课时分层集训训(三十五)(建议用时：45分钟)A组基础达标1．(2018·广东惠州模拟)日前微博传言手机细菌比马桶多。
如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。
回答下列相关问题：(1)该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、______________。
(2)据图，两电视台均采用____________法接种，该方法需要________(多选)。
A．接种环 B．酒精灯C．移液管D．涂布器E．无菌水(3)通过观察菌落的________，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。
两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是：__________________________。
(4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10 mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1 mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为________个/平方厘米。
该实验对照组该如何设置______________________。
[解析](1)微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。
(2)根据图形分析，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。
(3)不同的菌落形态、大小不同，图示两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。
两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同。
(4)根据提供的数据进行计算，某手机屏幕的细菌数＝(48＋50＋52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)＝2×104(个/平方厘米)。
[答案](1)氮源和无机盐(2)稀释涂布平板BCDE(3)形态、大小手机的取样和马桶的取样都不相同(4)2×104取培养基涂布0.1 mL无菌水进行培养2.如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。
回答下列问题。
(1)在________(填图中编号)区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是________个细菌。
据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是________(用编号表示)。
(2)下表是某微生物培养基成分。
②若要鉴别纤维素分解菌，可用________法，若要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入________。
[解析](1)从图中可知，②号区域出现了单个菌落；1个菌落最初是由1个细菌形成；根据线条数量可判断，划线的顺序依次是①→③→②。
(2)自生固氮菌是异养生物，能自身固氮而获得氮源，但自身无法获得碳源，因而培养基中应添加碳源去掉氮源。
鉴别纤维素分解菌可用刚果红染色法，要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入酚红指示剂。
[答案](1)② 1 ①→③→②(2)①碳源氮源②刚果红染色酚红指示剂3．(2016·四川高考)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。
(1)图中选择培养基应以________为唯一氮源；鉴别培养基还需添加________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成________色。
(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。
该过程采取的接种方法是________，每克土壤样品中的细菌数量为________×108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较________。
(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。
突变基因转录的mRNA中，终止密码为________，突变基因表达的蛋白含________个氨基酸。
[解析](1)脲酶能够催化尿素水解释放出氨和二氧化碳，因此选择培养基中应以尿素为唯一氮源。
挑取单菌落接种到加有酚红指示剂的鉴别培养基中，培养一段时间后，菌落周围的氨增加，pH升高，酚红指示剂将变红。
(2)该过程采取的接种方法为稀释涂布平板法。
利用稀释涂布平板计数法对细菌进行计数时，应选择菌落数在30～300的平板，因此平板上长出的细菌菌落平均数为(156＋178＋191)÷3＝175个。
每克土壤样品中的细菌数为175÷0.1×105＝1.75×108。
血细胞计数板计数法能将死细胞计算在内，而稀释涂布平板计数法只能计数活细胞(只有活细胞才能在平板上生长)，故一般血细胞计数板计数法要比稀释涂布平板计数法的结果大。
(3)箭头处插入70个核苷酸，箭头后密码子的解读方式为*AG，UGA，GAA……对比3种终止密码可发现，此处的终止密码为UGA。
从起始密码到终止密码之前共有273＋72个碱基，因此突变基因表达的蛋白含115个氨基酸。
[答案](1)尿素酚红红(2)稀释涂布平板法1.75 少(3)UGA 1154．(2018·广西桂林第一次联合调研)有机磷农药是用于防治植物病虫害的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少品种对人、畜的毒性很强，人误食后如不及时医治就会危及生命，某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物。
请回答下列问题：【导学号：41780165】(1)为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在含有碳源、氮源及________________等的选择培养基上添加____________________进行选择培养。
(2)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1 L含20 mg有机磷农药的相同培养液中培养(培养液中其他营养物质充裕、条件适宜)，观察实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物________(填“甲”“乙”或“丙”)作为菌种进行后续培养，理由是__________________________________。
(3)制备固体培养基的基本步骤是计算→________→溶化→分装→加棉塞→包扎→________→倒平板。
(4)若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用____________直接计数，也可选用____________________________法统计活菌数目。
[解析](1)微生物生长所需要的营养一般包括水、无机盐、碳源和氮源。
因筛选能降解有机磷农药的微生物，故培养基中需添加适量的有机磷农药。
(2)从观察实验开始到微生物停止生长；丙所用时间最短，说明其对有机磷农药的降解能力较甲、乙强。
(3)制备固体培养的基本步骤是计算→称量→溶化→分装→加棉塞→包扎→高压蒸汽灭菌→倒平板。
(4)菌体数测定可通过显微镜利用血细胞计数板直接计数，也可以利用稀释涂布平板法统计活菌数量。
[答案](1)水和无机盐有机磷农药(2)丙微生物丙分解有机磷农药的能力比甲、乙强(3)称量高压蒸汽灭菌(4)血细胞计数板稀释涂布平板5．2016年7月郑州市卫生计生委发布的第3期卫生监测信息显示有15家美容美发场所的毛巾、理发(美容)用具大肠杆菌严重超标。
如图甲为大肠杆菌含量检测操作简图，图乙为伊红美蓝培养基配方。
图甲图乙回答下列相关问题：(1)图甲中滤膜的孔径应________(填“大于”或“小于”)大肠杆菌。
受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？__________________。
(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入________(一种营养成分)，以及________。
待各成分都溶化后和分装前，要进行的是________和灭菌，对培养基进行灭菌的常用器具是________________________。
倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是______________________________。
伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于________培养基。
(3)用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线的目的是__________________________________________。
要检测样液中的大肠杆菌含量，取25 cm2毛巾样本，加5 mL蒸馏水，浸润半小时，然后在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL 样液；在37 ℃的培养箱中放置48小时，3个平板上的黑色菌落数分别为49、48和47。
据此可得出25 cm2毛巾样液中的活菌数为________。
[解析](1)图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌，滤膜过滤才能获得大肠杆菌，对不耐高温的试剂除菌时无法用高压蒸汽灭菌法，可以用滤膜过滤达到除菌目的。
(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入氮源以及琼脂。
配制的培养基在溶化后和分装前需要先进行调pH和灭菌。
高压蒸汽灭菌法常用高压蒸汽灭菌锅对培养基等进行灭菌。
倒平板后将平板倒置的主要原因是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。
从功能上划分，伊红美蓝培养基属于鉴别培养基。
(3)接种环灼烧灭菌后，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。
在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的菌落呈黑色，据题意可知，25 cm2毛巾样本中的活菌数为(49＋48＋47)÷3÷0.1×5＝2.4×103。
[答案](1)小于用滤膜过滤除菌(2)氮源琼脂调整pH 高压蒸汽灭菌锅防止培养血盖上的冷凝水落入培养基造成污染鉴别(3)将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 2.4×1036．(2018·河南郑州二测)某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。
将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。
能”)原因是__________。
(2)通常培养基用__________方法灭菌，培养皿用__________方法灭菌，待培养基冷却到__________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在__________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止______________________，以免造成污染。
(3)要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________就能大约推测出样品中活菌数。