞治疗 cell therapy
细胞治疗是指将正常或遗传改造过的人体细胞直接 移植或输入患者体内，以达到替代受损细胞、治疗疾 病的目的。利用干细胞及其分化细胞进行细胞治疗是 干细胞临床应用的重要研究方向。 胚胎干细胞和成体干细胞都能用于细胞治疗，但目 前只有少数成体干细胞在细胞治疗上己开始取得临床 疗效，大多数的干细胞治疗还在实验阶段。
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我们的实验:
人胎胰腺 nestin阳性细胞的分离、体外培养和 生物学特性检测（目的是确认 NIPs是胰腺干细 胞）； 体外诱导分化 NIPs形成能产生胰岛素的β细胞； 类胰岛细胞团 (ICCs)异种体内移植 — 糖尿病的 干细胞治疗实验研究。
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第一个实验：
人胎胰腺 nestin阳性细胞( NIPs )的分离、 体外培养和生物学特性检测
成体干细胞 adult stem cells
成体干细胞是处于干细胞状态的成体细胞，包括 成年和未成年动物组织中的各种干细胞，因此又称为 组织干细胞。如神经干细胞、 造血干细胞 、 骨髓间 质干细胞、上皮干细胞 、肝干细胞、胰腺干细胞等。
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胚胎干细胞
embryonic stem cells （ES细胞）
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我们实验室的一项工作 胰腺干细胞的 β 细胞分化 与 I 型糖尿病的干细胞治疗
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I 型糖尿病的治疗
外源胰岛素治疗 胰腺或胰岛移植 干细胞治疗：
胚胎干细胞 胰腺干细胞 诱导分化成 β 细胞 细胞移植 基因导入使其表达胰岛素 细胞移植 诱导分化成 β 细胞 细胞移植
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胰腺干细胞的标志
1990年，Lendahl 等人发现神经干细胞中存在一种新的中 间丝蛋白—巢蛋白（nestin），现在 nestin已是公认的神经 干细胞标志之一。 2000年，Hunziker 和 Stein 发现胰腺导管和胰岛中也存 在 nestin阳性细胞。 2001年， Zulewski等人从胰腺中分离到nestin阳性细胞， 将其命名为NIPs（ nestin-positive islet-derived progenitor cells ），并发现具有多向分化潜能 ( multipotential )，在体 外可自发形成类胰岛细胞团（ islet-like cell clusters , ICCs）. 因此，人们相信nestin可能也是胰腺干细胞的标志。但 是，NIPs是否确实是胰腺干细胞，能否用于细胞治疗必须进 一步证实。2001年起，我们为此做了一点实验。