和有机溶剂；
大大地提高了试验结果的准确 2、由于MTS被还原后生成的 2、检测快速；
性
甲瓒产物颜色较深，吸光度值 3、灵敏度高，甚至可以测
变异范围大，使测定更加敏感 定较低细胞密度；
优点
准确，阴/阳性的判断也比较 4、重复性优于MTT；
容易；
5、对细胞毒性小；
3、快速，作用时间2-3小时为 6、为1瓶溶液，毋需预制，
了洗涤细胞；ຫໍສະໝຸດ 样很容易变色，细胞固定染色后 感性、客观性、试剂成本及测定速度都优于
2、检测快速；
在96孔板中可以放置较长时间， MTT法；
3、灵敏度高，甚至 因而受测定时间的影响较小； 2、常用语NK细胞、CTL细胞活性检测
可以测定较低细胞 2、用Tris-base溶液溶解的SRB也
密度；
可稳定较长时间。因此不同时间
AlamarBlue
细胞增殖过程中，细胞体内的环境由氧化环境 变化成还原环境，呼吸链中的NADPH/NADP, FADH/FAD, FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。 alamarBlue的活性成分resazurin（刃天青）是一种无 毒、可透膜的蓝色染料，有微弱的荧光性，它作为一 种氧化还原指示剂，被细胞内吞后，在细胞质中被以 上这些代谢中间体还原，其还原产物resorufin呈现出 粉红色并有很强的荧光性，最后可用普通分光光度计 或荧光光度计进行检测，吸光度和荧光强度与活性细 胞数成正比，因而可作为细胞增殖和细胞毒性定量检 测的一个理想的指示器。
MTT
MTS
CCK-8
活细胞线粒体中的琥珀酸 MTS是一种新合成的四唑类化
CCK-8在电子载体1-甲
脱氢酶能使外源性MTT还原为 合物，与MTT原理相同，MTS 氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二
水不溶性的蓝紫色结晶甲臜 也是通过被活细胞内线粒体内 甲酯（1-Methoxy PMS）的 （Formazan）并沉积在细胞 的多种脱氢酶还原成橙黄色的 作用下被细胞线粒体中的脱
最佳，而MTT需4小时；
即开即用；
4、重复性好，还原产物稳定 7、水溶性，不需换液，尤
其适用于悬浮细胞
1、由于MTT经还原所产生的 1、试剂比较贵 甲臜不溶于水，需被溶解后才 能检测，对实验结果的准确性
缺点 产生影响；
2、不太适合悬浮细胞活性检 测
1、与MTT相比，CCK-8和 XTT的价格比较贵； 2、CCK-8试剂的颜色为淡 红色，与含酚红的培养基颜 色接近，不注意的话容易产 生漏加或多加
中，而死细胞无此功能。二甲 Formazan从而反映细胞活力情 氢酶还原为具有高度水溶性
基亚砜（DMSO）能溶解细胞 况。
原理 中的甲臜，用酶联免疫检测仪
的黄色甲臜产物 （Formazan）。生成的甲臜
在490nm波长处测定其光吸收
物的数量与活细胞的数量成
值，可间接反映活细胞数量。
正比。用酶联免疫检测仪在
下产生吸收峰，吸光值与细胞量 硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化氮唑蓝(INT)或
成线性正相关，故可用作细胞数 硝基氯化四氮唑蓝(NBT)形成有色的甲簪类化
的定量检测。
合物，在490nm或570nm波长处有一高吸收
峰，利用读取的OD值，经过计算即可得细胞
活性。
1、使用方便，省去 1、SRB染色后不会像MTT法那 1、与MMT比较，该法简便、灵敏度高，敏
在一定细胞数范围内，MTT结
450nm波长处测定其光吸收
晶形成的量与细胞数成正比。
值，可间接反映活细胞数量
。
1、简单、快捷，准确测定细 1、操作简单，比MTT高效， 1、使用方便，省去了洗涤
胞的增值反应，能避免由于人 产生水溶性的Formazan，无需 细胞，不需要放射性同位素
为操作因素造成的试验误差， 用DMSO溶解；
法，主要用来检测细胞增殖情况 靶细胞受到效应细胞的攻击而损伤时，细胞
。SRB是一种粉红色阴离子染 膜通透性改变，LDH可释放至介质中，释放
料，易溶于水，在酸性条件下可 出来的LDH在催化乳酸生成丙酮酸的过程中，
特异性地与细胞内组成蛋白质的 使氧化型辅酶I(NAD+)变成还原型辅酶
碱性氨基酸结合；在540 nm波长 I(NADH2），后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯
1、即用型的单组分试剂，只需加入培养基即可检测 细胞的增殖状况；产生的还原产物是水溶性的，与其 他常用的细胞增殖检测方法相比，不需要固定、洗涤 、提取的步骤； 2、灵活：可通过分光光度计或荧光光度计检测； 3、性价比高：可用于高通量分析； 4、安全：对细胞无毒、无害，不影响细胞代谢、细 胞因子分泌、抗体合成等，对人体和环境也无毒无 害； 5、高灵敏：最低可检测50个细胞； 6、稳定：适用于对细胞增殖状况的连续观察； 7、经济：无需裂解细胞，细胞可继续培养或用于其 他实验
XTT
XTT作为线粒 体脱氢酶的作用底 物，被活细胞还原 成水溶性的橙黄色 甲臢产物。当XTT 与电子偶合剂（例 如PMS）联合应用 时，其所产生的水 溶性的甲臢产物的 吸光度与活细胞的 数量成正比。
SRB
LDH释放法
磺酰罗丹明
乳酸脱氢酶(LDH)是活细胞胞浆内含酶
B(Sulforhodamine B，SRB)比色 之一。在正常情况下，不能透过细胞膜。当
1、注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。 细胞浓度过高或孵育时间过长，会导致继发性还原反 应，产生无色和荧光消失； 2、 孵育时，须避光
4、重复性优于MTT 点固定的96孔细胞培养板可在同
一时间测定，测定的吸光值结果
不会受到明显影响；
3、虽然SRB法比其他检测方法
操作步骤繁琐，但是由于时间可
以自己掌握，不受限制
1、XTT水溶液不稳 1、操作繁琐 定，需要低温保存 或现配现用
1、影响因素较多，诸如培养基、pH值、温 度、底物显色时间和加终止剂等，实际操作 不易掌握